翟理杰 作品数:5 被引量:15 H指数:3 供职机构: 东南大学医学院病原生物学与免疫学系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
载体和基因片段的选择对戊型肝炎病毒基因免疫抗原表达的影响 被引量:6 2006年 目的比较不同载体和不同大小的目的基因片段对戊型肝炎病毒(HEV)基因免疫抗原表达的影响,为基于HEV中和抗原表位的HEV基因免疫提供一定的依据。方法将含Ⅳ型HEV中国株中和抗原表位的p166和p179片段编码基因分别克隆入pTR421和pCDNA3.1两种真核表达载体,用脂质体介导基因转染HepG2人肝癌细胞系,经间接免疫荧光和Western blot分析以及将质粒注射小鼠局部肌肉组织后经免疫组织化学染色检测,分析目的基因在体内外的表达水平。结果成功构建了pTR421-166、pTR421-179、pCDNA3.1-166和pCDNA3.1-179四种重组质粒,经限制性内切酶双酶切和核苷酸测序鉴定,编码基因正确无误;pTR421-179转染的细胞以及注射小鼠的局部肌肉组织可以检测到p179的表达,而pCDNA3.1-179、pCDNA3.1-166以及pTR421-166均检测不到目的基因在体内、外的抗原表达。结论载体和目的基因片段的选择显著影响HEV抗原在体内、外的表达,直接关系到基因免疫的成功与否。 房雪峰 王立新 孟继鸿 董晨 田华 翟理杰关键词:戊型肝炎病毒 基因免疫 基因表达 丙型肝炎病毒不同基因型NS3蛋白的抗原异质性分析 被引量:5 2005年 目的 探讨不同基因型丙型肝炎病毒 (HCV)NS3蛋白的抗原特性及其用于抗 HCV检测的意义。方法 分别构建和表达含有HCV 1型和 6型NS3基因片段的重组质粒和重组蛋白 ,以ELISA法和Westernblot分析不同基因型重组蛋白与已知抗 HCV阳性血清的抗原反应性。结果 HCV1型和 6型NS3重组蛋白氨基酸序列的同源性为 83.2 % ;85份抗 HCV阳性血清以此不同基因型HCVNS3单片段抗原检测 ,阳性检出率分别为 6 1.2 % (1型 )和 5 8.8% (6型 ) ,其中有 7份标本以NS3 1型抗原检测阴性 ,但可被NS3 6型抗原检出 ,反之 ,有 9份血清以NS3 6型重组蛋白检测为阴性 ,而NS3 1型检测阳性 ;5 4份大学生体检血清和 39份阴性质控血清以此两种抗原检测均为阴性。结论 HCV 1型和 6型NS3重组蛋白存在抗原异质性 ,在发展HCV抗体检测试剂时需考虑加入不同基因型的NS3抗原。 乔伟振 孟继鸿 戴星 李丽 翟理杰 耿全林 周镇先关键词:NS3蛋白 抗原 重组蛋白 丙型肝炎病毒 HCV 基因型 猪戊型肝炎病毒的研究进展 被引量:3 2002年 近年来国外对戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)的研究表明,该病毒不仅可以侵犯人,而且有多种动物可以作为其自然宿主,提示由该病毒引起的戊型肝炎(hepatitis E,HE)是一种人畜共患性疾病。从猪中分离并确定的猪HEV,对于HEV的病原学、流行病学、动物模型、临床诊断及HEV的疫苗制备等都具有重要意义。 翟理杰 孟继鸿关键词:戊型肝炎 HEV 人畜共患病 病原学 分子生物学 基于戊型肝炎病毒中和表位的基因免疫表达载体的构建与鉴定 2004年 目的 :获得戊型肝炎病毒 (HEV )中和表位 p166的编码基因 ,构建基于该中和表位的HEV基因免疫的真核表达载体。方法 :应用RT PCR方法从粪便标本中扩增获得HEVORF2中G64 61~G70 3 5片段 ,通过比较核酸序列同源性鉴定其基因型 ,PCR方法扩增该片段中HEV中和表位 p166的编码基因 ,经酶切后克隆于真核表达载体 pTR42 1质粒 ,并以PCR、酶切和DNA测序加以鉴定。结果 :成功克隆了 p166的编码基因 ,其基因型别为Ⅳ型 ;经酶切鉴定和DNA测序证实p166的编码基因已成功插入pTR42 1质粒 ,且核酸序列、读码框架正确。结论 :成功构建含Ⅳ型HEV中和表位编码基因的重组质粒 ,为后续基于HEV中和表位基因免疫的研究奠定基础。 翟理杰 王立新 房雪峰 梁久红 林陵 赵宇 孟继鸿关键词:戊型肝炎病毒 中和表位 基因免疫 真核表达载体 戊型肝炎病毒基因分型的标准化 戊型肝炎(hepatitis E,HE)是继甲型肝炎外另一种经肠道传播的严重危害人类健康的病毒性肝炎.戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是其病原体,为单股正链RNA病毒.明确HEV的基因型对于戊型... 翟理杰关键词:戊型肝炎病毒 基因分型 同源性 系统进化 文献传递