布赫
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院实验动物研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 大鼠原始生殖细胞的分离培养被引量：2
- 1998年
- 以不同日龄的大鼠胎仔为材料，对其生殖巢进行解剖分离，并作形态观察．结果发现随着日龄的增加，生殖巢由长变短，由薄增厚，并在１４．５ｄ的生殖巢上发现了明显的性分化．对不同日龄的生殖巢用ＥＤＴＡ－Ｔｒｙｐｓｉｎ在３７℃下进行解离，可以得到原始生殖细胞（ＰＧＣｓ），较早日龄的ＰＧＣｓ形态较不规则，有大量的伪足伸出，运动能力较强．随着日龄的增大，ＰＧＣｓ的形态有所变化，椭圆形、圆形居多，并且运动能力亦有所下降．ＰＧＣｓ的体积比一般的体细胞大，细胞核多为圆形，体积硕大，有多个核仁．将消化液处理后的产物进行培养，ＰＧＣｓ一般能在含血清的ＤＭＥＭ培养液中悬浮生存一周左右，在此期间也有部分ＰＧＣｓ发生皱缩死亡，大量的体细胞在皿底成纤维化，血细胞逐渐死亡．
- 布赫邵华徐营旭日干张锁链
- 关键词：原始生殖细胞细胞培养
- 绵羊卵泡成分对卵母细胞体外减数分裂调控的研究被引量：4
- 2003年
- 哺乳动物卵巢中的卵母细胞一直处于减数分裂的停滞状态,卵泡内各成分被认为是产生抑制因子的主要来源。本研究以绵羊卵泡各成分为研究对象,用共培养的方法对卵丘细胞、颗粒细胞、膜细胞在卵母细胞体外减数分裂过程中的作用加以探讨。结果表明:1.卵泡整体及卵泡分泌物在体外可以有效地维持减数分裂停滞,经过24h培养,这两个处理组中,处于GV期的卵母细胞分别为69.6％和49.1％。经抑制处理后的卵母细胞脱离抑制环境后可以继发成熟,MⅡ比率可达88.9％。去掉卵丘细胞的裸卵其减数分裂过程不能被卵泡分泌物有效抑制,24h培养后其GV期比例为17.8％。以上结果说明卵泡中的抑制因子主要是通过卵丘细胞来发挥其调控作用的。2.用颗粒细胞与卵母细胞共培养,结果发现具有颗粒细胞卵丘细胞缝隙连接的卵母细胞(COCs)在培养24小时后47.4％达到MⅡ,与在不具有细胞连接的悬浮颗粒细胞中共培养的卵母细胞之间存在无显著差异,无论是紧密连接的颗粒细胞层还是悬浮在培养液中的颗粒细胞都不能有效抑制生发泡破裂(GVBD)的发生,只能将卵母细胞抑制在MⅡ以前的各个时期。以上结果说明颗粒细胞在体外分泌抑制因子的活力大大下降。3.卵泡膜细胞具有分泌抑制成熟分裂因子的能力,与膜细胞层共培养的卵母细胞在8h和24h时。
- 布赫旭日干
- 关键词：绵羊卵母细胞颗粒细胞膜细胞体外共培养
- 精子载体法制作转基因动物的可行性
- 2003年
- 精子载体法转基因由于具有简便易行、对卵原核无损伤等特点,而成为最具诱惑力的转基因方法之一。近年来,已经通过该方法获得了多种转基因动物,从而对精子载体法制作转基因动物的可行性提供了证据。笔者对精子载体法的可行性、机制、提高转基因效率等方面作了简要综述。
- 白春玲布赫
- 关键词：精子载体法转基因动物
- 牛冷冻试管胚胎性别鉴定的应用被引量：12
- 2002年
- 利用双引物PCR技术对优质良种牛体外受精的冷冻胚胎进行性别鉴定 ,并对分割后的半胚分别进行PCR扩增和染色体分析 ,两种方法的判定结果相吻合。在本实验条件下 ,利用减少PCR体系中细胞的数量来确立最低的模板DNA的检出量 ,2 细胞不能检测 ,4 细胞检出率为 6 2 .5 % ,8 细胞为 90 % ,1 6 细胞以上为 1 0 0 %。对 2 3枚经过性别鉴定后的胚胎进行移植 ,获得 5头纯种试管牛 ,产犊率为 2 1 7% ,与正常的胚胎移植结果 2 7 3% ( 3 1 1 )无显著差异 ,预测性比为 1 0 0 %符合。
- 张锁链布赫仓明旭日干
- 关键词：体外受精PCR胚胎性别鉴定
- 绵羊卵泡液和次黄嘌呤对卵母细胞体外减数分裂的影响被引量：1
- 2002年
- 目的 利用在培养液中添加绵羊卵泡液和次黄嘌呤 ,抑制卵母细胞GVBD发生 ,延长转录活性 ,从而使卵母细胞真正成熟 ,提高胚胎质量及生产效率。方法 利用体外成熟技术对有屠宰采集的绵羊卵母细胞进行培养 ,培养液中添加卵泡液及次黄嘌呤 ,检查成熟效果。结果 将卵母细胞培养在 5 0 %和 10 0 %的卵泡液中 ,2 4h后处于GV期的卵母细胞分别为 19% (8 4 2 )和 33 3% (13 39)。在含有 4mmol L次黄嘌呤的培养液中 ,2 4h后有2 1 6 % (16 74 )的卵母细胞处GV期 ,而对照组中只有 6 % (3 5 0 ) ,经过次黄嘌呤处理的卵母细胞多数都停滞于PⅠ期(44 6 % ,33 74 )。在 4mmol L次黄嘌呤培养液中添加FSH并未使受到抑制的卵母细胞诱导成熟。结论 卵泡液和次黄嘌呤只能在有限的程度上抑制减数分裂的重新启动 ,并对减数分裂的全过程都有影响 ,这种影响程度与抑制因子的浓度相关 ,存在明显的剂量效应。
- 布赫王建国旭日干
- 关键词：次黄嘌呤卵母细胞
- 以精子载体法制备转基因小鼠的初步研究
- 2001年
- 将外源融合基因 BαLA-HI与 DOSPER脂质体等比例混合 ,加入获能精子悬液中 ,37℃、5% CO2 共培养 0 .5h.以这种处理精子作为转基因载体进行小鼠的体外受精及胚胎移植 .在获得的 4 0只移植后代中 ,经 PCR特异片段扩增和 Southern杂交 ,共检测出 2只呈阳性的转基因小鼠 .证明人胰岛素基因已在小鼠染色体上实现了整合 .基因整合率为 5% .
- 郭旭东森布尔布赫杨东山旭日干
- 关键词：精子脂质体转基因载体转基因小鼠
