雷佳文
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院油料作物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 农产品中黄曲霉毒素新型免疫分析技术研究
- 黄曲霉毒素(Aflatoxin，AFT)是主要由黄曲霉和寄生曲霉产生，自然分布极为广泛的一类毒性超强的化合物，也是目前公认的最强的致癌物质，世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构(IARC)于1993年将黄曲霉毒紊划分为Ⅰ...
- 雷佳文
- 关键词：农产品黄曲霉毒素
- 抗黄曲霉毒素单链抗体在毕赤酵母X-33中的表达被引量：3
- 2017年
- 为降低黄曲霉毒素单链抗体制备成本,提高单链抗体表达活性,利用获得的含抗黄曲霉毒素scFv基因的重组质粒pCANTAB 5E-scFv1A7,克隆出了scFv基因片段,并构建了酵母表达载体pPICZαA-scFv1A7,利用SacⅠ酶将重组载体线性化后插入到毕赤酵母X-33染色体基因组中,构建了pPICZαA-scFv1A7 X-33重组酵母,用0.8%甲醇诱导其分泌表达成功。间接竞争ELISA方法检测到该scFv对黄曲霉毒素B1的抑制率(IC50)值为4.5ng/m L,表明重组酵母表达产物scFv具有很好的抗原结合活性,可用于黄曲霉毒素的检测。
- 王婷雷佳文李培武张奇张文何婷
- 关键词：黄曲霉毒素单链抗体毕赤酵母
- 抗黄曲霉毒素M_1单链抗体基因克隆与蛋白结构模拟被引量：2
- 2012年
- 为构建抗黄曲霉毒素M1单链抗体(scFv)基因,并进行蛋白质结构模拟及理化特性分析。采用重叠延伸PCR方法,以能特异性分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B12为原料,构建其单链抗体基因,进行测序,采用生物信息软件进行氨基酸序列推导、结构预测以及理化性质分析。抗黄曲霉毒素M1scFv基因全长737 bp,对应245个氨基酸,单链抗体分子量约为25 897.4,等电点预测值6.90;二级结构显示抗黄曲霉毒素M1单链抗体含α螺旋38处,β折叠24处,延伸链74处,随机卷曲109处。三级结构建模显示重链(VH)和轻链(VL)的6个环区(CDR区),共同组成抗体的抗原结合区,符合scFv的结构特点,具有抗原结合位点的空间构象。构建了一个抗黄曲霉毒素M1scFv基因,应用生物信息学技术所获得的预测和分析结果为该单链抗体的进一步表达、纯化和活性研究提供信息。
- 李鑫李培武张奇张文雷佳文
- 关键词：黄曲霉毒素M1单链抗体
- 抗黄曲霉毒素单克隆抗体F(ab')2片段的制备与活性被引量：2
- 2013年
- 为剧毒靶标(黄曲霉毒素)绿色分析提供高效抗体,在已有抗黄曲霉毒素杂交瘤细胞株1C11的基础上,通过小鼠腹水法制备单克隆抗体,经胃蛋白酶酶解,制备F(ab')2片段,发现在优化条件37℃、pH4.1柠檬酸缓冲液中酶解4.5h,可高效制备F(ab')2片段。通过酶联免疫吸附法(ELISA)比较了抗体片段与原始抗体的识别活性,发现F(ab')2片段效价达到1∶320 000,是原抗体效价的1.5倍;灵敏度(IC50)为8.7pg/mL,保持了原抗体的抗原结合能力。
- 雷佳文李培武张奇张兆威丁小霞张文
- 关键词：黄曲霉毒素单克隆抗体活性
