洪燕飞
- 作品数：6 被引量：59H指数：3
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- 相关领域：生物学农业科学理学更多>>
- 巯基化合物和磷酸盐及其类似物对鲍鱼碱性磷酸酶的抑制作用被引量：3
- 2004年
- 研究二巯基苏糖醇(DTT)、巯基乙醇(ME)等巯基化合物及磷酸盐(Na2HPO4)、砷酸盐(Na2HAsO4)、酸盐(Na3WO4)和钼酸盐(Na3MoO4)对鲍鱼碱性磷酸酶(ALP)活力的影响.结果表明:这些效应物对该酶都具有明显的抑制作用,而且它们的抑制作用强度依次为:DTT>ME;Na2HPO4>Na3WO4>Na2HAsO4>Na3MoO4.进一步研究这些效应物对该酶的抑制作用机理,表明:巯基化合(DTT、ME)均非竞争性抑制;Na2HPO4、Na2HAsO4和Na2HWO4表现为竞争性抑制;本文测定了它们的抑制常数并加于比较.
- 洪燕飞廖金花吴国欣陈清西
- 关键词：巯基化合物磷酸盐碱性磷酸酶杂色鲍抑制动力学
- SDS变性剂对杂色鲍碱性磷酸酶的活力与构象的影响被引量：4
- 2005年
- 以十二烷基磺酸钠(SDS)为变性剂,研究其对杂色鲍碱性磷酸酶(ALP)活力的影响,结果表明酶的剩余活力随着SDS浓度增高而下降,但当下降到67%时,随着SDS浓度增高,酶活力几乎不再发生明显变化.这说明杂色鲍ALP对SDS具有高度的耐受性.研究SDS对杂色鲍ALP的pH稳定性的影响,发现该酶的pH稳定性区域由5.9～10.0区域漂移到7.6～10.6区域,显示酶的pH稳定性往碱性区域偏移.进一步以荧光和紫外光谱为监测手段,研究杂色鲍ALP经SDS微扰后的分子构象变化情况.其结果表明随着SDS浓度增高,荧光发射强度逐渐发生变化,但发射峰未发生明显变化;紫外吸收强度发生变化,但吸收峰也未发生明显变化.这说明该酶活性中心对SDS变性剂并不敏感.这在以往文献中未见过报道.
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- 关键词：碱性磷酸酶SDS杂色鲍变性剂监测手段分子构象
- 鲍鱼碱性磷酸酶的分离纯化和性质研究被引量：50
- 2005年
- 以杂色鲍(Haliotis diversicolor)内脏为原料,经Tris HCl缓冲液(pH 7.5,含0.1mol/L NaCl)抽提,正丁醇处理,硫酸铵分级沉淀分离,DE 32离子交换、Sephadex G 150分子筛、DE 32纯化,得到电泳单一纯的碱性磷酸酶制剂,比活力为1 226 U/mg.酶学性质和动力学性质研究表明:该酶催化对硝基苯磷酸水解反应的最适 pH值为 10.08,最适温度为48℃.米氏常数Km 值为0.80 mmol/L,Vm 值为20.1 mmol/L·min-1(pH 10.0,37℃).酶的热稳定性研究表明:该酶在pH 7~11区间和在温度低于55℃下稳定.金属离子对酶活力的影响结果表明:Li+、Na+和K+对酶活力没有影响,Mg2+、Ca2+、Ba2+、Mn2+和Co2+对酶有不同程度的激活作用,而Cu2+、Cd2+、Zn2+、Hg2+、Ag+、Bi2+和Pb2+等对酶起抑制作用.
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- 关键词：杂色鲍碱性磷酸酶酶活性金属离子生物体
- 杂色鲍碱性磷酸酶在醇、醛和酮溶液中的失活作用被引量：2
- 2005年
- 报道了杂色鲍碱性磷酸酶(ALP)在甲醇、乙醇、丙醇、甲醛、丙酮等溶液中的失 活动力学．结果表明:酶的剩余活力随着有机溶剂浓度的增大而迅速下降．测得上述 5种有机溶剂对该酶的半抑制率(IC50)分别为5．41、3．07、1．80、31．0×10-3、2．30 mol／dm3．在这些有机溶剂溶液中酶的失活过程都是可逆反应．检测醇、醛、酮对该酶 的失活作用机理,结果表明甲醇、乙醇、丙醇对杂色鲍ALP的失活作用均为非竞争性 机制,其抑制常数分别为5．36、3．02、1．80mol／dm3．甲醛、丙酮对杂色鲍ALP的失活 作用都呈现为混合型抑制,其对游离酶的抑制常数(K1)分别为24．7×10-3、1．66 mol／dm3;对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为56．2×10-3、5．40mol／dm3．
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- 关键词：海洋生物碱性磷酸酶杂色鲍失活作用有机溶剂
- 效应物对鲍鱼碱性磷酸酶活力的影响
- 鲍鱼是我国南方海珍品的主要养殖种类，具有较高的经济价值和药用价值。碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase，简称ALPase，EC 3.1.3.1)是鲍鱼重要的代谢酶之一，与鲍鱼的生长发育密切相关。本文主要研...
- 洪燕飞
- 关键词：碱性磷酸酶抑制动力学效应物
- 文献传递
- 杂色鲍碱性磷酸酶在DMSO溶液中的活力与构象变化的研究被引量：2
- 2005年
- 以二甲亚砜(DMSO)为效应物,研究其对杂色鲍碱性磷酸酶(ALP)活力的影响,结果表明:该酶的剩余活力随着DMSO浓度增大而迅速下降,当DMSO浓度达40%,酶活力几乎完全丧失.说明DMSO对杂色鲍ALP有明显的失活作用.导致酶活力丧失50%的DMSO浓度为17%.在较低DMSO浓度(<20%)的失活是可逆的反应过程.动力学研究表明,该酶的失活过程属于混合型.进一步测定游离酶(E)和酶底物络合物(ES)与DMSO的结合常数(KI和KIS),结果表明KI
- 陈巧洪燕飞廖金花陈清西
- 关键词：杂色鲍碱性磷酸酶失活作用构象DMSO
