许晓风 作品数:92 被引量:409 H指数:11 供职机构: 南京师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 国家教育部博士点基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
稻褐飞虱羧酸酯酶基因的克隆与表达 被引量:2 2006年 以稻褐飞虱的cDNA为模板,进行PCR扩增,获得约1 900 bp的DNA片段。通过T-A克隆,将PCR产物插入pMD18-T载体中。再以此重组载体为模板,以羧酸酯酶成熟蛋白基因(cae-M)的特异性引物进行PCR扩增。将cae-M扩增产物和pET28 a分别用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,酶切产物纯化后在T4连接酶作用连接成重组表达载体pET28 a-cae-M。将pET28 a-cae-M转化BL21(DE3),经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约62 kD外源蛋白带。蛋白质印迹分析表明,该外源蛋白与6×H is融合表达。 吴岩 王文兵 许晓风关键词:稻褐飞虱 羧酸酯酶 克隆 原核表达 人精子蛋白SP22的cDNA克隆、表达及纯化分析 被引量:7 2004年 精子蛋白SP2 2与生殖功能密切相关。睾丸附睾毒物氯醇硝唑作用于大鼠生殖系统时 ,精子表面SP2 2大量脱落至附睾液中 ,导致生育力降低。深入研究发现SP2 2与生育力存在量的关系。从人睾丸组织中提取总RNA ,通过RT PCR克隆出人睾丸组织中的SP2 2基因 ,连入pGEM Teasyvector进行cDNA克隆测序。再亚克隆到pET 2 8a c( + )vectors成功构建pET 2 8a c( + )vectors SP2 2表达载体 ,并转化BL2 1 (DE3) ,以IPTG诱导表达 ,对诱导剂浓度、诱导时间进行优化后以镍离子亲和层析纯化目的蛋白。蛋白表达量占菌体总蛋白 30 %。所得蛋白可推动SP2 2的蛋白结构活性、睾丸组织中的定位分布及在男性不育、癌症等疾病检测中的应用研究。 宛传丹 黄宇烽 许晓风关键词:蛋白S 人睾丸 附睾 人精子 CDNA克隆 IPTG 褐飞虱发生系统的混沌诊断 被引量:6 2003年 褐飞虱在我国常年发生面积约为 1 .3× 1 0 7~ 2× 1 0 7hm2 ,年均损失稻谷 1 0× 1 0 8kg.为更深入地研究褐飞虱发生系统的特性与规律 ,并为预测和防治提供理论依据 ,以我国长江流域太湖地区 1 986~1 998年 6~ 1 1月褐飞虱田间发生时间序列资料为例 ,运用混沌理论中的自相关函数、功率谱图、相轨迹图、Poincare截面、返回映象图等方法 ,研究了褐飞虱发生系统的特性 .结果表明 ,即使有随机性噪声的影响 。 许晓风 马飞 邹运鼎 程遐年关键词:褐飞虱 自相关函数 POINCARE截面 基于密码子与互补密码子使用的进化树的重构(英文) 被引量:1 2005年 为了更深入地了解密码子与互补密码子使用相关的内涵,70个单细胞和多细胞生物被更进一步的分析。结果得到70种细胞生物具有较高的相关系数平均值(0.5101,标准差是0.1389),表明密码子与其互补密码子使用间确实存在正的使用相关联系,进一步地支持了以前的结果。此外,通过对70个单细胞和多细胞生物在基于密码子与互补密码子使用频率差异,以及配对频率的高低信息的分析基础上,绘制进化树,得到的进化树与传统的进化树非常接近。 黄惠芳 庄永龙 陈礼明 林鲁萍 马飞 许晓风关键词:密码子 中国东海日本鳗鲡种群遗传结构的AFLP分析 被引量:11 2010年 采用AFLP分子标记技术,以中国东海日本鳗鲡2个群体(闽江流域玻璃鳗养成的成鳗和长江口捕获的玻璃鳗)为材料,研究其遗传多样性水平及群体的遗传结构。结果表明,6对选择性扩增引物共检测到363个位点,其中闽江流域群体和长江口群体的多态位点数、多态位点频率、Nei′s基因多样性系数、Shannon′s信息指数分别为228和269、62.81%和74.10%、0.2781和0.3077、0.4092和0.4493,日本鳗鲡这2个群体均具有较丰富的遗传变异,但闽江流域群体明显低于长江口群体。2群体的遗传相似度为0.8140,遗传距离为0.2103,在用Nei′s遗传距离构建的遗传聚类图上,2群体明显分为2支,显示了群体分化现象,不同地理群到达产卵地的时间不同可能是造成这种现象的主要原因。 张辛 许璞 许广平 刘培庭 仲霞铭 李旭光 徐健荣 丁亚平 许晓风关键词:日本鳗鲡 AFLP 种群 CFTR基因5T位点多态性与先天性双侧输精管缺如发病风险相关性研究及meta分析 被引量:2 2019年 目的:探讨囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)基因5T位点多态性与先天性双侧输精管缺如(CBAVD)发病风险的相关性。方法:采用病例-对照研究方法,选取40例国内孤立发生的CBAVD患者作为病例组和104例健康男性作为对照组,用Sanger测序方法对CFTR基因9号内含子(TG)m-n(T)单倍型进行测序分型;结合本实验和Pubmed、Web of science、Medline和中国知网等数据库文献中相关数据,进行meta分析,来探讨5T突变与CBAVD发病风险的相关性。结果:Sanger测序结果表明,病例组中检测到6种基因型,分别为TG11-5T、TG12-5T、TG13-5T、TG11-7T、TG12-7T、TG11-9T;对照组中检测到7种基因型,分别为TG11-5T、TG12-5T、TG10-7T、TG11-7T、TG12-7T、TG13-7T、TG11-9T。与对照组10/208(4.81%)相比,在病例组13/80(16.25%)中观察到TG12-5T单倍型约增加了3.38倍;与对照组(0)相比,在病例组中观察到TG13-5T单倍型为6/80(7.5%);TG11-5T单倍型在对照组2/80(2.50%)和病例组4/208(1.92%)中差异很小。TG12_13-5T单倍型在病例组与对照组中差异极显著(OR=7.40,95%CI=4.83~11.34,P<0.01)。经meta分析,TG12_13-5T单倍型与男性患CBAVD疾病的相关性较高。结论:TG12_13-5T单倍型增加CBAVD患病风险,为男性生殖提供了理论基础。 赵果果 孙红波 郅慧杰 王凡 吴秋月 夏欣一 许晓风关键词:先天性双侧输精管缺如 META分析 水稻对褐飞虱的数量抗性及褐飞虱对水稻的致害特性研究 为了考察水稻品种对褐飞虱的数量抗性表现,建立数量抗性基因的分子图谱、探讨褐飞虱生物型问题的本质,该课题的前人工作的基础上,采用温室生物测定与实验室生理、生化分析等研究手段,系统测定了160个Lemont/Teqing重组... 许晓风关键词:数量抗性 QTL 分子作图 褐飞虱 生物型 文献传递 耐热碱性磷酸酶功能结构域的进一步定位 被引量:2 2004年 为了进一步精确定位耐热碱性磷酸酶 (TAP)的功能结构域和建立酶功能结构域定位的有效方法 ,在对TAP进行序列相容性比对及二级结构统计预测的基础上 ,以二级结构单元的完整性为依据对其功能结构域进行定位 .TAP的功能结构域在 35~ 4 76氨基酸之间 ,记为TAPN3 4C2 5(TAP的N端去掉 34个氨基酸而C端去掉 2 5个氨基酸 ) ,比盛小禹等定位的少 15个氨基酸 .克隆、表达实验结果证明了TAPN3 4C2 5的酶学活性 ,其最适反应温度为 72℃ ,比TAPND2 7(N端去除了 2 7个信号肽氨基酸的TAP)上升了 7℃ ,而最高耐受温度为 83℃ ,比TAPND2 7下降了 16℃ .实验结果表明 ,以二级结构预测结果进行酶功能结构域定位是一种更为精确的方法 . 郁锋 许晓风关键词:耐热碱性磷酸酶 功能结构域 遗传密码子和氨基酸若干物理化学特性的相关性研究 被引量:10 2003年 为了揭示密码子性质与氨基酸性质之间可能存在的内在联系,系统地考察了密码子的分子量、亲水性、碱基堆积力和π电子共振能以及氨基酸的分子量、等电点、相对距离、不可取代性和同义密码子数等特性,并对这些性质间可能存在的相关性进行了分析。结果显示,在密码子、氨基酸以及密码子与氨基酸的多项性质间均存在着显著的正相关或负相关。此外,根据密码子的4种特性对20种蛋白质氨基酸进行了分类,这可能在某种程度上真实地反映了密码子与氨基酸的对应联系。文中还对这些内在相关性的可能意义进行了讨论。 马飞 武耀廷 许晓风关键词:密码子 氨基酸 物理化学特性 常染色体显性先天性后极性白内障一家系晶状体蛋白基因突变分析 被引量:4 2015年 目的检测一个常染色体显性先天性后极性白内障家系的晶状体蛋白(CRYAB)基因突变,并分析其与白内障的关系。方法收集该家系患者及健康者外周血标本并抽提基因组DNA。通过PCR扩增及DNA测序对常染色体显性先天性后极性白内障患者的23个候选基因进行筛选,并以体检健康者作为健康对照。用Prot Scale和Prot Param在线软件比较分析野生型和突变型αB-晶状体蛋白结构与功能,结合患者临床数据和裂隙灯照片进行综合分析。结果家系中所有患者8~10岁开始出现视力下降,均在晶状体后极存在单一且界限清晰的混浊,直径0.5~3 mm。DNA测序证实患者携带全新的CRYAB杂合错义突变(c.59C〉G),导致氨基酸P20R的改变。该家系中健康人和200例体检健康者未发现此突变,排除单核苷酸多态性(SNPs)的可能。生物信息学软件分析结果表明P20R突变改变了αB-晶状体蛋白的生化性质。结论从一个家系常染色体显性先天性后极性白内障中发现了CRYAB杂合错义突变(c.59C〉G,p.P20R),此突变与先天性白内障相关。 张翠 张静 蒋卫军 李天赋 周青 安丽梅 李卫巍 吴秋月 崔英霞 薛春燕 张双全 夏欣一 许豪勤 许晓风