王倩 作品数:53 被引量:146 H指数:8 供职机构: 中国农业科学院烟草研究所 更多>> 发文基金: 中国烟草总公司科技项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 自动化与计算机技术 更多>>
烟草TILLING技术体系的建立及NtPhyB基因的筛选 被引量:1 2014年 定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions In Genomes,TILLING)是一种新近发展起来的高通量检测点突变的反向遗传学方法。本研究首次将TILLING技术用于EMS处理的烟草突变体筛选中,通过对正反向荧光引物使用量的摸索,确定了10μL PCR体系中IRDye-700标记的正向引物(1μM)适用量为0.32~0.64μL,IRDye-800标记的反向引物(1μM)适用量1.12~1.6μL;对异源双链CELⅠ酶切体系实验表明,10μL PCR产物中加入0.6μL CEL I酶,1.5μL 10× Buffer酶切效果最好。从而建立并优化了适用于普通烟草基因组研究的TILLING技术体系。在此基础上,以NtPhyB为目标基因,在1000份0.6% EMS诱变的M2突变体中进行筛选,共得到13个突变体,该基因突变频率约为1/94 kb。本试验建立的TILLING筛选体系能够快速、高效地筛选任意已知序列基因的突变体,对烟草功能基因组研究具有重要意义。 宗鹏 李凤霞 王倩 刘贯山 龚达平 陈雅琼 孙玉合关键词:功能基因组学 烟草 化学诱变 突变体 一种防治植物穿孔病斑的药膏及其制备、使用方法 本发明公开了一种防治植物穿孔病斑的药膏,其中,按照质量百分比配置如下组分:膨润土20~30%;腐植酸钾20~30%;黄腐酸10~15%;烟碱5~10%;a-萘乙酸0.05~0.08%;聚乙烯醇2~3%;水10~15%。本... 刘好宝 王倩 宋毓峰 雷强 伍仁军 覃克炳 殷英 屈健康 张良 白岩 靳义荣 董连红 李永红 高鲁江 李丽丽文献传递 一种锦紫苏类病毒离体常温保存方法 本发明公开了一种锦紫苏类病毒离体常温保存方法,主要包括以下步骤:样品采集:采摘带有锦紫苏类病毒毒源的鲜活锦紫苏植株叶片或茎干样品;变色硅胶干燥:将离体后12小时内的样品,与等重的变色硅胶密封于塑料保存袋中;室温放置2-3... 侯婉莹 李世访 姜冬梅 张志想 崔萌萌 王倩文献传递 基于基因组的绒毛状烟草和林烟草microRNA及其靶基因分析 被引量:1 2014年 【目的】填补绒毛状烟草(Nicotiana tomentosiformis)和林烟草(Nicotiana sylvestris)在miRNA相关领域的研究空白,揭示普通烟草(Nicotiana tabacum)的生长发育调控机理。【方法】在绒毛状烟草和林烟草全基因组中预测并分析miRNA及其靶基因,通过同源比对及miRNA前体二级结构特征进行预测:参考序列在绒毛状烟草和林烟草基因组的比对中,允许最多1—2个错配;miRNA二级结构为经典茎环结构,其中MEF最大值为-25,MEFI最小值为0.85,预测的miRNA与已知的同一家族的miRNA位于发夹结构的同一条臂上;去除E值小于等于1e-6的编码蛋白的序列。【结果】在绒毛状烟草中得到39个家族的162条miRNA,包括14对正/反义miRNA和5个基因簇。在林烟草中得到40个家族的169条miRNA,包括13对正/反义miRNA和3个基因簇。2个野生烟草在保守度高的miRNA家族中,其成员分布相似,且成员数相近。在保守度相对较低的家族中,2个野生烟草其成员分布差异较为明显,其中,miR5021、miR5203等9个家族仅在绒毛状烟草中有成员,miR1446、miR1509等10个家族仅在林烟草中有成员。2种野生烟草的正义miRNA与反义miRNA都有着1—4个碱基差异,这些差异位点在不同的家族中呈现出偏好性,而且在2种野生烟草中偏好性相似:miR164家族的9、12、13个碱基处,miR172家族的1、21个碱基处,miR396家族的2、17个碱基处,miR399家族的15、20个碱基处。2种野生烟草的基因簇主要是由miR156、miR169家族组成,其前体的间距小于350 nt,同时在绒毛状烟草中首次发现miR6019/miR6020基因簇。以普通烟草的unigene数据库作为靶基因集进行预测与分析,在绒毛状烟草122条miRNA中得到749个靶基因,去掉重复基因得到非冗余靶基因206条,其中89条(43%)得到GO功能注释;在林烟草中117条miRNA得到650个靶基因,去掉重复基因得到非冗余靶基因169条,其中78条(46%)得到GO功能注释。在分子功能方面,大多数靶� 李凌 张磊 晁江涛 龚达平 李凤霞 王倩 丁安明 陈雅琼 孙亭亭 孙玉合关键词:MIRNA 生物信息学 基因组 烟草重要基因篇:7.烟草多药和有毒化合物排出基因 被引量:1 2015年 多药和有毒化合物排出(multidrug and toxic compound extrusion,MATE)基因编码的蛋白是一类依靠Na^+/H^+跨膜电化学势转运底物的次级转运蛋白,对金属离子、次级代谢产物、抗生素及多种药物有转运作用.MATE是一个多基因家族,该家族成员最先在细菌中报道,此后真菌、动物和植物中也陆续有MATE基因得到鉴定.植物MATE家族成员主要参与金属离子、毒素物质和次级代谢产物的运输,进而在抗逆和毒素解毒中发挥作用;部分成员参与生长素的生物合成,调节植物的生长发育进程. 张艳艳 王倩 刘贯山关键词:有毒化合物 烟草 次级代谢产物 多基因家族 生长发育进程 一种采用烟田废弃物制备的可降解液态膜及其使用方法 本发明公开了一种采用烟田废弃物制备的可降解液态膜及其使用方法,其中,包括按照重量份数比如下组分:原料:82-97份,成膜剂:17-25份,增塑剂:3-4份,交联剂:1.1-2.15份,引发剂:0.03-0.05份,pH调... 刘好宝 王倩 张良 雷强 伍仁军 殷英 钟朝龙 屈健康 宋毓峰 董连红文献传递 一种用于烟草类作物移栽的具抗病促生作用的生根剂 本发明公开了用于烟草类作物移栽的具抗病促生作用的生根剂,其中,包括按照重量份数配置的如下组分:复合微生物菌剂40~45份,黄腐酸钾20~25份,黄腐酸40~50份,海藻酸钠1~2份。本发明工艺简单,成分配比合理,使用方便... 王倩 刘好宝 张良 雷强 伍仁军 殷英 屈健康 覃克炳 宋毓峰 董连红文献传递 林烟草蛋白激酶NsylCIPK3基因的克隆与功能分析 被引量:4 2015年 CIPK蛋白激酶家族(CBL-interacting protein kinase)是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,与类钙调磷酸酶B亚基CBL(calcineurin B-like protein)蛋白共同形成CBL-CIPK网络,在植物的生长发育和逆境胁迫响应过程中发挥重要作用。烟草中该家族的研究还比较少,本研究从林烟草(Nicotiana sylvestris)中获得一个CIPK家族基因,该基因与拟南芥和杨树中的CIPK3同源性分别为68.4%和87.5%,将其命名为Nsyl CIPK3。氨基酸序列分析表明,Nsyl CIPK3具有CIPK蛋白家族的典型结构特征,在N端和C端分别具有典型的激活环结构域和NAF结构域。进化树分析显示,Nsyl CIPK3属于CIPK蛋白亚家族Ⅱ。表达模式研究表明,该基因在林烟草的叶和腋芽中的表达量相对较高,在主根中的表达量次之,在侧根、茎、花瓣和萼片中的表达量相对较低,并且在烟草成熟期的叶中表达量明显升高。在高盐、紫外光和低钾胁迫下该基因的表达发生不同程度的上调。酵母双杂交结果显示,Nsyl CIPK3可与Nsyl CBL9互作。推测Nsyl CIPK3可能通过与Nsyl CBL9互作形成信号通路,激活下游靶蛋白,参与烟草响应非生物逆境胁迫的信号转导过程。 董连红 史素娟 S M Nuruzzaman Manik 苏玉龙 毛静静 王傚弘 周开燕 刘林 王倩 刘好宝关键词:非生物逆境 信号转导 烟草突变体筛选与鉴定方法篇:5.烟草耐低钾突变体的筛选与鉴定 被引量:4 2012年 烟草是喜钾作物。除了作为重要的营养元素发挥作用外,钾与烟草的抗逆性、抗病虫害能力密切相关;钾含量也是烟叶品质评价的重要指标之一。基于钾素的重要性和我国土壤普遍低钾的国情及国内烟叶钾含量低的现状,开展烟草钾营养基础研究、选育耐低钾/钾吸收高效型烟草品种等工作极为迫切[1]。 王倩关键词:烟草品种 突变体筛选 耐低钾 抗病虫害能力 喜钾作物 耐受高浓度葡萄糖的巨大芽孢杆菌CGMCC No.10669及其应用 本发明提供了一种耐受高浓度葡萄糖的巨大芽孢杆菌(Bicillus megaterium.),其保藏编号为:CGMCC No.10669,保藏日期为2015年3月30日。本发明还提供了利用保藏编号为:CGMCC No.10... 王倩 刘好宝 苏玉龙 史素娟 毛静静 张鸽 李晓旭文献传递