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肺炎球菌溶血素纯化及其免疫学效果研究: 目的：从6B、9V、14、19F型肺炎球菌培养物中纯化得到肺炎球菌溶血素(PLY)，并通过动物实验观察比较其免疫原性和交叉保护作用。方法：采用超声破碎、硫酸铵沉淀以及三步柱层析法纯化PLY，并通过测定PLY免...; 郭京蓉王建华; 关键词：肺炎球菌溶血素纯化免疫效果; 文献传递

肺炎球菌溶血素的纯化及其免疫效果: 2008年; 目的从6B、9V、14、19F型肺炎球菌培养物中纯化肺炎球菌溶血素(PLY),并检测其免疫原性和保护作用。方法采用自溶、硫酸铵沉淀及三步柱层析法纯化PLY,并检测PLY免疫NIH小鼠后血清抗体滴度及其保护效果。结果纯化的6B、9V、14、19F型PLY纯度依次为83.4%、99.2%、70.1%和76.6%;9V型PLY表观相对分子质量为52840,与文献报道的53000相一致。从4种血清型肺炎球菌中纯化的PLY均能诱导小鼠产生高且稳定持久的抗体滴度。各免疫组小鼠分别感染6B、9V、14、19F型肺炎球菌,存活率均显著高于对照组。结论4种血清型PLY均具有良好的免疫原性和保护作用。; 郭京蓉王建华; 关键词：肺炎球菌溶血素纯化免疫原性

b型流感嗜血杆菌发酵培养基的优化被引量：3: 2011年; 目的分析b型流感嗜血杆菌(Type b Haemophilus influenzae,Hib)不同培养基发酵液中蛋白质、核酸含量及不同培养基添加物对发酵产物的影响,优化Hib发酵培养基。方法设计不同配方的Hib摇瓶培养基,经摇瓶培养,检测发酵液上清中的蛋白质及核酸含量,选择合适的基础培养基,并在此基础上进行发酵罐培养,检测不同添加物(磷酸盐、钠盐、金属离子等)对Hib多糖复合物收获量、菌体形态及发酵液颜色的影响,并发酵3批,进一步检测多糖复合物中蛋白质和核酸的含量。结果培养基介质不同,其发酵上清液中的蛋白质和核酸含量也不同,2号培养基(主要成分为酸水解酪素粉和酵母浸粉)发酵液蛋白质和核酸含量较低且稳定;培养基中不同添加物对Hib菌体形态、发酵液颜色及多糖复合物的收获量、质量和性状均产生不同的影响,其中b培养基发酵液菌体形态、多糖复合物收获量及质量均较好;3批发酵培养液中分别约有7%～10%的蛋白质和34%～42%的核酸被沉淀至多糖复合物中。结论选择2号培养基为Hib基础培养基,b培养基为发酵培养基,本实验为Hib疫苗培养基的优化和多糖抗原的纯化提供了实验依据。; 袁玉兰郭京蓉高华周继唯王立新林云; 关键词：培养基蛋白质核酸

6株金黄色葡萄球菌菌株的鉴定被引量：5: 2014年; 目的对6株金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus,简称金葡菌）菌株进行鉴定,为研制相关疫苗提供参考。方法将稀释的6株疫苗研制用备选金葡菌菌株49521、12602、49525、12605、55804、10832及质控菌株25923、12228菌悬液划线接种TSA平板及Columbia血平板,观察菌落形态,并涂片染色镜检;利用API Staph生化试剂盒、staphylase test血浆凝固酶检测试剂盒及30μg头孢西丁药敏纸片对菌株进行鉴定;利用PCR法鉴定菌株16S r RNA基因、荚膜基因型及mec A基因;用系列稀释的菌悬液经腹腔注射BALB/c小鼠,初步测定菌株毒力。结果6株金葡菌经平板培养,可见圆形、凸起、不透明、有光泽的菌落,Columbia血平板培养的菌落周围可见透明溶血环,镜检结果为革兰阳性球菌,呈单、双或葡萄串状排列。6株菌株的生化反应结果相同,且与质控菌株25923反应结果一致;6株菌株的凝固酶试验结果均为阳性,均对头孢西丁敏感,均未扩增出mec A基因片段,为甲氧西林敏感菌株（methicillin sensitive Staphylococcus aureus,MSSA）。6株菌株均扩增出1 544 bp的16S r RNA基因片段,与Gen Bank中的参考序列NR_075000.1的同源性均为99%;菌株49521、12605、55804、10832均扩增出340 bp的cap5基因片段,与Gen Bank中序列U81973.1的同源性为99%-100%;菌株12602、49525均扩增出171 bp的cap8基因片段,与Gen Bank中序列U73374.1的同源性均为100%。6株菌株的半数致死量（LD50）均在2.5×10^8-2.5×10^9 CFU之间。结论对6株疫苗研制用备选金葡菌进行了鉴定,为疫苗研制中菌株鉴定及不同荚膜型菌株的选择提供了参考。; 郭京蓉袁玉兰周继唯林海涛焦小玲; 关键词：金黄色葡萄球菌毒力

几株b型流感嗜血杆菌多糖结合物的免疫原性检定: 2012年; 目的从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，研究不同菌株荚膜多糖结合物的免疫原性。方法提取基因组，通过型特异和荚膜型基因特异引物，利用PCR检定b型流感嗜血杆菌；不同纯化多糖分别与破伤风类毒素（TT）进行耦联结合，结合物原液经稀释免疫小鼠，通过两针免疫，采血进行免疫效力测定。结果5株b型流感嗜血杆菌通过PCR法均能获得预期大小的型特异（482bp）和荚膜型（343bp）基因片段，BLAST分析显示，各菌之间型特异和荚膜型序列比对，其同源性均为100％，各菌型特异和荚膜型序列分别与GenBank X78559．1和M19995．1序列比对，同源性分别为99％和100％；ELISA检测显示，4株不同菌株来源的荚膜多糖结合物（PRP-TT）的小鼠免疫效力差异无统计学意义。结论通过PCR法从分子水平检定b型流感嗜血杆菌，纯化的不同荚膜多糖结合物小鼠免疫原性基本一致。可供不同Hib多糖结合物免疫原性的研究参考数据。; 袁玉兰郭京蓉周继唯高华; 关键词：流感嗜血杆菌荚膜多糖免疫原性

A、C群脑膜炎球菌结合疫苗免疫原性研究被引量：2: 2008年; 目的研究A、C群脑膜炎球菌结合疫苗的免疫原性，包括剂量、免疫记忆及抗原相容性。方法将不同剂量的A、C群脑膜炎球菌结合疫苗分别免疫小鼠，末次免疫后14d采集血清测定血清抗体滴度，确定最佳免疫剂量后，再分别以单价A群和C群脑膜炎球菌结合疫苗及二价A、C群脑膜炎球菌结合疫苗同时对小鼠分别进行1、2、3针免疫，考察其针次效应和抗原相容性。结果A、C群脑膜炎球菌结合疫苗中的A抗原和C抗原均以1．25μg剂量免疫小鼠时，其免疫原性较好。A、C群脑膜炎球菌结合疫苗能够诱导小鼠产生免疫回忆应答，且在二价结合疫苗中的A群耦联物和C群耦联物配伍后无干扰作用，抗原相容性良好。结论A、C群脑膜炎球菌结合疫苗具有较好的免疫原性和明显的免疫回忆应答，抗原相容性良好。; 王建华刘梅影李冶姗郭京蓉张燕斌陈芸高华林云刘钰; 关键词：免疫剂量免疫记忆

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