梁春 作品数:317 被引量:885 H指数:15 供职机构: 第二军医大学长征医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 农业科学 自动化与计算机技术 更多>>
水飞蓟素对雷帕霉素诱导的内皮祖细胞凋亡和生长抑制的拮抗作用 被引量:4 2013年 目的:水飞蓟素对雷帕霉素诱导的内皮祖细胞(EPCs)凋亡和生长抑制的拮抗作用。方法:通过密度梯度离心法分离、培养、鉴定得到EPCs;在EPCs培养物中加入不同浓度(0、01、1、10、100 ng/ml)的雷帕霉素干预24 h和加入(1 ng/ml)雷帕霉素干预不同时间(0 、6、12、24、48 h)。收集细胞检测其增殖和迁移能力。在EPCs培养物中加入不同浓度(0、25、50、100 μg/ml)的水飞蓟素干预24 h后,收集细胞检测其增殖、迁移和凋亡的水平。在EPCs培养物中同时加入(1 ng/ml)雷帕霉素和不同浓度(25、50、100 μg/ml)水飞蓟素干预24 h后,收集细胞检测其增殖、迁移、凋亡和体外血管生成的能力。结果:与未药物干预的EPCs培养物相比较,雷帕霉素(1、10、100 ng/ml)能抑制EPCs增殖和迁移,并随干预浓度的增加和干预时间的延长而增加(P〈0.05)。水飞蓟素干预24 h后,50 μg/ml和100 μg/ml的水飞蓟素可明显增加EPCs增殖和迁移的能力(P〈0.05),25~100 μg/ml的水飞蓟素可明显抑制EPCs凋亡(P〈0.05),并呈浓度依赖性。EPCs在加入雷帕霉素(1 ng/ml)和不同浓度水飞蓟素(25、50、100 μg/ml)共同干预24 h后,50 μg/ml和100 μg/ml的水飞蓟素都可明显改善雷帕霉素对EPCs的促凋亡作用,并能逆转雷帕霉素对EPCs增殖、迁移和血管形成能力的抑制作用(P〈0.05)。结论:雷帕霉素能抑制EPCs增殖和迁移,并呈浓度和时间依赖性。水飞蓟素能增强EPCs增殖和迁移,抑制其凋亡,并呈浓度依赖性。水飞蓟素能抑制雷帕霉素对EPCs的促凋亡作用,并能逆转雷帕霉素对EPCs增殖、迁移和血管形成能力的抑制作用。 张鹏 乔昆 任雨笙 梁春 冷冰 吴宗贵关键词:内皮祖细胞 雷帕霉素 水飞蓟素 增殖 麝香保心丸辅助治疗急性心肌梗死疗效的Meta分析 被引量:4 2019年 目的系统评价麝香保心丸辅助治疗急性心肌梗死的临床效果。方法计算机检索PubMed、Web of Science、EMbase、MedLine、Cochrane图书馆、维普中文期刊服务平台(VIP)、中国学术期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库、万方数据库等,从建库至2019年2月发表的麝香保心丸辅助治疗急性心肌梗死的相关文献。经质量评价最终纳入文献后,用Stata14.0软件对纳入指标进行Meta分析。结果共纳入24项研究,全部为中文文献,Jadad评分1篇为5分,3篇为4分,20篇为3分。Meta分析结果:麝香保心丸辅助治疗组有效率显著优于对照组,差异有统计学意义[OR=3.81,95%CI(2.62,5.53),P<0.001];麝香保心丸辅助治疗组左室射血分数(LVEF)较对照组显著升高,差异有统计学意义[SMD=0.86,95%CI(0.75,0.97),P<0.001];麝香保心丸辅助治疗组血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)和白细胞介素-6(IL-6)水平均较对照组显著降低,差异有统计学意义[SMD=-1.07,95%CI(-1.25,-0.90),P<0.001;SMD=-1.64,95%CI(-1.92,-1.36),P<0.001]。结论当前证据表明,应用麝香保心丸辅助治疗急性心肌梗死可显著提高病人治疗有效率,改善心功能,并降低炎症因子水平。 张艳达 赵健 张如岗 丁茹 梁春 吴宗贵关键词:急性心肌梗死 麝香保心丸 META分析 心功能 炎症因子 丹参片对稳定型心绞痛患者运动耐量的影响 目的:观察丹参片对稳定型心绞痛患者运动耐量的影响.
方法:将48例稳定型心绞痛患者随机、双盲分为丹参片组和对照组,每组24例,在常规治疗的基础上给予丹参片或丹参模拟片,3片,1日3次,共4周.观察治疗前后活动平... 任雨笙 梁春 吴宗贵 张家友 孙承波 陈琴珍关键词:丹参片 稳定型心绞痛 运动耐量 平板运动试验 心电图 文献传递 微创采血结合多色流式细胞术分析小鼠外周血记忆T细胞亚群 被引量:2 2014年 目的为实现序贯多时间连续采血监测小鼠外周血记忆T细胞亚群的变化情况,建立并优化微创采血结合多色流式细胞术分析的方法体系。方法经隐静脉进行微创采血,使用荧光补偿微球进行多色荧光补偿矩阵的建立,在BDCalibur双激光流式细胞仪上分析小鼠外周血记忆T细胞亚群(初始T细胞、中心记忆T细胞、效应记忆T细胞),评估采血体积、全血是否离心、抗体孵育浓度、红细胞裂解后是否洗涤等参数对多色流式分析结果的影响。随后采用优化的流式细胞分析方法动态评估C57和动脉粥样硬化(As)易发载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠在从常规饮食切换至高脂饮食过程中记忆T细胞的演变过程。结果(1)经小鼠隐静脉可实现10~50μL采血,该采血可无需对实验动物进行麻醉,能够实现多次重复采血,且10μL全血即可满足多色流式细胞术分析的需要,并减少抗体用量。(2)联合高速离心分离血细胞进一步缩小抗体孵育体积,则可进一步节省抗体的用量。(3)对抗体浓度的优化能在保证检测结果准确性和可重复性好的基础上进一步降低抗体用量和背景荧光的干扰。(4)红细胞裂解后加用洗涤可进一步降低背景荧光,但延长操作时间;也可裂解后直接上机检测。(5)使用上述流式细胞学分析方法揭示:apoE-/-小鼠在常规饮食基线水平其体内的效应记忆T细胞水平即高于对照C57小鼠(P〈0.05),给予高脂饮食3周后基本达到平台,而C57小鼠在高脂饮食2周即达到平台,表明apoE-/-小鼠在AS斑块进展早期即出现免疫调节紊乱。结论采用隐静脉采血结合优化流式细胞术抗体孵育流程可实现序贯连续采血,完成对小鼠体内记忆T细胞亚群的动态观察。 杨阳 俞诚虹 段磊 贺治青 丁茹 伍锋 代现良 黄帅波 梁春 吴宗贵关键词:流式细胞术 外周血 记忆T细胞 经皮冠状动脉介入治疗后肌钙蛋白I阳性患者血清基质金属蛋白酶水平升高的临床意义 被引量:2 2003年 目的 :探讨血清基质金属蛋白酶 (MMP)在稳定型心绞痛患者中介入治疗后的表达。方法 :16例冠状动脉造影正常的患者 (对照组 )及 5 1例行冠状动脉介入治疗的稳定型心绞痛患者 (患者组 )入选 ;术后常规查肌钙蛋白I(cTnI) ,分别采取术前 ,术后第 1、第 3及第 5天的外周血 ,Elisa试剂盒测定MMP 2、MMP 9的水平。结果 :5 1例患者中共有 2 1例患者cTnI增高 ,平均 (0 .6 8± 0 .2 3) μg/L ;术前两组的MMP水平无明显差异 ;cTnI阳性者的MMP 9在术后第 1天明显高于阴性者及对照组〔(198± 5 8.5 )∶(14 4± 4 8.3)、(132± 4 6 .7) μg/L ,均 P <0 .0 5〕 ,并在术后第 3天、第 5天保持较高水平 ;MMP 2仅在术后第 1天增高 ,第 3天、第 5天恢复正常。结论 :冠状动脉介入治疗后心肌微损伤的发生率较高 ,这种心肌微损伤对患者的预后有一定的影响 ;血清MMP水平的增高 ,可能是此类患者临床预后较差的原因之一。 沈成兴 陈良龙 钱菊英 梁春 樊冰 陈灏珠 葛均波关键词:肌钙蛋白 基质金属蛋白酶 血管成形术 支架植入术 洛沙坦抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠平滑肌细胞基质金属蛋白酶的分泌表达 目的:本研究的目的是观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠平滑肌细胞分泌表达MMPs的影响以及AT-1受体拮抗剂洛沙坦的作用。方法:在体外,分离培养大鼠平滑肌细胞并使之同步后,分别加入不同浓度AngⅡ(10-10mol/L)... 罗育坤 梁春 吴宗贵 丁健 葛均波文献传递 晚期糖基化终产物修饰的低密度脂蛋白下调小鼠骨髓来源肥大细胞白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α释放 2015年 目的观察晚期糖基化终产物(AGE)修饰的低密度脂蛋白(LDL,AGE-LDL)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠骨髓来源肥大细胞(mBMMCs)释放IL-6和TNF-α的影响,并探讨血红素加氧酶(HO)-1对mBMMCs释放IL-6和TNF-α的影响。方法从C57BL/6小鼠骨髓分离、培养mBMMCs,经鉴定后,以2×106/孔接种于12孔细胞培养板中,分别加入不含糖的反应液孵育LDL(n-LDL)50μg/mL(n-LDL组)、AGE-LDL50μg/mL(AGE-LDL组)、LPS 100ng/mL(LPS组)、LPS 100ng/mL+n-LDL 50μg/mL(LPS+n-LDL组)、LPS 100ng/mL+AGE-LDL 50μg/mL(LPS+AGE-LDL组),LPS 100ng/mL+锌原卟啉(Znpp)10μmol/L(LPS+Znpp组)、LPS 100ng/mL+n-LDL 50μg/mL+Znpp 10μmol/L(LPS+n-LDL+Znpp组)、LPS100ng/mL+AGE-LDL 50μg/mL+Znpp 10μmol/L(LPS+AGE-LDL+Znpp组),调节培养基终体积为1mL,于37℃培养90min。采用ELISA法检测IL-6和TNF-α水平,RT-PCR检测mBMMCs HO-1mRNA表达水平,Western印迹法检测抗小鼠丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化P38(p-P38)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)1/2和NF-κB磷酸化P65(p-P65)蛋白表达水平。结果 LPS+AGE-LDL组的IL-6水平显著低于LPS组和LPS+n-LDL组(P值均<0.01),TNF-α水平显著低于LPS组(P<0.05)。LPS+AGE-LDL+Znpp组的IL-6和TNF-α表达水平均高于LPS+AGE-LDL组(P值均<0.01)。AGE-LDL组的HO-1mRNA相对表达量为2.404±0.576,显著高于n-LDL组的1(P<0.05)。AGE-LDL组的p-P38、p-ERK2和p-P65蛋白表达率均显著高于对照组(P值分别<0.01、0.05),LPS组与LPS+AGE-LDL组间的差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论 AGE-LDL可下调LPS诱导mBMMCs释放的IL-6和TNF-α水平,此下调可能通过升高HO-1表达而起作用。AGE-LDL可激活MAPK P38、ERK和NF-κB信号通路。AGE-LDL可能通过MAPK下游通路影响HO-1的表达,进而下调炎性细胞因子表达水平。 黄骁 赵馨娜 梁春 吴宗贵关键词:晚期糖基化终产物 低密度脂蛋白 肥大细胞 白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-Α 氧化修饰低密度脂蛋白可诱导人单核细胞源树突状细胞形成泡沫细胞 被引量:9 2006年 目的:探讨氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)对人单核细胞源树突状细胞(DC)功能的影响。方法:采用免疫磁珠法分离人外周血CD14+单核细胞,经含rhGM-CSF(100μg/L)和rhIL-4(20μg/L)的Cellgro培养,使其分化为DC。DC与100 mg/L天然的或氧化修饰的LDL孵育72 h后,采用透射电镜和尼罗红染色观察细胞内脂质沉积,流式细胞术检测DC表型(CD1 a,CD40,CD86,HLA-DR),混合T淋巴细胞反应检测DC对淋巴细胞增殖的影响,FITC-dextran检测DC吞噬功能,ELISA检测细胞培养上清Th1/Th2(IL-12/IL-2)细胞因子的浓度。结果:ox-LDL可诱导DC形成泡沫细胞,而天然的LDL无此作用。经ox-LDL处理的DC吞噬作用明显弱于天然的LDL,而对T细胞增殖作用却明显强于天然的LDL;可明显上调CD80(72.4±9.6vs89.5±10.1,P<0.01),CD86(67.2±8.8vs80.2±11.6,P<0.01),HLA-DR(80.6±9.8vs86.6±10.8,P<0.01)和CD1 a(40.2±10.3vs60.2±9.3,P<0.01)的表达,明显促进DC细胞因子IL-12[(44.3±8.9)ng/Lvs(65.1±10.4)ng/L,P<0.05]的分泌,但却降低IL-2[(43.6±7.8)ng/Lvs(10.0±4.5)ng/L,P<0.01]。结论:DC可通过摄取ox-LDL形成泡沫细胞,而后者与成熟DC的功能相似,说明DC可能是泡沫细胞新的来源,在动脉粥样硬化免疫病理发生中具有重要的作用。 梁春 罗育坤 黄东 贾庆哲 许从峰 王克强 吴宗贵 葛均波关键词:树突细胞 泡沫细胞 超声检查测量心踝指数新方法 被引量:3 2008年 目的评估超声方法测量心踝指数(CAVI)的准确性和可重复性,以及它与振荡法CAVI之间的相互关系,分析CAVI与颈动脉弹性指标的关系。方法选取进行年度体检者96人(男性64人),年龄22—62岁,平均年龄(41.2±8.9)岁,使用M型及多普勒法分别测量主动脉.踝动脉的脉搏波传导速度(eaPWV),经公式计算可分别得出M型心踝指数(CAVIm)和多普勒法心踝指数(CAVId)。使用全自动动脉硬化检测设备测量CAVI。在96人中随机抽取20人进行重复性测量:观察者间重复性:每个对象由2名观察者(观察者1和观察者2)以随机顺序进行CAVIm和CAVId测量,两侧测量之间至少相隔5min。观察者内可重复性:每个对象由观察者1进行2次测量,2次测量之间相隔1d。结果M型和多普勒法测得的CAVIm和CAVId与振荡法测得的CAVI有良好的相关性(r1=0.925,r2=0.738,P〈0.001)。观察者内和观察者间CAVIm和CAVId的可重复性Pearson相关显著,单变量分析结果表明,CAVI、CAVIm和CAVId均和内中膜厚度(IMT)、僵硬度指数(13)显著相关。结论超声方法为无创简便地测量CAVI提供了一种新的方法,用于评价大动脉弹性功能可重复性好,与振荡法CAVI显著相关。 王磊 方平 梁春 谭跃萍 胡丹 丛阳 吴宗贵关键词:动脉硬化 血管 超声检查 ERK1/2介导去甲肾上腺素对内皮祖细胞的功能调节 被引量:2 2012年 目的探讨去甲肾上腺素(NE)对内皮祖细胞(EPCs)增殖和迁移能力的调节作用及其分子机制。方法将培养的健康成人外周血EPCs用不同浓度的NE、肾上腺素能受体拮抗剂或MAPK信号通道阻滞剂干预,检测EPCs的增殖和迁移能力,以及ERK1/2信号通路的激活情况。结果 NE浓度依赖性地(0.01、0.1、1、10μmol/L)促进EPCs增殖,与对照组比较EPCs分别增加(48.3±23.3)%、(70.5±35.6)%、(82.4±14.9)%和(100.3±48.1)%。α受体拮抗剂酚妥拉明、选择性β2肾上腺能受体拮抗剂I127、JNK抑制剂SP600125和ERK1/2抑制剂A6355能够阻断NE的促增殖作用;而β1受体拮抗剂美托洛尔和p38抑制剂PD169318不能阻断NE的刺激效应。10μmol/L NE促进EPCs的迁移(P<0.05),10μmol/L酚妥拉明和10μmol/L I127能够阻断这种作用,但美托洛尔不能。NE能够浓度依赖性(0.1、1、10μmol/L)地激活EPCs内的ERK1/2,酚妥拉明和I127能够阻断ERK1/2激活(P<0.05),而美托洛尔不能。结论 NE可能通过α和β2肾上腺能受体激活ERK1/2促进EPCs的迁移和增殖。 姜其钧 吴建祥 刘星 梁春 任雨笙 吴宗贵关键词:内皮祖细胞 去甲肾上腺素 Β受体拮抗剂 细胞迁移 ERK1/2