孙志鹏
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 供职机构：大连海洋大学更多>>
- 发文基金：海洋公益性行业科研专项辽宁省海洋与渔业厅资助项目辽宁省海洋与渔业厅科研计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学经济管理更多>>
- 真鲷虹彩病毒辽宁株跨膜蛋白(ORF049L)基因的克隆及表达被引量：5
- 2013年
- 克隆了真鲷虹彩病毒辽宁株(RSIV-LN09)跨膜蛋白(ORF049L)基因,利用生物信息学方法,对该基因编码蛋白的跨膜区及B细胞抗原位点等特征进行了分析。随后将该序列连接至pET-28a表达载体中,成功构建了pET-28a-ORF049L原核表达质粒。将表达质粒转化至BL21(DE3)菌株后,经IPTG诱导获得大量携带组氨酸标签的融合蛋白。该融合蛋白经变性后采用镍层析柱进行亲和纯化,纯化蛋白再经SDS-PAGE和Western blot分析,确认获得了相对分子质量约为17 000的高纯度重组蛋白His-049L。本研究结果为病毒跨膜蛋白单克隆抗体的制备及其功能研究奠定了基础。
- 孙志鹏徐祥李强叶仕根李华
- 关键词：虹彩病毒跨膜蛋白原核表达
- 辽宁株虹彩病毒跨膜蛋白(ORF049L)的表达、纯化及生物信息学分析
- 虹彩病毒是近年来导致许多种鱼类感染严重的、全身性疾病的主要病原体。病毒的跨膜蛋白是细胞识别的重要抗原表位，其在疾病的免疫学研究上具有重要作用。本文克隆了辽宁株虹彩病毒跨膜蛋白ORF049L的基因序列，并对其编码蛋白的跨膜...
- 孙志鹏李强叶仕根李华
- 关键词：虹彩病毒跨膜蛋白生物信息学分析原核表达
- 条石鲷检出的虹彩病毒特性研究被引量：12
- 2011年
- 2009年8月份辽宁地区某网箱养殖场出现条石鲷大量死亡病情,对病鱼组织切片观察,在脾脏和肾脏等器官内发现许多形态异常肿大的嗜碱性粒细胞。病鱼组织匀浆液感染GF细胞出现了明显的细胞病变效应（CPE）。经透射电镜观察发现,脾脏、肾脏、肝脏及肠组织细胞质内存在大量呈六边形的病毒粒子,该病毒由核衣壳（100110nm）和囊膜构成,直径150180nm,似虹彩病毒。使用真鲷虹彩病毒（RSIV）959bp PstI片段特异性引物对病鱼各脏器组织进行PCR扩增,在脾脏、肾脏、鳃、肠、心脏和脑扩增出570bp大小的目的片段。同时,针对虹彩病毒主衣壳蛋白序列进行PCR扩增后得到1 400 bp大小的基因片段。病毒主衣壳蛋白序列系统进化分析显示,该病毒与真鲷虹彩病毒（RSIV-U1）等几株病毒位于同一进化分枝内。根据上述实验结果,作者认为引发条石鲷大批死亡的病原为真鲷虹彩病毒（Red sea bream iridovirus,RSIV）。
- 李华孙志鹏李强江育林
- 关键词：条石鲷虹彩病毒
- 长海县休闲渔业发展现状研究
- 孙志鹏
