苏晓峰
- 作品数：54 被引量：34H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 大丽轮枝菌磷脂酶靶基因片段及其干扰载体和应用
- 本发明公开了大丽轮枝菌磷脂酶靶基因片段及其干扰载体和应用，属于大丽轮枝菌病程关键基因的克隆及应用领域。本发明通过病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)将大丽轮枝菌磷脂酶靶基因的基因序列导入本生烟中瞬时表达dsRNA，筛选到能...
- 程红梅齐希梁苏晓峰郭惠明
- 文献传递
- 陆地棉GhCRP21基因及其编码蛋白和应用
- 本发明公开了陆地棉<I>GhCRP21</I>基因及其编码蛋白和应用。本发明公开了从陆地棉中分离的<I>GhCRP21</I>基因，其多核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No....
- 苏晓峰程红梅翁慧婷张银宝刘军李君张超郭惠明李月
- 大丽轮枝菌ΔVdKu70缺陷突变体菌株及其应用
- 本发明公开了大丽轮枝菌ΔVdKu70缺陷突变体菌株及其应用。本发明构建携带Ku70基因同源重组DNA片段的基因敲除载体，通过农杆菌介导的大丽轮枝菌的遗传转化，从大量的转化子中筛选获得一株缺失Ku70基因的ΔVdKu70缺...
- 程红梅齐希梁苏晓峰郭惠明
- 文献传递
- 精氨酸激酶蛋白及分子生物学的研究进展被引量：8
- 2011年
- 在无脊椎动物体内,精氨酸激酶(arginine kinase)在能量代谢过程中发挥着重要的作用。随着研究的深入,越来越多的数据表明,精氨酸激酶的作用不仅限于提供和维持能量的平衡,而且对生命活动的调控起到重要作用。综述无脊椎动物体内精氨酸激酶的进化历程、蛋白特性、特异表达及生物学功能等方面的研究进展,为深入研究无脊椎动物的抗性调控机制提供必要的参考。此外,对无脊椎动物精氨酸激酶的重要性和研究中存在的问题进行讨论。
- 苏晓峰陆国清程红梅
- 关键词：精氨酸激酶抗性进化特异性表达
- 利用寄主诱导的基因沉默技术验证大丽轮枝菌糖代谢相关基因的致病力被引量：5
- 2015年
- 【目的】筛选大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)糖代谢相关基因,证实其与大丽轮枝菌的生长发育和致病性相关,为防治由大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病提供理论基础。【方法】利用寄主诱导的基因沉默(host-induced gene silencing,HIGS)技术对大丽轮枝菌糖代谢相关基因进行筛选。将单个或多个含靶标基因的病毒载体注射本氏烟草瞬时表达基因,7—10 d后八氢番茄红素脱氢酶PDS会出现明显的烟草白化症状,蘸根法接种大丽轮枝菌V.d991,对应的大丽轮枝菌靶标基因会被干扰,接菌14 d后,观察转基因烟草表型,统计烟草病情指数,同时利用荧光定量PCR技术检测转基因烟草中大丽轮枝菌V.d991的生物量和靶标基因VDPDF-1、VDEG-1、VDMAN-1和VDPD-1的表达量。【结果】HIGS方法快速筛选获得大丽轮枝菌4个糖代谢相关基因,分别为VDPDF-1、VDEG-1、VDMAN-1和VDPD-1,相比空载体对照,转化这4个靶标基因的烟草病情指数分别降低了35%、30%、20%和10%,混合注射VDEG-1/VDPDF-1、VDPD-1/VDPDF-1/VDMAN-1、VDPD-1/VDMAN-1、VDPD-1/VDPDF-1和VDEG-1/VDPD-1的转基因烟草病情指数分别降低了45%、45%、40%、40%和35%,除VDPD-1转基因烟草外,其余转基因烟草与注射空载体的阴性对照相比病情指数都有显著降低。接种后大丽轮枝菌在寄主体内的生物量和干扰后靶基因表达量也有不同程度降低,混合基因注射比单基因注射干扰效果降低更明显,其中生物量降低最显著的是混合注射的EG/PDF(VDEG-1/VDPDF-1)和EG/PD(VDEG-1/VDPD-1),生物量的降低可达0.94,干扰大丽轮枝菌的靶标基因后,表达量降低最明显的是混合注射PD/PDF(VDPD-1/VDPDF-1)中VDPDF-1,降低了0.91。【结论】HIGS方法快速筛选到大丽轮枝菌糖代谢相关的4个基因VDPDF-1、VDEG-1、VDMAN-1和VDPD-1,当其被干扰后,转基因烟草的病情指数降低,抗病性增强,而且混合注射多个基因载体比单基因注射效果更为明显,证实这些�
- 赵玉兰苏晓峰程红梅
- 关键词：基因沉默大丽轮枝菌生物量
- 大丽轮枝菌外切葡聚糖酶VdCBH1在毕赤酵母中的表达与酶活分析
- 2022年
- 为了探究大丽轮枝菌外切葡聚糖酶VdCBH1(exoglucanase)的酶活与催化机理,本研究在生物信息学分析的基础上,以大丽轮枝菌V991菌株为材料克隆了VdCBH1基因,进一步构建了pPIC9-VdCBH1重组质粒并转入毕赤酵母中进行表达,测定了重组VdCBH1蛋白的外切葡聚糖酶活性;将预测的VdCBH1催化残基位点进行突变,随后通过SDS-PAGE分析了重组VdCBH1蛋白及其催化残基位点突变蛋白的表达情况,并检测了VdCBH1催化残基位点突变前后的酶活变化。结果表明,VdCBH1基因编码区全长1356 bp,编码451个氨基酸,蛋白理论分子量大小为48.574 kDa,理论等电点为4.29,N端前17个氨基酸为信号肽序列。保守结构域和进化树分析表明,VdCBH1蛋白含有GH7_CBH_EG保守结构域,该结构域是糖基水解酶7家族(Glycosyl hydrolase family 7,GH7)所特有的,与尖端赛多孢子菌(Scedosporium apiospermum)的外切葡聚糖酶蛋白亲缘关系最近。重组VdCBH1蛋白具有典型的外切葡聚糖酶活性,而Glu233催化残基单突变与Glu228、Asp230和Glu233催化残基三突变蛋白的酶活明显下降。这表明催化残基Glu233在外切葡聚糖酶活性中发挥更为重要的作用,Glu228、Asp230则可能在其中起协同作用。本研究为进一步揭示VdCBH1蛋白的催化机制奠定了理论基础。
- 吴思源刘璐王琦潘国强刘海洋马伯军苏晓峰程红梅
- 关键词：大丽轮枝菌基因克隆毕赤酵母酶活
- 大丽轮枝菌VdNRPS2基因抗病原菌靶基因片段及其干扰载体和应用
- 本发明公开了大丽轮枝菌VdNRPS2基因抗病原菌靶基因片段及其干扰载体和应用。本发明提供了大丽轮枝菌VdNRPS2基因抗病原菌靶基因片段，其核苷酸序列分别为SEQ ID No.1、SEQ ID No.3或SEQ ID N...
- 苏晓峰 王琦 刘璐 潘国强 吴思源郭惠明程红梅 吕依然 刘海洋
- 大丽轮枝菌寡糖基转移酶靶基因片段及其干扰载体和应用
- 本发明公开了大丽轮枝菌寡糖基转移酶复合体STT3亚基靶基因片段及其干扰载体和应用，属于大丽轮枝菌病程关键基因的克隆及应用领域。本发明采用寄主诱导的基因沉默技术筛选寡糖基转移酶复合体STT3亚基基因中能明显降低病情指数的靶...
- 苏晓峰齐希梁程红梅郭惠明
- 文献传递
- 陆地棉GhPUB21基因及其在调控植物抗黄萎病中的用途
- 本发明公开了陆地棉GhPUB21基因及其在调控植物抗黄萎病中的用途。本发明公开了从陆地棉中分离的GhPUB21基因，其多核苷酸序列为SEQ ID No.1所示。本发明利用亚细胞定位和病毒诱导的基因沉默技术、转基因超表达拟...
- 苏晓峰 李索贤程红梅郭惠明郭文芳 王智 翁慧婷 李娜 李磊
- 陆地棉GhCRP21基因及其编码蛋白和应用
- 本发明公开了陆地棉GhCRP21基因及其编码蛋白和应用。本发明公开了从陆地棉中分离的GhCRP21基因，其多核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No.2所示。本发明综合采用基因表...
- 苏晓峰程红梅翁慧婷张银宝刘军李君张超郭惠明李月
