谢艳平
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 两种提取孕妇血浆游离胎儿DNA方法的比较被引量：1
- 2018年
- 目的分别应用两种方法进行血浆游离胎儿DNA的提取,判定及筛选最佳的血浆游离胎儿DNA的提取方法,为后续试验提取游离胎儿DNA的方法提供参考依据。方法收集30例健康妊娠孕妇血浆,用离心柱法和磁珠法进行血浆游离DNA的提取,经甲基化敏感限制性内切酶Bst UI酶切后使用微量紫外分光光度计测量所提取的游离胎儿DNA的含量及纯度,再使用实时荧光定量PCR扩增方法测定扩增效率,进行统计学分析。结果离心柱法所提取的游离胎儿DNA的测定结果为:含量(43. 27±21. 01) ng/μl;纯度A260/A280 (0. 999 7±0. 084 42);扩增效率为94%;而磁珠法提取的游离胎儿DNA的测定结果为:含量(31. 74±12. 25) ng/μl:纯度A260/A280 (0. 878 3±0. 052 66);扩增效率为87%。两组方法提取游离DNA的浓度、纯度比较,差异有统计学意义(均P<0. 05)。结论离心柱法比磁珠法操作更简便、快捷。经测定提取的DNA的浓度及纯度,扩增效率后可判断离心柱法所提取的游离胎儿DNA的浓度、纯度及扩增效率都远远优于磁珠法;离心柱法比磁珠法更适用于后续无创产前诊断研究试验。
- 冉贵萍赵海鸥谢艳平陈英钟贞强
- 关键词：游离胎儿DNA磁珠法产前诊断RASSF1A基因
- 孕妇血浆循环DNA的检测与动态分析被引量：2
- 2014年
- 目的本文旨在探索使用荧光定量PCR方法对孕妇全血和血浆中DNA含量进行动态分析,从而为利用孕母血浆循环DNA进行无创产前诊断奠定基础。方法提取60例早、中、晚孕期孕妇全血基因组DNA和血浆循环DNA,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)技术测定不同孕期的孕妇全血和血浆中保守基因(β-actin)的含量,比较不同孕期孕妇全血和血浆DNA含量的变化。结果 (1)早、中、晚孕期孕妇全血DNA含量Ct平均值为18.44±0.56828、18.35±0.93394、18.15±0.57410,3组比较没有显著性差异(P>0.05);(2)孕妇早、中、晚期孕组血浆DNA含量Ct平均值25.59±1.17673、25.50±1.59892、24.35±2.24301,早、中期孕组血浆DNA没有显著性差异(P>0.05),早、晚期和中、晚期孕组血浆DNA在两者之间有显著性差异(P<0.05);(3)排除全血DNA干扰,早、中、晚孕期孕妇血浆中DNA相对定量值为0.007401、0.007401、0.013602。结论用实时荧光定量PCR的方法可以检测到孕妇血浆中循环DNA的含量变化,随孕周的增加而逐渐增加,可以利用其进行无创产前诊断。
- 冉贵萍吴卫华谢艳平张圣芳方文
- 关键词：孕妇血浆循环DNA
