杨东亮
- 作品数：335 被引量：1,099H指数：16
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 中国旱獭（M.himalayana）GAPDH分子的部分cDNA克隆及序列分析被引量：1
- 2014年
- 目的对新近建立的乙肝研究动物模型喜马拉雅旱獭3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）的部分cDNA序列进行了克隆和序列分析．为该模型在HBV感染研究中的应用奠定基础。方法根据Genbank的人GAPDHeDNA的序列设计特异性引物．以提取的旱獭脾组织总RNA为模板,RT-PCR扩增旱獭GAPDH cDNA序列。纯化的PCR产物连接至T载体（pMD18-T），然后构建重组质粒pMD18-T-mhGAPDH。对重组质粒进行PCR初筛、酶切鉴定，将阳性克隆测序。对序列进行同源性以及种系进化分析。结果扩增的旱獭GAPDH序列为535bp，编码序列为533bp（nt3-335），编码177个氨基酸。获得的序列和其它类哺乳动物GAPDH的同源性均在88％以上，其中与土拨鼠GAPDH的同源性最高（99．62％），氨基酸序列同源性高达100％。构建种系进化树，分析结果提示喜马拉雅旱獭GAPDH与土拨鼠GAPDH的亲缘关系最接近。结论成功的克隆了喜马拉雅旱獭GAPDH的部分序列。序列分析结果提示喜马拉雅旱獭GAPDH与土拨鼠GAPDH的亲缘关系最近，同源性最高。
- 朱彬王宝菊朱珍妮黄顺梅宋志韬李安意陶元清王忠东陆蒙吉杨东亮
- 关键词：喜马拉雅旱獭甘油醛-3-磷酸脱氢酶
- 乙型肝炎病毒表达载体pHY106在筛选抗病毒药物中的意义被引量：1
- 2007年
- 目的应用新的HBV表达载体，建立体外筛选临床抗HBV药物的方法。方法克隆对拉米夫定耐药的CHB患者体内HBV全基因组，然后将其亚克隆到HBV真核表达载体pHY106，体外转染Huh7细胞，检测转染后不同时间HBsAg、HBeAg、HBVDNA及HBV复制中间体水平。分析拉米夫定和阿德福韦对HBV基因表达和复制的抑制作用，指导临床用药。结果成功构建全部8个HBV临床分离株全基因组真核表达质粒，HBV聚合酶基因YMDD有5个产生YVDD突变，3个产生YIDD突变。该质粒上HBV基因能在Huh7细胞中进行复制和表达，拉米夫定不能体外抑制HBV复制，阿德福韦抑制了HBV在Huh7细胞中的复制，抑制程度与药物浓度相关。阿德福韦在患者体内也抑制了HBV的复制。结论新建立的体外筛选抗HBV药物的方法能用于临床快速筛选抗HBV药物，对CHB的治疗用药具有指导意义。
- 卢银平董继华刘朝管世鹤陆蒙吉杨东亮
- 关键词：肝炎病毒乙型肝炎乙型抗病毒药
- 热休克蛋白90抑制剂17-AAG对乙型肝炎病毒复制的抑制作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨热休克蛋白90(HSP90)是否参与肝细胞转化生长因子(TGF)β信号通路的活化,以及HSP90对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法 HSP90抑制剂17-AAG作用HepG2细胞,提取细胞总RNA,实时定量RT-PCR检测TGFβ下游信号分子PAI-1的表达。HepG2细胞用17-AAG预处理2 h,同时用TGFβ或TβR抑制剂SB431542作用后,将HBV复制型质粒HBV1.3转染细胞,第4 d提取HBV核心颗粒,Southern Blot检测HBV复制中间体,ELISA检测上清HBsAg的表达。结果 17-AAG能够下调HepG2细胞PAI-1的表达,HepG2细胞内HBV复制中间体表达水平明显降低,HBsAg的表达亦受到抑制,但上调或阻断TGFβ信号通路对HBV复制影响不明显。结论 HSP90参与肝细胞内TGFβ信号通路的活化,其抑制剂17-AAG能够抑制HBV的复制与蛋白表达,但该抑制作用与TGFβ信号通路活化无关。
- 柯晓煜王秋景余源刘慎沛张春燕陈妍杨燕杨东亮
- 关键词：转化生长因子Β
- 我国乙肝病毒感染模型研究及应用进展
- 杨东亮
- 第17届亚太肝脏研究学会丙型肝炎病毒感染的诊断、处理及治疗共识简介被引量：10
- 2007年
- 第17届亚太肝脏研究学会年会于2007年3月在日本京都召开，年会主题为“病毒性肝炎和肝细胞癌在亚洲”。大会制定了亚太地区HCV感染的诊断、处理与治疗的共识，现将该共识进行编译整理以供国内同仁参考。
- 李磊樊和斌杨东亮
- HIF-1α基因多态性与iNOS表达在肝肺综合征中的临床意义
- 2011年
- 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因多态性和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达与肝肺综合征(HPS)易感性的关系。方法对东北地区63例肝硬化HPS组和182例非HPS组,35例无肝病正常对照组,应用RFLP技术检测HIF-1α基因C1772T多态性与腹水沉渣包埋细胞块中iNOS表达的关系,并行遗传易感性分析。结果在非HPS组发现HIF-1α的CC、CT和TT三种基因型,分别为70.9%(129/182)、28.6%(52/182)、0.5%(1/182),对照组发现CC、CT两种基因型,分别为65.7%(23/35)、34.3%(12/35),两组比较无显著性差异(P>0.05);在HPS组发现CC、CT两种基因型,分别为92.1%(58/63)、7.9%(57/63),与前两组比较有显著性差异(P<0.05);对照组和非HPS组C等位基因频率分别为74.5%、77.4%,两组无显著性差异(P>0.05);而HPS组为92.6%,与前两组比较有显著性差异(P<0.05);而HPS组T等位基因频率为7.4%,与正常对照组25.5%和非HPS组22.6%相比差异有显著性(P<0.05);含有C等位基因(C/C、C/T)的病例,iNOS表达阳性率(55.42%)高于含有T等位基因(C/T、T/T)的病例(44.58%)(P<0.05)。结论 HIF-1α的CT多态性与肝硬化患者发生HPS遗传易感性相关;HIF-1α调节iNOS的表达,机体内HIF-1α与iNOS/NO系统的作用可能与HPS的发生发展相关。
- 王燕颖王文多张艳霞赵欣杨东亮
- 关键词：肝肺综合征缺氧诱导因子-1Α多态性
- 胞壁酰二肽激活小鼠原代肝窦内皮细胞中NOD2信号被引量：1
- 2014年
- 目的调查小鼠原代肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSECs)中NOD2信号通路激活后产生的免疫应答效应。方法使用胶原酶灌注方法结合percoll密度梯度离心加抗小鼠LSEC免疫磁珠分离纯化小鼠LSEC。定量PCR检测小鼠原代LSEC NOD1和NOD2 mRNA表达水平,同时给胞壁酰二肽刺激小鼠原代LSEC;定量PCR检测NOD2、RIP2、TNF-α和IL-6mRNA表达水平;定量ELISA检测细胞上清IL-6和TNF-α蛋白产量。结果小鼠原代LSEC中NOD2基础表达水平相对于NOD1基础表达水平较低。胞壁酰二肽刺激LSEC后诱导NOD2及其下游分子RIP2表达水平上调,接着诱导产生IL-6效应分子,而没有诱导产生TNF-α等其它细胞因子和趋化因子。结论胞壁酰二肽能够激活小鼠LSEC中NOD2介导的信号通路,并诱导产生IL-6效应分子,可能在维持肝脏内环境稳定中发挥着重要作用。
- 陈明发孙潺林永夏幼辰杨东亮吴珺
- 关键词：NOD2肝窦内皮细胞胞壁酰二肽信号通路
- APOBEC3F的克隆、真核表达及其抗HBV效应的初步研究
- 2007年
- 目的克隆、体外真核表达载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F(APOBEC3F)基因并研究其抗病毒效应。方法应用RT-PCR的方法从人PBMC细胞中扩增APOBEC3F基因,构建HA-APOBEC3F融合蛋白真核表达载体pXFA3F,pXFA3F和具有复制能力的1.3倍HBV载体pHBV1.3共转染HepG2细胞,Western印迹检测APOBEC3F融合蛋白在HepG2细胞中的表达,ELISA方法检测细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg水平,实时定量PCR检测HBV相关mRNA水平变化。结果克隆了APOBEC3F基因,其经测序与GeneBank公布序列一致;构建的APOBEC3F真核表达载体pXFA3F经转染可在HepG2细胞中瞬时表达;APOBEC3F可抑制乙型肝炎表面抗原和e抗原的分泌,可使转染细胞内HBV相关mRNA水平下降。结论成功克隆并真核表达了APOBEC3F基因,其在体外具有抗HBV生物学效应。
- 马涛雷延昌郝友华王宝菊杨东亮
- 关键词：克隆真核表达
- 土拨鼠肝炎病毒C区基因中段缺失突变及其对核心抗体识别表位的影响
- 目的:了解土拨鼠肝炎病毒核心中段缺失(Core internal deletion,CID)突变株的特征及其对核心抗体识别表位的影响.材料和方法:以自三只慢性土拨鼠肝炎病毒(Woobchuck hepatitis vir...
- 郑昕杨东亮郝连杰
- 文献传递
- 隐匿性乙型肝炎病毒感染的研究进展被引量：16
- 2008年
- 隐匿性HBV感染是指血清HBsAg阴性,但血清和或肝组织HBV DNA持续阳性者。多方面证据表明隐匿性HBV感染客观存在,并且具有传染性和致病性,在肝脏疾病病因学诊断、献血安全和器官移植接受者的HBV感染等方面均具有重要意义。不同人群隐匿性乙型肝炎的感染率有较大差异,它能否导致肝硬化和肝癌也有争议。由于发生机制仍然不明,可能与基因变异、HBV低水平复制、基因整合、HBsAg的表达和分泌被抑制等有关。隐匿性HBV感染的流行病学、发生机制、致病机制等仍然有待进一步研究。
- 张振华叶珺杨东亮
- 关键词：隐匿性乙型肝炎流行病学
