李振红
- 作品数:12 被引量:4H指数:1
- 供职机构:河南科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 封闭式拉长细管冷冻牛卵母细胞的研究被引量:2
- 2011年
- 为探索封闭式拉长细管(closed pulled straw,CPS)冷冻牛卵母细胞的效果,将牛卵母细胞分别采用细管、开放式拉长细管(open pulledstraw,OPS)和CPS 3种方法进行冷冻,解冻后进行体外成熟、体外受精和胚胎体外培养。采用CPS法分别对GV期和成熟(MII期)牛卵母细胞进行冷冻保存,解冻后将卵母细胞培养至成熟,进行体外受精和胚胎体外培养。结果显示:OPS组和CPS组卵母细胞的正常形态率分别为83.1%和77.8%,成熟率分别为66.9%和64.4%,卵裂率分别为45.8%和43.4%,囊胚率分别为6.6%和6.0%,组间上述指标差异均不显著(P>0.05);但OPS和CPS组上述4项指标均显著高于细管冷冻组(P<0.05)。解冻后GV期和MII期卵母细胞卵裂率分别为44.5%和57.3%,囊胚率分别为6.8%和17.9%,组间卵裂率和囊胚率差异均显著(P<0.05)。结果表明:CPS法既具有OPS法快速降温的优点,同时,还能避免卵母细胞和液氮直接接触,降低卵母细胞通过液氮被污染的风险。因此,CPS冷冻法可以用于牛卵母细胞的冷冻。
- 李国浩禹学礼栗颖华马永阔董文听李振红
- 关键词:卵母细胞冷冻
- 转人抗癌基因P53鸡的研究
- 目的:通过构建含有野生型人抗癌基因 P53和报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的重组质粒pEGFP-N1-P53,采用脂质体介导法转染鸡X期胚盘,以期培育出转人类抗癌基因鸡。 方法:RT-PCR法从早期肺癌病人的外...
- 李振红
- 关键词:转基因鸡增强型绿色荧光蛋白
- 文献传递
- 转人抑癌基因p53鸡的研究
- 2019年
- 【目的】探索MAR调控序列对外源人抑癌基因p53在转基因鸡体内整合稳定性的影响,为转基因禽类输卵管生物反应器的建立奠定基础。【方法】利用脂质体包埋法,将pEGFP-N1-p53/MAR重组真核表达载体转染人肝癌细胞(Hep3B),荧光显微镜和透射电镜检测转染含人野生型p53基因的Hep3B细胞形态及超微观结构的变化情况;显微注射法将脂质体介导的重组载体注入鸡X期胚盘的明区和暗区,制备G0代转基因鸡。以EGFP为报告基因,人工授精法制备G1代转基因鸡,对G0代和G1代鸡体外源基因p53进行PCR检测,并对G1代转基因鸡进行小动物活体成像检测。【结果】转染含人p53基因重组载体的Hep3B细胞明显皱缩变圆;微观结构层面,粗面内质网不明显,线粒体肿胀,细胞核中异染色质边集明显,并出现凋亡小体。G0代转基因鸡暗区组孵化率(45%)显著高于明区组孵化率(0)(P<0.05),但均显著低于对照组孵化率(82.5%)(P<0.05);获得4只基因组中含有外源p53基因的G0代转基因鸡,外源基因转染率为22.2%(4/18);获得2只G1代转基因鸡,转基因世代遗传率为3.08%(2/65)。【结论】重组真核表达载体pEGFP-N1-p53/MAR可以促进人肝癌细胞Hep3B的凋亡;脂质体介导的含MAR序列调控元件的pEGFP-N1-p53/MAR质粒,可以提高p53在转基因鸡基因组中的整合稳定性,并可遗传给后代。
- 李鹏姗雷雪芹徐廷生王攀林宋祯李振红史明艳韦光辉张广平李俊堂
- 关键词:HEP3B转基因鸡P53基因转染率
- 一种蛋壳开口器
- 本实用新型公开了一种蛋壳开口器,所述蛋壳开口器包括手柄,手柄的一端设置有磨轮,另一端的端面上设置有置物凹槽,置物凹槽内装有酒精棉球。本实用新型采用专用蛋壳开口器对蛋壳赤道面进行开口时,一边用蛋壳开孔器的磨轮表面轻轻研磨开...
- 徐廷生雷雪芹史明艳李振红宋祯张静
- 文献传递
- 一种提高转基因鸡孵化率的方法及使用的蛋壳开口器
- 本发明公开了一种提高转基因鸡孵化率的方法及使用的蛋壳开口器,该方法包括以下步骤:(1)孵化器的消毒及种蛋的预孵化处理;(2)种蛋的开口;(3)外源基因的注射;(4)种蛋的封口。本发明采用专用蛋壳开口器对蛋壳赤道面进行开口...
- 徐廷生雷雪芹史明艳李振红宋祯王攀林
- 文献传递
- 一种提高转基因鸡孵化率的方法及使用的蛋壳开口器
- 本发明公开了一种提高转基因鸡孵化率的方法及使用的蛋壳开口器,该方法包括以下步骤:(1)孵化器的消毒及种蛋的预孵化处理;(2)种蛋的开口;(3)外源基因的注射;(4)种蛋的封口。本发明采用专用蛋壳开口器对蛋壳赤道面进行开口...
- 徐廷生雷雪芹史明艳李振红宋祯王攀林
- 文献传递
- 河南地方鸡种mtDNA的遗传多样性及其进化关系分析
- 引言我国大约有地方鸡种108个,而在河南省有4个:固始鸡、卢氏鸡、正阳三黄鸡和河南斗鸡。通过对河南4个地方鸡种的mtDNA D-Loop区的序列测定和分析,探讨其遗传多样性和遗传分化关系,为进一步探讨河南地方鸡种的起源进...
- 雷雪芹徐廷生闫义清李振红
- 文献传递
- 一种提高转染效率的表达载体pEGFP‑N1‑p53/MAR、构建方法及转染方法
- 本发明公开了一种提高转染效率的表达载体pEGFP‑N1‑p53/MAR、构建方法及转染方法,该表达载体pEGFP‑N1‑p53/MAR将人抑癌基因p53和鸡的核基质附着区MAR基因插入表达载体中构建而成。本发明通过RT‑...
- 雷雪芹徐廷生史明艳宋祯李振红王攀林
- 文献传递
- 种蛋开口后不同封口方法对鸡胚孵化率的影响
- 20世纪90年代以来,鸡胚胎体外培养方法的建立使鸡的转基因技术取得了新的进展.但由于鸡胚换壳操作难免使鸡胚出现不同程度的损坏,造成鸡胚非自然因素的死亡,同时鸡胚的换壳操作也会增加鸡胚受污染的机会,因此其孵化率极低,前人研...
- 宋祯李振红雷雪芹徐廷生韦光辉
- 关键词:种蛋孵化率
- 一种提高转染效率的表达载体pEGFP-N1-p53/MAR、构建方法及转染方法
- 本发明公开了一种提高转染效率的表达载体pEGFP-N1-p53/MAR、构建方法及转染方法,该表达载体pEGFP-N1-p53/MAR将人抑癌基因p53和鸡的核基质附着区MAR基因插入表达载体中构建而成。本发明通过RT-...
- 雷雪芹徐廷生史明艳宋祯李振红王攀林
- 文献传递