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RT-PCR方法检测细胞信号传导抑制因子-1(SOCS-1) mRNA在髓性白血病中的表达被引量：1: 2006年; 为了研究细胞信号传导抑制因子(SOCS-1)在急性和慢性髓性白血病患者外周血中的表达并探讨其临床意义,用RT-PCR的方法检测急性和慢性白血病患者外周血单个核细胞中SOCS-1mRNA的表达,并将其表达与所有患者的病情进行了分析。结果显示在25例急性髓性白血病患者中4例SOCS-1mRNA表达阳性,阳性率16·00%,在25例慢性髓性白血病患者中11例SOCS-1mRNA表达阳性,阳性率44.00%,二者差异有统计学意义。在25例慢性髓性白血病患者中,无进展组(慢性期)12例,阳性2例,而进展组(加速期和急变期)13例,阳性11例,两组间差异有统计学意义。SOCS-1mRNA阳性的CML患者,对干扰素治疗反应差,进入加速期后SOCS-1mRNA多数呈持续阳性表达,病情进行性发展,预后极差。结论急性和慢性髓性白血病患者外周血单个核细胞中均可检测到SOCS-1mRNA的表达,CML患者阳性率高,加速期与急变期表达阳性者显著增多,与干扰素治疗反应及预后密切相关。; 杨海平戴敏周红升黄亮张东华; 关键词：SOCS-1 MRNA 白血病

HA-1树突状细胞核酸疫苗的构建及其特异性CTL的诱导: 2006年; 本研究以次要组织相容性抗原HA-1为靶点,构建HA-1树突状细胞核酸疫苗用于造血干细胞移植后抗白血病治疗。体外培养移植供者树突状细胞,用流式细胞术、混合淋巴细胞反应检测其免疫活性,通过电转法将HA-1基因转染树突状细胞,构建树突状细胞核酸疫苗。48小时后检测HA-1蛋白表达情况。将转染后的树突状细胞与同基因淋巴细胞共孵育诱导特异性CTL,应用LDH释放实验检测其体外杀伤活性。结果表明经外周血单核细胞诱导的树突状细胞表达树突状细胞表型,能刺激同种淋巴细胞增殖。电转48小时后,Westernblot可检测到HA-1蛋白表达。诱导的CTL体外杀伤活性高于对照组。结论次要组织相容性抗原HA-1可作为造血干细胞移植后抗白血病治疗的靶点。; 汪涯雅张东华刘文励周红升张路戴敏黄振倩谭获熊平; 关键词：树突状细胞造血干细胞移植细胞毒性T淋巴细胞

实时定量RT-PCR监测造血干细胞移植前后CML28mRNA表达被引量：5: 2005年; 本研究的目的在于建立检测CML28mRNA的SYBRGreenI实时定量PCR(RQPCR)的方法,并探讨CML28表达水平与异基因造血干细胞移植(AlloHSCT)后白血病复发之间的相关性,为此构建了pcDNA3.1HisACML28质粒作为定量模板,选择14例白血病患者进行研究。14例患者包括:10例慢性髓系白血病(CML),3例急性髓系白血病(AML),1例Ph阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)。应用RocheLightCyclerPCR仪动态监测患者移植前后不同时间段的50份骨髓单个核细胞中CML28表达水平。研究结果表明:RQPCR的灵敏度为10-4(0.05ng)水平,标准品日间差及日内差均小于10%,重复性好。初治组中AML和CML加速期(CMLAP)与急变期(CMLBC)患者CML28呈高表达(6.58±2.34)×10-2,预处理前组CML28水平为(2.19±0.32)×10-2,移植后1月组CML28水平为(1.35±1.28)×10-2,移植后3月及以后组(以下简称移植后3月组)CML28水平为(4.57±6.39)×10-3。定期随访表明,3例CMLAP或BC患者与1例CML慢性期(CMLCP)患者,在AlloHSCT3个月后检测仍呈阳性,其中2例CML28mRNA的水平<2×10-2,获无病生存;2例CML28水平>2×10-2者,一年内均出现复发,其中1例死亡,另1例行第2次AlloHSCT后CML28水平虽然迅速下降,但仍>2×10-2,2个月后再次复发。结论:CML28水平与疾病的演变过程存在良好的相关性,对于造血干细胞移植受者,动态监测CML28水平比单一的结果价值更大,实时定量检测移植后CML28水平对预测白血病复发有一定的意义。; 张东华戴敏周红升汪涯雅张路张丽王斌曹文静; 关键词：白血病 ALLO-HSCT 实时定量RT-PCR SYBR

IDO激活剂治疗再生障碍性贫血的实验研究: 2008年; 目的探讨IDO参与再生障碍性贫血(Aplastic Anemia,AA)的免疫系统异常活化的发病机制,观察IDO特异性激活剂——3,4-DAA治疗再障的疗效。方法建立免疫介导的再障小鼠模型,用反向高效液相色谱法检测色氨酸(Trp)和其代谢产物犬尿氨酸(Kyn)的血清水平,用RT-PCR方法检测骨髓单个核细胞IDO mRNA的表达水平,探讨IDO在疾病进程中的异常表现;给予3,4-DAA治疗后检测相应指标的变化。结果模型小鼠Trp浓度明显低于正常小鼠,Kyn浓度明显高于正常小鼠(P<0.05),模型小鼠的单个核细胞IDO mRNA表达水平较正常小鼠高(P<0.05);给予3,4-DAA治疗后上述指标差异更具统计学意义(P<0.01)。结论在再障发病过程中,色氨酸限速酶IDO的表达水平和活性均较正常明显增高,促进色氨酸向犬尿氨酸转化,色氨酸的不足导致细胞内的"色氨酸饥饿状态"从而抑制T细胞的活化和增殖,是机体免疫系统自我调节的一种重要保护机制,IDO激活剂理论上是一种治疗再障的新策略。; 戴敏黄丽芳周琨孙汉英刘文励; 关键词：再生障碍性贫血高效液相色谱色氨酸犬尿氨酸

负载慢性髓系白血病28的树突状细胞介导的抗淋巴细胞白血病效应: 2008年; 目的构建慢性髓系白血病（CML）28的树突状细胞（DC）核酸疫苗，观察其对淋巴细胞白血病的抗肿瘤效应。方法从pcDNA3．1HisA—CML28中克隆出6×His及CML28的cDNA全长，酶切后连接至真核表达载体pIRES2-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）；从健康人外周血中分离外周血单个核细胞（PBMC），在白介素4（IL4）和粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）条件下诱导分化为DC；用电穿孔法将重组质粒pIRES2-EGFP—CML28导入DC，Westernblot检测His—CML28融合蛋白的表达，荧光显微镜检测EGFP的表达；用表达CML28的DC刺激同基因型淋巴细胞作为效应细胞，淋巴细胞白血病患者的PBMC作为靶细胞，以乳酸脱氢酶（LDH）释放实验测定其抗肿瘤效应。结果重组质粒pIRES2-EGFP—CML28导入DC后，能正确表达His—CML28融合蛋白及EGFP。经表达CML28的DC刺激的同基因型淋巴细胞能特异性杀伤淋巴细胞白血病患者的PBMC，杀伤率为68.3％，明显高于空白对照组（25．8％）和阴性对照组（20．7％），差异有统计学意义（P〈0．01）；而对健康人PBMC的杀伤活性较弱，杀伤率为20．5％。结论CML28能诱导特异性的细胞免疫，负载CML28的DC疫苗在体外对淋巴细胞白血病具有显著的抗肿瘤效应。; 张路张东华周红升汪涯雅戴敏张丽; 关键词：树突状细胞核酸疫苗

细胞因子信号传导抑制蛋白-1(SOCS-1)研究进展被引量：11: 2007年; 细胞因子信号传导抑制蛋白(suppressor of cytokine signaling,SOCS)家族是一类由细胞产生并反馈性阻断细胞因子信号转导过程的负性调节因子,最先发现的是SOCS-1。SOCS-1可抑制IL-6、LIF、OSM、INF-γ以及GH等多种细胞因子的信号转导,对体内多种免疫反应的激活起调控作用。SOCS-1异常表达与多种疾病的发病相关,在急慢性白血病、类风湿性关节炎、肝硬化和肝癌的发病中起重要作用。本文就SOCS-1与细胞因子的关系及其临床研究进展进行综述。; 杨海平戴敏张东华; 关键词：细胞因子高甲基化信号转导白血病

再生障碍性贫血中色氨酸和犬尿氨酸的检测方法及意义被引量：1: 2008年; 目的:建立检测再生障碍性贫血(aplastic anemia,简称再障)血清中色氨酸(Trp)及其代谢产物犬尿氨酸(Kyn)水平的方法,探讨其与疾病之间的关系。方法:应用反向高效液相色谱法检测,以荧光检测器检测Trp,以紫外检测器检测Kyn的血清水平。结果:再障患者血清Trp浓度明显低于正常对照,Kyn浓度明显高于正常对照(P<0.05);再障动物模型结果与患者血清结果相同。结论:再障中吸哚胺-2,3-双加氧酶的活性较正常明显增高,促进色氨酸向犬尿氨酸转化,造成细胞内的"色氨酸饥饿状态"从而抑制T细胞的活化和增殖,可能是机体的一种自我保护机制。; 戴敏周琨黄丽芳孙汉英刘文励; 关键词：贫血高效液相色谱法色氨酸犬尿氨酸

实时定量RT-PCR监测造血干细胞移植前后CML28mRNA表达: ＜正＞CML28是新近从慢性髓系白血病病例中筛选出来的肿瘤相关抗原,其分子量大小为28kD,在血液肿瘤及多种实体瘤中呈高表达,在除睾丸之外的正常组织中不表达或表达水平极低,因此 CML28有可能成为肿瘤治疗新的靶抗原;研...; 张东华戴敏周红升汪涯雅张路张丽; 文献传递

色氨酸代谢在再生障碍性贫血中的实验研究被引量：1: 2007年; 目的探讨色氨酸代谢参与再生障碍性贫血（Aplastic Anemia，AA）的免疫系统异常活化的发病机制。方法建立免疫介导骨髓衰竭模型，用反向高效液相色谱法检测色氨酸（Trp）和其代谢产物犬尿氨酸（Kyn）的血清水平，以及Trp的限速酶——吲哚胺双加氧酶（IDO）活性，用RT—PCR方法检测骨髓单个核细胞IDOmRNA的表达水平，探讨色氨酸在疾病进程中的异常表现。结果模型小鼠Trp浓度明显低于正常小鼠（P〈0．05），模型小鼠IDO活性明显高于正常小鼠（P〈0.05），模型小鼠的单个核细胞IDOmRNA表达水平较正常小鼠高（P〈0．05）。结论免疫介导骨髓衰竭模型小鼠的色氨酸限速酶IDO的表达水平和活性均较正常小鼠高，免疫系统的异常活化导致必需氨基酸色氨酸的不足。; 周琨孙汉英戴敏徐惠珍刘文励; 关键词：获得性再生障碍性贫血色氨酸

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戴敏

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