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梁布锋: 作品数：40 被引量：77H指数：5; 供职机构：中国科学院武汉病毒研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家科技攻关计划更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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棉铃虫核型多角体病毒基因型体内分离被引量：1: 1998年; 用作杀虫剂的棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒的基因型存在着异质现象。采用体内纯化基因型的方法，从低剂量ＨａＳＮＰＶ感染的单条棉铃虫死虫中分离到两株具有纯基因型的病毒，其ＤＮＡ限制性内切酶图谱彼此存在差异，但都没有亚克分子带。实验结果表明，该两株病毒为纯基因型病毒。; 刘润忠梁布锋王晓容张友清; 关键词：棉铃虫多角体病毒基因型

昆虫杆状病毒晚期启动子在大肠杆菌中启动CAT基因表达: 1995年; 将油桐尺蠖（Ｂｕｚｕｒａｓｕｐｐｒｅｓｓａｒｉａ）核多角体病毒晚期基因──多角体蛋白基因启动子及５′端编码区，以两种不同方式置于缺乏启动子的氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）基因上游，使其分别终止在不同翻译终止位点，其宿主菌具有明显不同的氯霉素抗性，最高达２００ｍｇ／Ｌ　ＬＢ培养基以上，表明昆虫病毒启动子能启动原核基因表达。对多角体蛋白基因启动子能在大肠杆菌中有效工作的原因进行了讨论。; 刘明富梁布锋陈东胡志红; 关键词：杆状病毒昆虫病毒大肠杆菌 CAT基因

杆状病毒的分子生物学及分子进化研究: 陈新文胡志红孙修炼王华林王汉中彭辉银金锋李枚JustM.VlakBasilM.Arif刘明富梁布锋王录明邓菲吴东罗保君刘岚卢玉蓉张双民; 首次报道了棉铃虫病毒HaSNPV基因组131403bp和HzSNPV基因组的全序列97%同源性揭示了两者可能为同一种病毒的不同变种。发明了“基因对比排列图”（GeneParityPlot）研究方法，首次揭示了NPV基因组...; 关键词：; 关键词：杆状病毒分子生物学分子进化

丙型肝炎病毒北京株NS3基因的克隆及测序: 1999年; 用ＲＴ－ＰＣＲ方法从北京株丙型肝炎病毒中扩增出ＮＳ３区基因片段，该片段经ｐＧＥＸ－Ｔ载体克隆到大肠杆菌ＤＨ５α菌株中．经自动序列分析仪测出ＮＳ３基因的７２８ｂｐ长的核酸序列．发现在该片段中第３１位核苷酸发生Ａ→Ｔ突变，产生一个终止突变．这表明，丙型肝炎病毒北京株存在一定的变异，产生缺陷型病毒，这类缺陷型病毒的出现可能是丙型肝炎病毒持续性感染的原因之一．; 李东梁布锋祁自柏; 关键词：丙型肝炎病毒 RT-PCR

α-2b干扰素重组质粒的建立及在毕赤酵母中的表达被引量：1: 2007年; 目的:采用基因工程手段构建基因工程菌表达α-2b干扰素。方法:根据毕赤酵母密码子嗜好性原理设计并合成α-2b干扰素基因序列,将其插入到毕赤酵母Pichia pastoris的分泌型表达质粒pPIC9K中,得到重组分泌表达质粒pPIC9K-IFNα-2b,并用电转化法转化P.pastoris GS115。筛选出整合型His+Muts菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子,经5d诱导表达后SDS-PAGE检测。结果:菌落PCR和序列测定结果显示重组表达质粒已成功构建,SDS-PAGE结果显示目的蛋白已成功表达。结论:在毕赤酵母中成功表达α-2b干扰素。; 丁鹏方斌梁布锋何光源; 关键词：Α-2B干扰素毕赤酵母 PPIC9K SDS-PAGE

含三个启动子的杆状病毒转移载体: 本发明是研制含有三个启动子的杆状病毒转移载体,分别是hsp70早期基因启动子,cor晚期基因启动子,polh极晚期基因启动子。属生物学基因工程领域,其主要技术特征是在重组病毒复制的不同时期,分别控制三个外源基因的表达。在...; 梁布锋; 文献传递

长江流域的昆虫病毒资源及其开发利用被引量：2: 1994年; 在长江流域已发现约１３０种昆虫病毒，其中多数属杆状病毒科。昆虫病毒作为杀虫剂在本地区广泛应用，防治棉花、森林、茶树、蔬菜和牧草上的害虫，克服了化学农药的一些缺点，取得了良好的生态效益和经济效益。近年来还进行了杆状病毒表达载体的研究，该系统的研制已用于高水平表达具有生物活性的外源基因产物，获得医药产品，或者组建更有效的基因工程病毒杀虫剂。; 梁布锋刘明富; 关键词：昆虫病毒杆状病毒生物防治基因工程

HCV E2区基因在真核表达系统中的表达被引量：2: 2001年; 以原核表达载体 pET E2为模板 ,用PCR的方法重新扩增出带有适于真核表达载体多克隆位点的E2基因。PCR产物经纯化并双酶切后与相同处理的真核表达载体pSecTag2 /Hygro连接并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,重组表达载体在大量扩增并纯化后再转染COS7细胞。收集的培养上清经过Ni 柱纯化 ,用ELISA进行血清检测显示 :6份HCV阳性血清中有 4份检出有E2抗体 ,而 5份HCV阴性血清中也有一份检出有E2抗体。; 张东伟梁布锋祁自柏凌世淦; 关键词：基因表达丙肝病毒

通过PCR进行长片段DNA的合成: 2004年; 利用PCR合成DNA长片段(Synthesis Large Frament DNA using PCR,SLFD PCR)是一种有效的合成长片段DNA的方法。采用一段已知的500～600bp碱基的DNA片段为PCR模板,根据所要合成的DNA序列可以设计一系列的PCR引物,这些引物都位于模板DNA的5’端,长度为50～60bp,且从5’到3’方向顺序重叠,重叠碱基数目为12～15,全部引物叠加所得到的DNA正是自己所要合成的DNA。这组引物中最3’端的一条含有一个BamH Ⅰ酶切位点,在该位点后面有15碱基与模板DNA5’端一致的序列。另外还设计一条与该模板匹配的下游引物,引物内也含有一个BamH Ⅰ酶切位点。首先采用5’端最右侧的引物与下游引物进行PCR,在PCR进行10个循环后,以此次PCR的产物为下一轮PCR的模板,该轮PCR采用右侧倒数第二个引物为上游引物,下游引物保持不变。采用类似的方法,完成所有的PCR循环,就可以得到所需要合成的DNA长片段。该方法尤其适合100～200碱基左右的长片段DNA的快速合成与克隆。; 李炜东梁布锋祁自柏; 关键词：PCR DNA合成

CCR 5结构与功能研究进展被引量：3: 1999年; ＨＩＶ的侵入与宿主细胞表面共受体ＣＣＲ５密切相关。本文报道了ＣＣＲ５５端非编码区多态性的研究，以及用基因删除，点突变等方法研究ＣＣＲ５Ｎ端和Ｃ端的功能区域。发现了ＣＣＲ５ Δ３２受体基因缺陷型能有保护人群免受ＨＩＶ的感染。; 李暐东龚岷梁布锋; 关键词：CCR5 艾滋病病毒