姜秀丽
- 作品数：12 被引量：38H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 7型腺病毒疫苗株序列测定及其六邻体特性分析被引量：4
- 2003年
- 目的 完成7型腺病毒疫苗株(Ad7v)的全序列测定并阐明其六邻体特征。方法 克隆Ad7v基因组17.5-68.0 mu片段,应用Sanger双脱氧法进行DNA序列测定,将编码六邻体蛋白的核苷酸序列输入GenBank数据库中,获得录入号为AF515814。用CLUSTAL.V软件比较Ad7v与其他亚组及同一亚组腺病毒的六邻体蛋白的同源性,分析其抗原性的差异,同时用RasMo12.71软件预测Ad7v六邻体三维结构。结果Ad7v 17.5-68.0 mu由17 596个碱基组成。这段基因r链主要编码晚期基因L1、L2和L3,L链编码E2的一部分。六邻体编码多肽位于L3区,由934个氨基酸残基组成,与其他9个已知的六邻体蛋白序列进行多序列同源性比较,发现Ad7疫苗株与其他亚组腺病毒的同源性为86.8％(Ad4)-78.5％(Ad5)。在同一亚组中,Ad7疫苗株与Ad3同源性最高,高达95.1％。可变序列主要集中在7个高变区(HVRs),根据Ad2六邻体三维结构模型预测Ad7六邻体三维结构,发现可变区大部分位于六邻体顶端的Ⅰ1和Ⅰ2环中。结论 完成了Ad7v的全序列分析,其六邻体序列与Ad5、Ad2等其他亚组病毒有很大差异,这一结果为构建新型腺病毒载体打下了基础。
- 姜秀丽王健伟温乐英石长信洪涛
- 关键词：基因治疗DNA序列氨基酸
- 轮状病毒组特异性抗原VP6在重组腺病毒中的表达及其免疫学效果的研究被引量：14
- 2002年
- 目的 构建可表达A组轮状病毒组特异性抗原VP6的非复制型重组腺病毒载体 ,并对其生物学和免疫学性质进行研究。方法 将人轮状病毒VP6基因插入腺病毒载体pShuttle CMV中 ,通过细菌内同源重组方法获得重组腺病毒DNA ,将其转染 2 93细胞获得重组腺病毒。用聚合酶链反应 (PCR)及Southernblot方法 ,检测目的基因在重组腺病毒中的整合 ,用Westernblot检测VP6的表达。通过灌胃和滴鼻两种途径对小鼠进行免疫 ,并对免疫后小鼠体液和粘膜免疫进行分析。结果 得到了重组腺病毒rvAd VP6 ,VP6基因整合于腺病毒基因组中 ,在 2 93细胞中可稳定表达。 2次免疫后灌胃和滴鼻两组小鼠均产生明显免疫应答 ,血清IgG抗体滴度分别为 1∶1 0 0 0和 1∶1 0 0 0 0～ 1∶1 0 0 0 0 0。除了血清IgG外 ,小鼠还产生了较强的针对轮状病毒的血清IgA ,滴度为 1∶1 0～ 1∶1 0 0。滴鼻组在肺灌洗液和肠匀浆液中均可检测到分泌型IgA(sIgA) ,灌胃组仅在肠道检测到sIgA。滴鼻组的免疫学效果明显优于灌胃组。结论 人轮状病毒VP6基因重组腺病毒载体的成功构建及所取得的良好免疫学效果 。
- 何金生王健伟姜秀丽王大燕温乐英董京芳屈建国洪涛
- 关键词：重组腺病毒VP6基因病毒抗原
- 1株表达人轮状病毒VP7的重组腺病毒的生物学特性鉴定被引量：2
- 2002年
- 目的 对表达轮状病毒VP7基因的 1株重组腺病毒rvAdG1VP7(G)的生物学特性进行鉴定 ,为进一步免疫学研究打下基础。方法 用rvAdG1VP7(G)感染 2 93细胞 ,并分别应用电子显微镜技术以及Southernblot、PCR、RT PCR和Westernblot等分子生物学方法了解rvAdG1VP7(G)的形态、VP7基因整合、遗传稳定性、VP7基因在细胞内转录及表达等有关生物学特性。结果 电子显微镜观察表明 :rvAdG1VP7(G)具有典型的腺病毒形态 ;Southernblot、PCR、RT PCR和Westernblot等分子生物学方法分析显示 :rvAdG1VP7(G)中确有特异性的VP7基因稳定整合 ,有较好的遗传稳定性 ,感染 2 93细胞后能有效转录 ,可表达轮状病毒主要结构蛋白VP7。结论 rvAdG1VP7(G)具有良好的生物学性质 ,为进行体内实验研究提供了必要条件。
- 何金生王健伟温乐英屈建国姜秀丽董京芳洪涛
- 关键词：重组腺病毒生物学特性遗传学
- 复制缺陷型重组腺病毒rvAdG1VP7免疫学效果的研究被引量：6
- 2002年
- 目的 对 1株可表达A组轮状病毒主要结构抗原VP7的重组腺病毒rvAdG1VP7的体内免疫学效果进行研究。方法 通过灌胃和滴鼻 2种途径对BALB/c小鼠进行免疫 ,并对免疫后小鼠体液和黏膜免疫进行分析。结果 初次免疫后 ,2组小鼠均有应答 ,但血清IgG抗体滴度及阳转率不同。再次免疫后 ,显示出明显的加强效果。除了血清IgG外 ,小鼠还产生了较强的针对轮状病毒的血清IgA。滴鼻组在肺灌洗液和肠匀浆液中均可检测到SIgA ,灌胃组仅在肠道检测到SIgA。滴鼻组的免疫学效果明显优于灌胃组。对滴鼻组小鼠肺灌洗液IgG/SIgA的阳转率进行了比较 ,发现IgG的应答水平明显高于SIgA。免疫后小鼠血清中IgG的动态观察表明 ,抗体可长期持续至少半年以上。 结论 重组腺病毒载体rvAdG1VP7所取得的良好免疫学效果 ,为我国具有自主知识产权的新型轮状病毒基因工程疫苗的进一步研制奠定了基础。
- 何金生王健伟姜秀丽王大燕温乐英董京芳屈建国洪涛
- 关键词：缺陷型重组腺病毒轮状病毒属遗传学VP7基因
- 小鼠轮状病毒EW株VP7基因的克隆及其在重组腺病毒中的表达
- 2003年
- 目的:构建表达小鼠轮状病毒(EDIM)EW株VP7基因的重组腺病毒,以在小鼠模型上研究轮状病毒的免疫保护机制。方法:用RT-PCR方法扩增EDIMVP7全长cDNA并进行基因序列分析,将所得的VP7基因片段插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,获得重组质粒pShuttleCMV-EVP7,将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183获得重组腺病毒质粒pAdCMV-EVP7,将该质粒线性化后转染293细胞包装重组腺病毒rvAdEVP7。以rvAdEVP7感染293细胞,并分别应用电子显微镜、PCR、RT-PCR和Westernblot等方法观察rvAdEVP7的形态、VP7基因整合、遗传稳定性、VP7基因在细胞内转录及表达等有关生物学特性。结果:获得了小鼠轮状病毒的全长cDNA,重组腺病毒rvAdEVP7具有典型的腺病毒形态,PCR、RT-PCR和Westernblot等分子生物学方法分析显示:rvAdEVP7中确有特异性的VP7基因稳定整合;有较好的遗传稳定性;感染293细胞后能有效转录;可表达轮状病毒主要结构蛋白VP7。结论:成功构建含VP7基因的重组腺病毒rvAdEVP7,为进一步研究轮状病毒的免疫保护机制打下了基础。
- 李勇王健伟屈建国于修平王大燕姜秀丽洪涛
- 关键词：重组腺病毒轮状病毒VP7基因克隆
- 人轮状病毒非复制型重组腺病毒粘膜免疫效果的研究
- 我们在用非复制型腺病毒载体成功制备含有人轮状病毒VP7、VP6基因重组腺病毒的基础上,利用小鼠为实验模型,通过灌胃和滴鼻两种免疫途径对其粘膜免疫的效果进行了研究。为较全面了解非复制型重组腺病毒免疫小鼠后,粘膜免疫产生的情...
- 何金生王健伟姜秀丽王大燕温乐英董京芳屈建国洪涛
- 文献传递
- NK4基因在重组腺病毒中的表达与初步鉴定被引量：4
- 2003年
- 目的 构建含有肝细胞生长因子 (HGF)NK4基因的重组腺病毒载体 ,为应用HGF/NK4进行肿瘤基因治疗奠定实验基础。方法 应用AdEasy腺病毒载体系统 ,将PCR扩增所得的NK4基因片段与穿梭质粒pShuttle CMV进行连接 ,获得重组质粒pShuttle CMV NK4 ,将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共转化大肠杆菌BJ5 183获得重组腺病毒质粒pAdCMV NK4 ,用该质粒转染 2 93细胞包装产生出重组腺病毒rvAdCMV NK4。重组腺病毒分别经电子显微镜技术及RT PCR、WesternBlot等方法进行鉴定。结果 得到含有NK4基因的重组腺病毒rvAdCMV NK4 ,电子显微镜下可见典型腺病毒颗粒形态 ,RT PCR及WesternBlot分析显示rvAdCMV NK4感染 2 93细胞后NK4基因可有效转录并表达。结论 成功构建出含有NK4基因的重组腺病毒rvAdCMV NK4 ,为下一步开展关于NK4基因的肿瘤治疗提供了基础。
- 介建政王健伟王巍姜秀丽魏强洪涛
- 关键词：NK4基因重组腺病毒腺病毒载体肝细胞生长因子肿瘤基因治疗
- 人轮状病毒G2和G3型主要中和抗原VP7基因在重组腺病毒中的表达被引量：6
- 2004年
- 目的 研究我国G2和G3型轮状病毒主要中和抗原VP7基因在重组腺病毒中的表达。方法 在前期成功表达G1型VP7的基础上 ,选用我国G2和G3型主要流行株 97S4 3和 97S4 8VP7基因 ,用非复制型腺病毒载体对上述基因进行表达。结果 获得了表达我国G2型和G3型人轮状病毒流行株VP7基因的非复制型重组腺病毒rvAdG2VP7和rvAdG3VP7,应用PCR及Southernblot技术证实在重组腺病毒中整合有轮状病毒G2型VP7和G3型VP7基因 ,RT PCR证明重组腺病毒在感染的 2 93细胞内均能有效地转录插入基因 ,Westernblot检测到轮状病毒VP7基因的表达。结论 这一工作为进一步进行动物实验 ,发展多价轮状病毒疫苗打下了基础。
- 魏强姜秀丽王健伟洪涛
- 关键词：VP7基因重组腺病毒基因表达
- 病毒裂癌:肿瘤生物治疗研究的新热点被引量：4
- 2003年
- 姜秀丽王健伟洪涛
- 关键词：腺病毒呼肠孤病毒单纯疱疹病毒
- 表达人轮状病毒VP7基因重组腺病毒的免疫效果研究
- 由于A组轮状病毒血清型众多,疫苗研究的实践表明,包含中和性抗原的多价疫苗的效果要好于单价疫苗.我们对中国A组轮状病毒感染状况的调查结果显示,绝大部分为G1型(89.5﹪)感染,少数为G2和G3型(6.1﹪,2.8﹪)感染...
- 姜秀丽
- 关键词：轮状病毒重组腺病毒婴幼儿腹泻
- 文献传递
