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林旭嫒

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：浙江大学医学院病原生物学系更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇溶血活性
  • 1篇转录
  • 1篇转录水平
  • 1篇问号钩端螺旋...
  • 1篇螺旋体
  • 1篇基因
  • 1篇基因功能
  • 1篇基因功能分析
  • 1篇功能分析
  • 1篇钩端螺旋体
  • 1篇感染细胞

机构

  • 1篇浙江大学

作者

  • 1篇林旭嫒
  • 1篇赵金方
  • 1篇严杰

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2009
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
问号钩端螺旋体鞘磷脂酶类溶血素基因功能分析及其感染细胞后转录水平变化
2009年
目的了解问号钩端螺旋体（简称钩体）鞘磷脂酶类溶血素基因sph1—sph4产物溶血活性及其感染细胞后转录水平的变化。方法以致病性问号钩体黄疸出血群赖型赖株、波摩那群波摩那型罗株和非致病性双曲钩体三宝垄群Patoc型PatocⅠ株基因组DNA为模板，采用PCR扩增全长sph1-sph4基因片段，扩增产物T—A克隆后测序。构建sph1—sph4基因原核表达系统，采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rSph1—rSph4的表达情况，Ni—NTA亲和层析柱提纯rSph1—rSph4。采用绵羊血平板对rSph1～rSph4溶血活性进行鉴定，实时荧光定量RT—PCR检测问号钩体赖株感染J774A.1细胞前后sph1～sph4基因转录水平的变化。结果问号钩体赖株和罗株基因组DNA中均能扩增sph1～sph4基因，双曲钩体PatocⅠ株则否。与报道的相应基因序列比较，所克隆的sph1—sph4基因核苷酸序列相似性均为100％。所构建的原核表达系统能分别表达目的重组蛋白rsph1～rSph4。rSph1～rSph4均有溶血活性，其中以rSph2溶血活性最强。问号钩体赖株感染J774A．1细胞后，sph1—sph4基因转录水平均上调，其中sph2和sph4基因mRNA水平上调更为明显。结论sph1—sph4基因仅存在于致病性问号钩体中，其表达产物有溶血活性。问号钩体赖株感染细胞后sph1～sph4基因转录水平的上调，提示此类鞘磷脂酶类溶血素可能在问号钩体感染宿主过程中有重要作用。
赵金方林旭嫒严杰
关键词：问号钩端螺旋体溶血活性转录水平
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