刘兰英
- 作品数：10 被引量：54H指数：4
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- 胚胎干细胞体外分化为心肌细胞诱导因素的探讨被引量：28
- 2000年
- 目的：用胚胎干细胞（ＥＳＣ）体外诱导分化为心肌细胞，从分子水平上研究早期心脏发育相关基 因及其功能。方法：（１）胚胎干细胞的培养。（２）胚胎于细胞的分化培养。（３）被分化的心肌细胞鉴定：ＲＮＡ的 提取；心脏特异性引物的合成和ＲＴ－ＰＣＲ反应；探针标记、纯化和比放射活性测定；ＲＮＡ斑点杂交。结果：用最 适条件培养液对ＦＳＣ定向诱导分化，可使８０％以上的ＥＳＣ分化为心肌细胞。心肌细胞以同步的方式进行收缩。 反转录ＰＣＲ和斑点杂交的结果显示：心肌在早期发育就开始表达其特异性基因。结论：胚胎干细胞体外能诱导 分化为心肌细胞。胎牛血清、二甲基亚砜和维甲酸的浓度及它们之间的组成不同，对ＥＳ细胞定向诱导为心肌 细胞均有影响。最佳诱导条件是用２ｎｍｏｌ／Ｌ维甲酸、０．６％二甲基亚砜和２０％胎牛血清组成的条件培养液。
- 刘兰英杨琨朱振宇刘玉川余细勇银巍汤建马涧泉顾军
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞ESC
- 日本血吸虫虫卵及其总RNA的快速分离与纯化被引量：2
- 1997年
- 本文采用匀浆──分级过滤──中速低温离心──反复洗涤法，在3个小时内从感染免肝组织中分离、纯化具有生物活性的高纯度日本血吸虫虫卵。该虫卵用改进的异硫氰酸胍──酚──氯仿一步法抽提，可在一个半小时内提取出分子完整的RNA。此两种方法经济简便，快速易行，效率高。
- 刘兰英余新炳罗树红方建民
- 关键词：日本血吸虫虫卵RNA纯化
- 血吸虫卵壳蛋白基因的特性被引量：2
- 1997年
- 刘兰英
- 关键词：日本血吸虫血吸虫卵曼氏血吸虫氨基酸残基埃及血吸虫酪氨酸
- 快速分离和纯化感染6wk兔肝组织中的日本血吸虫虫卵被引量：9
- 1997年
- 从感染兔肝组织中分离、纯化具有生物活性的日本血吸虫虫卵，是分子生物学研究的基本需要。本文采用匀浆—分级过滤—中速低温离心沉淀—反复洗涤法，获得高纯度、具有活性的虫卵，回收率达71％，毛蚴孵出率达90％以上。本方法经济简便、快速易行、效率高、适用于大批量操作。
- 刘兰英余新炳罗树红
- 关键词：日本血吸虫虫卵纯化
- 血吸虫卵壳蛋白基因的特性被引量：4
- 1997年
- 血吸虫卵壳蛋白基因(ESGs)是能被调控的雌虫特异性基因,它不含内含子,具有阶段特异性、性别特异性和雌虫特异性表达的特点,其表达产物——卵壳蛋白可能诱导宿主产生抗卵免疫。本文综述了曼氏血吸虫、埃及血吸虫和日本血吸虫的卵壳蛋白基因的基本结构及其表达产物的特性和生物学潜能的研究进展。
- 刘兰英
- 关键词：血吸虫基因分子结构
- 人类心脏发育相关基因的初步筛选被引量：2
- 1999年
- 目的：从人胎儿心脏ｃＤＮＡ文库和成人心脏ｃＤＮＡ文库，通过差减杂交，筛选心脏发育相关基因。方法：（１）用２３周和２７周的人胎心脏组织构建２个ｃＤＮＡ文库，分别命名为ｉｂＦ和ＬｉｂＳ，用成人心脏构建了１个ｃＤＮＡ文库，命名为ＬｉｂＡ。（２）探针的合成、纯化和比放射活性测定。（３）差减杂效和牧民性探针的富集。（４）菌落原位和。（５）差减阳性克隆的斑点杂交。
- 刘兰英顾军汤建马涧泉
- 关键词：信使先天性心脏病原位杂交CDNA文库
- 日本血吸虫卵壳白基因的体外扩增
- 1997年
- 根据日本血吸虫卵壳蛋白基因的已知序列，借助计算机核酸序列软件分析，设计了一对引物。在5’端引物中引入HindⅢ酶切位点和起始密码子，在3’端引物中引入EcoRⅠ酶切位点和终止密码子，用PCR方法对日本血吸虫虫卵、雌虫、雄虫的基因组DNA进行体外扩增。1％琼脂糖凝胶电泳显示：雌虫和虫卵的基因组DNAPCR产物在618bp处出现特异扩增条带，而雄虫及对照组则无此条带出现。该条带与预期长度相符，并对PCR产物进行纯化和酶切。
- 刘兰英余新炳罗树红
- 关键词：日本血吸虫基因聚合酶链反应
- 脊椎动物心脏发育相关基因的研究进展被引量：2
- 2000年
- 脊椎动物的心脏是一个复杂的腔状结构 ,由中胚层的祖细胞衍生而来。在心脏发育过程中 ,相关基因的正常表达是有功能心脏形成的关键。探究心脏发育相关基因 ,为了解先天性心脏病的发病机制和干预性治疗提供基础。本文就心脏发育的分子机制及其同源盒、螺旋环螺旋转录因子、Ⅵ胶原蛋白、活性T细胞核因子等相关基因的研究作一综述。
- 刘兰英马涧泉顾军
- 关键词：基因表达胚胎学心脏发育
- 日本血吸虫卵壳蛋白基因的克隆与表达被引量：5
- 1998年
- 目的：在体外高效表达具有生物学和免疫学活性的日本血吸虫卵壳蛋白，探讨其作为抗卵免疫靶抗原的可能性。方法：采用ＰＣＲ技术扩增日本血吸虫卵壳蛋白基因，将其克隆到ｐｃＤＮＡ３质粒，在ＨｅＬａ细胞中高效表达，对表达产物进行鉴定和免疫原性研究。结果：特异扩增日本血吸虫卵壳蛋白基因编码序列（６１８ｂｐ），构建了真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３／ＥＳＧ，在ＨｅＬａ细胞中高效表达卵壳蛋白，其表达量高达２４．４％，分子量约为２２ｋＤａ，ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析显示，表达蛋白能与感染兔血清及虫卵免疫血清产生较强的免疫反应；此外，表达蛋白还能特异刺激经虫卵免疫后的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞增殖，其转化率达４４．５７％。结论：成功地构建重组质粒ｐｃＤＮＡ３／ＥＳＧ，并在ＨｅＬａ细胞中高效表达卵壳蛋白基因。
- 刘兰英余新炳
- 关键词：日本血吸虫克隆
- PS-2基因的克隆及其在肝癌中的表达被引量：1
- 2000年
- 利用荧光差异显示技术比较了正常肝、肝硬化和肝癌组织 m RNA的表达 ,1 4个有差异的条带通过 Northern blot分析表明其中 9个为阳性 .令人感兴趣的是一个～ 5 0 0 bp的 c DNA片段 ,它在正常肝和肝硬化中低表达 ,在肝癌组织中高表达 .通过测序 ,发现该片段与 PS- 2 ( presenilin- 2 )基因有 94 %的同源性 .PS- 2基因的突变与早发性阿尔茨海默氏症有关 ,但在肝癌发生中的作用未明 .也许 PS-
- 刘予川明文玉银巍刘兰英马涧泉汤健顾军
- 关键词：肝癌基因克隆基因表达
