杨安钢
- 作品数：349 被引量：998H指数：13
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌组织中的表达及其临床意义被引量：4
- 2014年
- 目的检测Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌组织中的表达情况,并分析Notch1的表达与临床病理特征的相关性。方法利用免疫组织化学染色,Western blot法和实时定量PCR(qRT-PCR)分别检测肾细胞癌组织及对应的癌旁正常肾组织中Notch1的表达,用qRT-PCR检测Notch下游靶分子Hes1的表达,并用SPSS17.0软件分析Notch1的表达水平与临床病理特征的相关性。结果免疫组织化学染色,Western blot法和qRT-PCR结果均显示Notch1在肾细胞癌组织中的表达低于正常肾组织,qRT-PCR结果显示Hes1在肾细胞癌组织中的表达低于正常肾组织,且Notch1的表达与肿瘤Fuhrman分级和AJCC分期呈负相关。结论 Notch1及其下游靶分子Hes1在肾细胞癌的发生发展过程中可能具有肿瘤抑制基因的作用。
- 魏铭王国栋郑国旭郑甲杨帆史圣甲席文锦杨安钢温伟红秦卫军
- 关键词：肾细胞癌NOTCH1HES1NOTCH通路
- PTI-1表达载体构建及在大肠杆菌中的高效表达和纯化被引量：2
- 2002年
- 目的 构建表达人前列腺癌诱导基因 1(PTI- 1)蛋白的重组质粒 ,在大肠杆菌中诱导高效表达并纯化 .方法 应用亚克隆 PTI- 1基因的 p U C19/ PTI- 1质粒 ,重新构建表达载体 PTI- 1/ p GEX4T- 1,酶谱分析鉴定出正确的重组质粒 ,诱导表达 ,进行 SDS- PAGE分析 ,应用 GSH树脂纯化表达产物 .结果 筛选出 5个与 p GEX4T- 1正向重组质粒 ,其中一株表达一个 Mr为 6 90 0 0的新蛋白 ,并以包涵体的形式存在 ,蛋白在宿主菌中高效表达 ,表达量为 43.2 %,纯化蛋白得到纯度为 79.72 %的 GST/ PTI- 1融合蛋白 .结论 重组质粒 PTI- 1/PGEX4T- 1的构建和 GST/ PTI- 1融合蛋白高效表达及纯化的成功使简便获得前列腺癌诱导蛋白成为可能 .
- 付振虹王禾武国军许彦鸣袁建林王成济杨安钢
- 关键词：大肠杆菌纯化前列腺肿瘤基因基因表达
- 重组人肿瘤坏死因子-α联合肿瘤坏死因子受体1基因转染杀伤舌癌细胞的实验研究被引量：4
- 2004年
- 目的 :观察重组人肿瘤坏死因子 α(rhTNF α)对建系细胞 (T T)作用效应与机制。方法 :反转录PCR方法克隆人TNFR1基因 ,并将其稳定转染入舌癌细胞中 ,建系并鉴定 ;通过MTT法检测、DNA降解片段琼脂糖凝胶电泳及电镜观察检测rhTNF α对T T细胞的作用效果与机制。结果 :成功构建含TNFR1基因的真核表达质粒 pcDNA3 TNFR1,并建立表达TNFR1蛋白活性的舌癌细胞系T T ;较之亲本Tca 8113细胞及转染空载体的T pc细胞 ,rhTNF α对T T细胞具有更强的细胞毒作用 ,且通过介导细胞凋亡的方式发挥其作用。结论 :重组人肿瘤坏死因子 α联合肿瘤坏死因子受体 1基因转染可有效地杀伤舌癌细胞 ,为舌癌基因治疗提供理论依据。
- 刘大庆司徒镇强曹云新许彦鸣于翠娟王成济杨安钢
- 关键词：肿瘤坏死因子受体肿瘤坏死因子舌癌细胞
- 高效缺氧诱导表达载体的构建与鉴定
- 2008年
- 目的:构建缺氧诱导表达载体,以介导报告基因在缺氧环境下的特异、高效表达。方法:通过分子生物学方法,将鼠磷酸甘油酸激酶基因的缺氧应答元件(HRE)和最小CMV(mCMV)启动子重组,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)或萤光素酶报告基因的可诱导载体;通过酶切鉴定和测序分析,证实载体获得正确的构建;将重组载体转染HeLa细胞,观察EGFP荧光强度并检测萤光素酶活性。结果:HRE/mCMV启动子调控的报告基因载体具有特异和高效的诱导活性。结论:构建了可以进行特异和高效缺氧诱导的报告基因载体,为其进一步的开发和应用奠定了实验基础。
- 张翔杨洁丁蓉陈锐杜德伟李占亭赵晶杨安钢孙脊峰
- 关键词：报告基因
- UHRF1通过抑制TXNIP参与肾癌的恶性进展
- 背景：UHRF1(Ubiquitin-like protein containing PHD and RING finger domains 1)是一种多功能核蛋白，它在表观遗传学调控中发挥重要作用。
- 焦点魏铭郑国旭席文锦秦卫军王禾杨安钢温伟红
- 关键词：肾癌表观遗传学
- 新的人抗HBsAg抗体Fab cDNA的克隆及序列分析被引量：3
- 2001年
- 目的 从已构建的人抗 - HBs Ag噬菌体抗体库中筛选出结合乙肝表面抗原 (HBs Ag)的特异的人噬菌体抗体 (Fab段 ) ,并进行基因序列分析 .方法 对噬菌体抗体库进行三轮“吸附 -洗脱 -扩增”的筛选 ,使特异性噬菌体抗体得到了富集 .EL ISA实验和 EL ISA竞争抑制实验鉴定出乙肝表面抗原的特异性抗体 ,同时对筛选出的克隆进行基因序列分析 .结果 得到与乙肝表面抗原特异结合的抗体 ,并通过基因序列分析证明为抗乙肝 HBs Ag的抗体 .结论 得到的抗乙肝 HB-s
- 廖琪桦高辉陈南春杨安钢陈苏民粟宽源余宙耀
- 关键词：噬菌体抗体乙型肝炎表面抗原CDNA克隆
- miRNA在免疫系统中的研究进展被引量：10
- 2010年
- 薛茜杨安钢
- 关键词：MIRNA核苷酸免疫系统
- HER2 siRNA抑制肺癌细胞增值的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的构建针对HER2的RNA干涉载体,观察对HER2表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响。方法设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pcD-NA3质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2的肺腺癌细胞系SPC-A-1,RT-PCR检测HER2的mRNA表达,Western Blot和间接免疫荧光法检测HER2的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长。结果成功构建了HER2特异性RNA干涉载体pcDNA3～siHER2;瞬时转染SPC-A-1细胞,HER2的mRNA及蛋白表达均降低;G_1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢(P<0.05)。结论成功构建了HER2 RNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPC-A-1 HER2的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G_1期,造成转染细胞生长速度减慢,这有望为肺癌基因治疗提供一种选择手段。
- 任新玲钱桂生付海京鲍炜杨安钢
- 关键词：SIRNARNA非小细胞肺癌
- 紫杉醇作用的分子机制研究进展被引量：5
- 1999年
- 彭玮丹王成济杨安钢
- 关键词：紫杉醇信号转导抗肿瘤药物细胞学效应
- 在子宫内膜癌ECC-1中他莫西芬通过mir-585调节PAX2蛋白表达被引量：1
- 2010年
- 目的研究在子宫内膜癌ECC-1细胞中他莫西芬（tamoxifen，TAM）对PAX2（pairedbox2）蛋白表达的调节作用，寻找在这-过程中起调节作用的microRNA。方法用他莫西芬刺激ECC-1细胞，Western印迹检测PAX2蛋白表达的变化。利用MicrocosmTargets（miRBaseSequencedatabase）预测了PAX2相关的microRNA。用实时定量的方法检测他莫西芬刺激后ECC-1中PAX2相关microRNA表达的变化，找出差异变化明显的microRNA，合成这些microRNA的mimics，转染人ECC-1细胞中，用Western印迹检测其对PAX2蛋白表达的影响。结果他莫西芬刺激ECC-1细胞系后，Western印迹显示PAX2蛋白表达水平较对照组中等程度上调。实时定量PCR结果显示他莫西芬刺激ECC-1细胞后mir-135b＊，mir-604，mir-585，mir-181c＊表达较对照组明显下调。合成mir-135b＊，mir-604，mir-585，mir-181c＊的mimics并转染人ECC-1细胞后，Western印迹结果显示转入mir-585mimics的ECC-1细胞中PAX2蛋白表达较对照组下调。结论他莫西芬刺激可以引起ECC—1细胞中PAX2蛋白表达水平中等程度上调，通过抑制mir-585的表达减少其对PAX2mRNA翻译的抑制可能是这-调节作用中的部分机制。
- 李轶赵智凝王涛谢桥生孟艳玲杨安钢
- 关键词：MICRORNA子宫内膜癌他莫西芬
