黄雨婷
- 作品数:36 被引量:99H指数:7
- 供职机构:贵州省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省科技攻关计划卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- 基于线粒体细胞色素氧化酶亚单位3基因鉴定贵州省首例输入性卵形疟病例被引量:2
- 2019年
- 提取贵州省首例镜检诊断为输入性卵形疟病例的血样DNA,以疟原虫的核糖体RNA小亚基(SSU r RNA)和线粒体细胞色素氧化酶亚单位3基因(cox3)为靶标,分别设计属、种特异性引物及种特异性引物, PCR扩增、测序,比较2种引物对疟原虫种类PCR鉴定的特异性。以卵形疟原虫wallikeri亚种参考序列(GenBank登录号:HQ712053.1)和curtisi亚种参考序列(GenBank登录号:HQ712052.1)为模板,应用DNAMAN V6软件对扩增序列进行Blast比对。利用Mega 7.0.26软件,采用邻接法,基于疟原虫线粒体cox3基因DNA序列构建系统进化树。PCR结果显示,基于疟原虫SSU r RNA属、种特异性引物扩增,仅获得1 200 bp的属特异性条带,未出现种特异性条带。基于疟原虫cox3种特异性引物扩增,可获得880 bp的目的条带。Blast比对结果显示,PCR扩增获得的cox3基因序列与卵形疟原虫wallikeri亚种和curtisi亚种的序列一致度为99.4%和97.4%。
- 黄雨婷黄天谊卢丽丹佘丹娅李世军
- 关键词:PCR鉴定
- 单管单轮多重PCR检测4种疟原虫混合血样被引量:13
- 2015年
- 目的建立一种可同时检测4种疟原虫单一及混合感染的单管单轮多重PCR技术。方法在快速巢式PCR的基础上,设计折叠引物,优化PCR反应试剂的主要组分浓度及各条引物的退火温度,建立折叠引物多重PCR法(FP-PCR)。利用优化后的FP-PCR法,对间日疟原虫(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(P.falciparum)、卵形疟原虫(P.ovale,包括wallikeri亚种)和三日疟原虫(P.malariae)的单一及混合疟原虫DNA模板进行检测,分析该方法的敏感性和特异性。结果在7次重复实验中,4种疟原虫单一感染检出的最低浓度均接近1个/μl血。此外,在检测2~4种原虫以高、低密度相差100倍的模拟混合感染的滤纸血样中,FP-PCR法正确检出每个组合的所有虫种的成功率为68%(57/84)。在10份健康人滤纸血样中,FP-PCR法除产生少量二聚体外无任何扩增条带。结论 FP-PCR法仅需单管单轮扩增即可同时检测4种人疟原虫单一或混合感染,为疟疾的监测和筛查提供了简便、可靠的诊断方法。
- 黄雨婷佘丹娅卢丽丹张念恒黄天谊
- 关键词:多重PCR恶性疟原虫疟疾诊断
- 贵州省首例输入性卵形疟病例的鉴定
- 2020年
- 目的对1例输入性疟疾病例进行鉴定。方法采集病例外周血制作滤纸血样和血涂片。血涂片染色后镜检,同时进行疟疾快速诊断试剂盒(RDT)检测,滤纸血样进行PCR,PCR扩增片段测序后在GenBank中进行Blast分析。结果RDT检测提示非恶性疟的疟原虫阳性,血涂片镜检可见卵形疟原虫。PCR扩增出大小为880 bp的卵形疟特异条带,Blast分析显示与卵形疟原虫wallikeri亚种的cox3部分基因序列同源性为99.4%。结论依据RDT、镜检、PCR和序列分析等实验室检测结果,结合其流行病学资料,该例输入性疟疾病例确诊为贵州省首次由境外输入的卵形疟病例,且感染的疟原虫虫种是卵形疟原虫wallikeri亚种。
- 黄雨婷黄天谊卢丽丹佘丹娅
- 关键词:输入性疟疾血涂片镜检巢式PCR
- 输入性疟疾再传播风险评估指标体系的构建被引量:12
- 2022年
- 目的 构建输入性疟疾再传播风险评估指标体系。方法 通过文献综述、专题讨论初步构建输入性疟疾再传播风险评估指标体系。选择26名疟疾防治专家,采用德尔菲法对指标体系开展2轮专家咨询,根据专家对每项指标的熟悉程度、判断依据和重要性评价计算专家积极系数、专家权威系数、专家协调系数、各指标变异系数,根据上述结果进行指标筛选并计算各指标权重;采用Cronbach’sα系数评价指标体系信度,采用专家权威程度系数评价指标体系的内容效度,采用KMO检验和因子分析评价指标体系的结构效度。结果 共23名专家完成2轮专家咨询,最终构建了一个包含3个一级指标、7个二级指标、21个三级指标的输入性疟疾再传播风险评估指标体系。第2轮专家积极系数(100.00%vs.88.46%)和专家协调系数(0.372 vs. 0.286, P均<0.01)均高于第1轮。第2轮专家咨询后,各级指标专家权威程度系数为0.757~0.930,一、二、三级指标变异系数分别为0.098~0.136、0.112~0.276、0.139~0.335;指标体系整体Cronbach’sα系数为0.941;一(KMO值=0.523,χ^(2)=18.192,P <0.05)、二(KMO值=0.694,χ^(2)=51.499,P <0.01)、三级指标(KMO值=0.519,χ^(2)=477.638,P <0.01)KMO值均有统计学意义;三级指标6个主成分累积贡献率为84.23%。传染源、传播条件及防控能力3个一级指标归一化权重分别为0.337、0.333和0.329;归一化权重居前3位的二级指标依次为输入性病例数及虫种(0.160)、输入性病例入境及就诊情况(0.152)、媒介种类及密度(0.152);归一化权重值居前5位的三级指标依次为输入性病例虫种(0.065)、媒介种群(0.064)、患者发病至就诊时间间隔(0.059)、输入性病例数(0.056)及从就诊至确诊时间间隔(0.055)。结论 成功构建了输入性疟疾再传播风险评估指标体系,为消除后开展输入性疟疾再传播风险评估和加强重点风险因素防控提供了科学依据。
- 兰子尧李杨黄雨婷师伟芳佘丹娅蒋智刘磊
- 关键词:输入性疟疾再传播风险评估指标体系德尔菲法
- 新建生物安全三级实验室废弃物管理模式探讨被引量:1
- 2022年
- 生物安全三级实验室废弃物管理和处置是不容忽视的生物安全重大板块,妥善管理和处置实验室产生的废弃物对保护人员及周围环境安全至关重要。国家颁布了一系列针对生物安全三级实验室废弃物管理的规定和标准,建设较早且运转成熟的一批生物安全三级实验室已形成较为完善的管理体系,但新建的生物安全三级实验室各项工作均处于摸索和学习的阶段。文章探讨的重点是新建的生物安全三级实验室如何在符合国家规定和标准的前提下,选择性学习其他实验室的管理经验,并结合笔者所在实验室工作实际制定出适合自己的管理和运转废弃物的管理体系,希望为其他实验室管理提供参考。
- 曾丹黄雨婷叶绪芳吴长艳彭蕾苑洁张清芳
- 关键词:生物安全废弃物管理
- 铁皮石斛活性成分与鉴别技术研究进展被引量:3
- 2022年
- 随着铁皮石斛被纳入国家药食同源目录中,铁皮石斛食品市场需求越来越大,一些不法保健食品生产企业使用非铁皮石斛原料冒充生产铁皮石斛保键食品的现象时有发生,而铁皮石斛鉴别技术与活性成分研究主要集中在原药材,保健食品中对铁皮石斛原料的标准、源性真实性与活性成分的评价,缺乏相应的检测技术与标准,存在石斛保健产品质量检测瓶颈问题。综述铁皮石斛鉴别技术与活性成分研究进展,基于DNA的铁皮石斛源性成分定性检测技术,结合铁皮石斛主要活性成分化学指纹图谱,进行联合分析,提出保健食品中铁皮石斛源性成分真实性鉴别与活性成分评价的技术可行性策略,既解决保健食品标识性含量是否符合的问题,又能辨别活性成分是否具有源性真实性问题,为相关技术监督部门提供理论参考。
- 陈庆园黄雨婷徐国红吴安忠韦小宝郭华
- 关键词:铁皮石斛活性成分
- 折叠引物多重PCR疟疾分子诊断试剂盒及其检测方法
- 本发明公开了一种折叠引物多重PCR疟疾分子诊断试剂盒及其检测方法。所述试剂盒由含镁模板缓冲液及无镁单一组合试剂组成,包含了板DNA制备和折叠引物PCR反应全套试剂。所述折叠引物以疟原虫Cyt b基因作为靶基因,在疟原虫属...
- 黄天谊黄雨婷张念恒佘丹娅
- 文献传递
- 2014-2016年贵州省市(州)级疟疾实验室检测能力的评价被引量:8
- 2017年
- 目的贵州省级疟疾参比实验室对市(州)级疟疾实验室上送的血涂片和滤纸血样进行复核,评价市(州)级疟疾实验室的检测能力。方法2014-2016年,贵州省疟疾参比实验室通过镜检和巢式PCR分别对市(州)级疟疾实验室上送的血涂片和滤纸血样进行复核,评价上送的血涂片制作质量。以省级疟疾参比实验室镜检结果为标准,分析市(州)级疟疾实验室镜检的疟原虫阳性、阴性和虫种符合情况。分析省级疟疾参比实验室镜检和巢式PCR结果。结果 2014-2016年,市(州)级疟疾实验室共上送至省级疟疾参比实验室血涂片163份,经市(州)级疟疾实验室镜检,阳性84份,阴性79份,滤纸血样159份,上送率分别为100%(163/163)和97.6%(159/163)。血涂片制作、染色、清洁度及综合判定的合格率分别为58.9%(96/163)、75.5%(123/163)、72.4%(118/163)和69.9%(114/163),2016年血涂片制作和综合判定的合格率(71.3%、95.0%)均高于2014年(46.4%、46.4%)和2015年(48.1%、44.4%)(P<0.05)。2014-2016年,省级疟疾参比实验室与市(州)级疟疾实验室血涂片的镜检总符合率分别为67.9%(38/56)、66.7%(18/27)和88.8%(71/80),2016年总符合率高于2014年和2015年,差异有统计学意义(P<0.05);阳性符合率分别为81.3%(26/32)、70.0%(14/20)和96.9%(31/32),3年间差异无统计学意义(P>0.05);虫种符合率分别为46.9%(15/32)、65.0%(13/20)和81.3%(26/32),2014年虫种符合率与2016年比较,差异有统计学意义(P<0.05);阴性符合率分别为95.8%(23/24)、5/7和93.8%(45/48),3年间差异无统计学意义(P>0.05)。省级疟疾参比实验室镜检与巢式PCR检测结果均为阳性且虫种一致的占44.0%(70/159),均为阴性的占48.4%(77/159),结果不一致的占7.6%(12/159)。结论2016年市(州)级疟疾实验室血涂片综合判定合格率和镜检总符合率均高于2014和2015年,说明市(州)级疟疾实验室检测能力有提升。
- 佘丹娅佘丹娅卢丽丹黄雨婷黄雨婷耿燕
- 关键词:疟疾实验室镜检巢式PCR
- 一种预装PCR管的疟疾分子诊断试剂盒
- 本实用新型公开了一种预装PCR管的疟疾分子诊断试剂盒,包括盒体,所述盒体内部设置有底层托板和顶层托板,所述盒体两侧内壁上设置有下滑槽和上滑槽,所述底层托板和顶层托板通过滑轨分别安装在下滑槽和上滑槽内,在底层托板和顶层托板...
- 黄雨婷黄天谊张念恒佘丹娅
- 文献传递
- 贵州省疟疾实验室诊断能力与疫情风险分析被引量:2
- 2013年
- 目的评价贵州省疟疾报告病例的实验室诊断情况、基层实验室诊断能力与疟疾疫情风险。方法以贵州省近3年的疟疾疫情数据及省疾病预防控制中心疟疾实验室复核的血片和PCR检测结果进行实验室间比对分析。结果贵州省疟疾疫情从2008年开始逐年下降,年报告发病率从2008年的3.43/10万降至2010年的1.04/10万。2009~2011年全省92.26%的网报病例进行了镜检,省级实验室对县级镜检的血片进行抽检,阴性片符合率达100%(303/303),阳性片符合率达89.57%(103/115),镜检总体符合率为97.13%(406/418)。县级实验室镜检阳性病例的滤纸血,采用PCR方法检测,阳性率为96.00%(24/25),镜检阴性的病例或临床诊断为疟疾、疑似疟疾和不明原因的发热病人滤纸血,经PCR检测,阴性率为98.92%(92/93),县级实验室镜检结果与PCR法检测结果的总体符合率为98.31%(116/118)。结论经省级实验室镜检复核和PCR方法比对,县级实验室镜检结果的可靠性较高,特别是阴性结果更为可靠,阳性结果有10%的误诊,因此全省各级疾病预防控制及医疗机构,应当依据实验室检测结果对网报病例进行订正。
- 何平卢丽丹黄雨婷徐建军周光荣
- 关键词:疟疾PCR检测