陈婷芳
- 作品数：13 被引量：14H指数：2
- 供职机构：湖南师范大学更多>>
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- 果蝇唾液腺特异基因CG8419多克隆抗体的制备及检测
- 2011年
- 果蝇CG8419基因与脊椎动物中TRIM45基因为同源基因.以果蝇cDNA为模板通过PCR扩增出亲水性和特异性好的果蝇CG8419基因片段,将其克隆入表达载体PET-28a,构建出重组表达质粒PET-28a-CG8419.将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导出带His标签的重组融合蛋白.通过尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融合蛋白,然后再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.Western blot实验分别验证抗体的效价和特异性.果蝇胚胎抗体染色显示该基因在果蝇唾液腺中表达.
- 周煌唐雄卓闵璐陈婷芳彭夕洋王琨吴秀山王跃群
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 斑马鱼BSC14基因影响心血管发育的研究
- BSC14基因是我们实验室鉴定的一个心脏发育候选基因,目前尚未见任何功能研究的报道。我们通过整胚原位杂交技术鉴定了BSC14基因在胚胎发育中的时空表达谱:该基因在1细胞就有表达,受精后24 hpf表达于原始的心管,随着心...
- 陈婷芳邓云屈永贵王飞英吴静高晶于泽阳吴秀山王跃群
- 关键词：斑马鱼
- 文献传递
- 斑马鱼基因ATF4多克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- ATF4是含有bZIP结构域的ATF/CREB转录因子家族成员,对胚胎的发育以及细胞的增殖、分化有重要的调节作用。制备ATF4的多克隆抗体对于研究其在斑马鱼心脏发育过程中的作用有重要的意义。研究首先通过生物信息学方法,选择ATF4基因中特异性强、具亲水性的一段核苷酸序列(1 017 bp),通过PCR扩增,将片段重组到原核表达载体pET-28a,然后转化入Rosetta菌株中。经测序鉴定正确后,用IPTG诱导表达融合蛋白,以该融合蛋白免疫小鼠,获得ATF4多克隆抗鼠血清。对该多抗血清抗体进行验证,具有很好特异性和较高效价,可以用作Western-blotting、免疫印迹等试验分析。
- 李发祥杨荣陈婷芳唐雄卓赵碧峰江志钢张义李永青吴秀山
- 关键词：融合蛋白多克隆抗体
- 斑马鱼HFHG45基因影响心脏发育的研究
- HFHG45 基因是我们实验室鉴定的一个心脏发育候选基因,目前尚未见任何功能研究的报道.我们通过整胚原位杂交技术鉴定了HFHG45 基因在胚胎发育中的时空表达谱：该基因在1 细胞就有表达,受精后24 hpf 表达于原始的...
- 陈婷芳屈永贵王飞英吴静于泽阳高晶王跃群邓云吴秀山
- 关键词：斑马鱼心脏发育
- HSP-FLP重组质粒的构建及表达分析
- 2014年
- 为了制备用于在斑马鱼中热休克全身表达目的基因的转基因载体,通过分子克隆的方法从P{hsFLP}86E/TM6B转基因果蝇的基因组中克隆出FLP.并同时对HSP-Wnt5A-EGFP载体进行改造,Wnt5A由FLP代替,并在FLP和EGFP编码区之间插入带有多克隆位点的IRES序列,获得pTol2-HSP-FLP-IRES-EGFP转基因表达载体.利用得到的转基因载体显微注射到斑马鱼单细胞期胚胎中进行表达分析,结果表明,经热激外源目的基因FLP和报告基因EGFP均能在斑马鱼中表达.pTol2-HSP-FLP-IRES-EGFP转基因表达载体的成功构建对于建立FLP/FRT重组系统的斑马鱼转基因实验模型具有重要意义.
- 屈永贵陈婷芳王静王飞英吴秀山邓云
- 关键词：斑马鱼转基因
- 利用斑马鱼模型研究心脏和骨骼肌特异表达基因fhlA的功能
- HL家族含有四个半LIM结构域而得名,通过LIM结构域与其他蛋白质相互作用,在细胞增殖、肿瘤与骨骼肌疾病的发生、以及基因的转录调节中发挥重要的作用,但其是否调控心脏的发育尚不得而知。FHLA是我们从斑马鱼心脏组织cDNA...
- 谢华平唐雄卓陈发屈永贵叶湘漓陈婷芳吴秀山邓云
- 关键词：骨骼肌特异表达基因结构域
- 文献传递
- 利用斑马鱼模型研究心脏和骨骼肌特异表达基因fh1A的功能
- HL家族含有四个半LIM结构域而得名,通过LIM结构域与其他蛋白质相互作用,在细胞增殖、肿瘤与骨骼肌疾病的发生、以及基因的转录调节中发挥重要的作用,但其是否调控心脏的发育尚不得而知.FHLA是我们从斑马鱼心脏组织cDNA...
- 谢华平唐雄卓陈发屈永贵叶湘漓陈婷芳吴秀山邓云
- 利用Tol2转座子构建斑马鱼心脏组织特异表达转基因载体及其表达分析被引量：10
- 2010年
- 为了制备用于在斑马鱼心脏中特异表达目的基因的转基因载体,通过分子克隆的方法对能够在斑马鱼心脏中特异表达EGFP报告基因的Tol2载体进行了改造,在原有的CMLC2启动子与EGFP编码区之间插入带有多克隆位点的IRES序列,获得pTol2-CMLC2-IRES-EGFP转基因表达载体,该载体可以实现在同一个启动子CMLC2的驱动下分别同时表达目的基因和EGFP;为了验证该表达载体的有效性,进一步在CMLC2启动子与IRES序列之间插入DsRed-Monome编码区,利用得到的pTol2-CMLC2-RED-IRES-EGFP转基因载体显微注射到斑马鱼单细胞期胚胎中进行表达分析,结果表明外源目的基因DsRed-Monome和报告基因EGFP均能以相同的表达模式在斑马鱼心脏组织中特异表达。pTol2-CMLC2-IRES-EGFP转基因表达载体的成功构建对于建立心脏发育候选基因的斑马鱼转基因实验模型具有重要意义。
- 陈婷芳罗娜谢华平吴秀山邓云
- 关键词：斑马鱼转基因
- 心脏和肌肉组织特异表达基因HDGC通过HDGC-TP2-GATA4信号途径调控心脏的发育
- 我们利用斑马鱼模型深入研究了心脏发育候选基因HDGC的功能。自制了人和斑马鱼HDGC抗体,通过Western blotting、免疫组化及整胚原位杂交结果表明,HDGC在斑马鱼胚胎发育的各时期均有表达,其中在心脏的心室和...
- 罗娜王琨吴坚李发祥黄婷陈婷芳邓云吴秀山袁婺洲
- 文献传递
- 心脏特异表达绿色荧光斑马鱼模型的建立与评估被引量：3
- 2013年
- 本课题组前期研究中,利用斑马鱼cmlc2(Cardiac myosin light chain 2)基因启动子构建了一个用于斑马鱼心脏组织特异表达外源基因的转基因表达载体pTol2-cmlc2-IRES-EGFP。文章利用该载体构建了一个稳定表达EGFP的转基因斑马鱼品系,并初步分析了EGFP的表达对该转基因斑马鱼品系的心脏发育和功能的影响。结果表明,在建立的转基因斑马鱼品系早期胚胎发育过程中,绿色荧光信号在心脏中特异表达,该表达模式与原位杂交分析的cmlc2的表达模式结果相同;该转基因斑马鱼品系的心脏形态及发育生长正常;进一步通过M-Mode分析心脏生理学功能的结果表明:该转基因品系心动周期、心率、收缩与舒张表面积及表面积缩短率等重要生理指标与正常野生型的斑马鱼对照组相比没有显著差别。以上结果表明该转基因品系中绿色荧光蛋白的表达对斑马鱼心脏的发育和功能没有影响。研究结果为进一步利用该载体建立外源目的基因转基因表达模型,研究心脏表达基因的功能奠定了重要基础。
- 彭夕洋陈婷芳黄婷江志钢吴秀山邓云
- 关键词：斑马鱼转基因EGFP
