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排序方式：

用于检测仔猪致病菌的23S rRNA基因芯片的研制被引量：3: 2010年; 以副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、猪链球菌等12种仔猪致病菌为目标细菌,23SrRNA基因为靶基因,从GenBank中下载其23SrDNA全序列,在其变异区设计特异性探针,在保守区设计通用引物。通过序列分析、PCR靶标与探针杂交试验,建立了有13条寡核苷酸探针和2对通用引物的仔猪常见致病菌基因芯片检测方法。以参考菌株粗提基因组DNA的10倍系列稀释模板做PCR,扩增产物与探针杂交,检出芯片的灵敏度为100fg。对33个参考菌株用芯片检测,结果有1例不正确,只鉴定到属;在61个野外分离株中,55株的芯片检测结果与生化或测序结果一致,有6例不一致,符合率为90%。初步研究证明,该检测方法能快速、有效地鉴定多种仔猪常见致病菌,但要区分某些细菌的致病株与非致病株,还要检测毒力/毒素基因。; 伍诚意曹峰子梁之昶章振华杨兵周宏专季海峰陈小玲; 关键词：仔猪致病菌 RRNA基因寡核苷酸探针

发酵床养殖对猪常见疾病防控效果的影响: 为评估发酵床模式对安全养猪的影响，对4个猪场的猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体和致病性大肠杆菌、沙门菌、猪链球菌及寄生虫携带情况进行了检查。结果显示：发酵床与水泥地2种模式饲养猪的病毒病抗体水平和寄生虫检查结果差异不明显...; 苏霞王海宏步卫东夏永恒伍诚意陈小玲杨兵; 关键词：饲养模式发酵床疾病防控

反向斑点杂交检测仔猪常见致病菌初探: 为在没有基因芯片点样仪和扫描仪的诊断实验室操作低密度DNA反向杂交检测,将已建立的玻片为基质的芯片检测方法转换成膜基质反向斑点杂交.将玻片为基质的芯片所用25-30 mer探针修改加长到30-38 mer,点于0.2μm...; 曹峰子伍诚意周宏专陈小玲; 关键词：仔猪致病菌反向斑点杂交; 文献传递

一株副猪嗜血杆菌的分离鉴定被引量：1: 2009年; 伍诚意步卫东陈小玲王小莺季海峰; 关键词：副猪嗜血杆菌多发性浆膜炎全身性疾病上呼吸道纤维素性养猪生产

发酵床养殖对猪常见疾病防控效果的影响被引量：2: 2011年; 为评估发酵床模式对安全养猪的影响,对4个猪场的猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体和致病性大肠杆菌、沙门菌、猪链球菌及寄生虫携带情况进行了检查。结果显示:发酵床与水泥地2种模式饲养猪的病毒病抗体水平和寄生虫检查结果差异不明显;发酵床猪群的致病菌检出率略低于水泥地面养殖猪群。从半年间的试验数据和观察看,与水泥地面相比,发酵床养殖没有对猪常见疾病的防控产生不良影响。; 苏霞王海宏步卫东夏永恒伍诚意陈小玲杨兵; 关键词：发酵床养猪疫病

仔猪常见12种致病菌的23S rRNA基因序列分析: 2008年; 以107条从NCBI下载和测序的12种仔猪常见致病菌的23S rRNA基因序列为研究对象,运用DNASTAR软件进行系统发育分析。结果显示:以各种细菌的23S rRNA基因代表序列所进行的种间序列分析结果与伯杰氏细菌分类手册和http://www.wiki.cn/wiki/细菌分类表的分类结果一致,也与这12种菌的16S rRNA基因序列分类结果一致。因此,在23S rRNA基因序列保守区设计通用引物,在其变异区设计各种细菌特异性探针,用PCR捕捉被检样品中未知细菌的23S rDNA片段并与种特异性23S rRNA基因探针进行杂交,有可能将未知细菌鉴定到种。; 伍诚意陈小玲王小莺梁之昶相磊章振华季海峰; 关键词：RRNA基因序列系统发育分析仔猪

用反向斑点杂交方法检测猪常见致病菌: 2010年; 目的:建立检测猪常见致病菌的反向斑点杂交方法。方法:将23S rRNA基因芯片用的针对12种细菌的25～30 mer探针加长到30～38 mer,2对通用引物序列不变。用地高辛标记下游引物,以尼龙膜为载体制备膜芯片,检验探针/膜杂交的特异性和敏感性;另外设计1条大肠杆菌K88基因探针、一段带K88探针的报告基因和1对报告基因的反向PCR引物,在PCR体系中增加封口的K88报告基因和反向引物对,被检样品扩增后进行膜杂交。结果:修改的13条探针与参考目标菌株在膜上成特异性杂交,对52个参考菌株和野外分离株的检测准确率为92%;膜杂交的敏感性与玻片芯片接近,最小检出量为100 fg DNA;在尼龙膜上增加K88探针,与3重PCR产物杂交,可以检测到大肠杆菌K88毒力基因。结论:建立的反向斑点杂交方法简便快速,检测成本低,可用于仪器设备不足的实验室,同时可以加入检测如大肠杆菌K88等致病基因,提高基于保守基因的芯片的诊断能力。; 曹峰子伍诚意宋勤叶江洪梁之昶季海峰陈小玲; 关键词：反向斑点杂交 RRNA基因反向PCR

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伍诚意