周波
- 作品数：8 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所更多>>
- 发文基金：科技部科研院所社会公益研究专项天津市自然科学基金协和青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 用于蛋白检测的生物条码技术与方法的研究
- 目前癌症是发达国家和大多数发展中国家一个主要的健康问题。每年约有1200万人诊断为肿瘤，其中近800万人死亡。肿瘤治疗的重点在于及早明确诊断，而诊断的关键在于肿瘤在其早期就可被发现与诊断。早期肿瘤的治疗效果要明显优于中晚...
- 周波
- 关键词：分子信标基因芯片磁性微球纳米金
- 文献传递
- 生物载体与生物大分子对分子信标探针应用的影响
- 目的明确实验研究中常用的某些物质对分子信标(molecular beacons,MB)探针的结构稳定性及杂交前后荧光强度的影响,初步了解影响与作用的程度,从而尽可能规范MB探针的杂交反应条件,减少或避免误差或偏差,有效提...
- 周波王海燕刘珍宝楼莎朱敦皖张海玲宋丽萍冷希岗
- 文献传递
- 应用生物条码与基因芯片检测蛋白浓度的方法
- 本发明公开了应用生物条码与基因芯片检测蛋白浓度的方法，步骤：(1)分别设计合成基因芯片用探针和扫描用生物条码；(2)用待测蛋白抗原的单克隆抗体修饰磁性微球；(3)用待测蛋白抗原的多克隆抗体与扫描用生物条码标记纳米金；(4...
- 冷希岗周波宋丽萍朱敦皖吕丰刘兰霞董霞张海玲
- 文献传递
- 多壁碳纳米管及其修饰物细胞毒性机制的考察
- 目的近年来,碳纳米管应用于药物、疫苗和基因转运等方面的研究日益引起人们广泛的关注,但功能化的碳纳米管是否会对机体产生不利影响尚存在争议。碳纳米管能在肝脏与脾脏中大量积累,目前用人正常肝细胞评价多壁碳纳米管细胞毒性还未见报...
- 刘珍宝周波王海燕张海玲刘兰霞朱敦皖宋丽萍冷希岗
- 文献传递
- 功能化多壁碳纳米管对L02细胞的作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨羧基化及羟基化多壁碳纳米管对肝细胞的毒性及相关机制。方法利用透射电镜、扫描电镜、X-射线光电子能谱仪对原始多壁碳纳米管、羧基化多壁碳纳米管和羟基化多壁碳纳米管进行表征。将浓度分别为12.5、25、50、100、200μg/ml的3种碳纳米管分别与人正常肝细胞系L02细胞共育24、48、72h。采用水溶性四氮唑法进行细胞毒性评价,用2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐法检测细胞内活性氧(ROS)的生成。结果透射电镜显示3种碳纳米管平均管径均为10～20nm,长度均为10～30μm;扫描电镜显示碳纳米管形貌相似;X-射线光电子能谱仪分析显示功能化多壁碳纳米管分别在289和286ev处特征峰峰值明显增高。水溶性四氮唑法检测显示碳纳米管的细胞毒性作用呈现浓度依赖性并与作用时间具有一定关系。羧基化多壁碳纳米管比原始多壁碳纳米管及羟基化多壁碳纳米管的细胞毒性小。诱导细胞内ROS升高的次序为原始多壁碳纳米管>羧基化多壁碳纳米管>羟基化多壁碳纳米管;碳纳米管诱导细胞内活性氧含量与共育时间有关:碳纳米管与细胞作用36h以内时,细胞内ROS含量随时间逐渐增加,36h后细胞内ROS含量随作用时间延长逐渐降低。结论羧基化多壁碳纳米管比原始多壁碳纳米管在低浓度时具有更好的生物相容性,羟基化多壁碳纳米管比原始多壁碳纳米管在48h后表现出稍好的生物相容性。不同化学表面性质的碳纳米管对细胞活力的影响不同,其与细胞的相互作用可能存在不同机制。
- 刘珍宝周波王海燕张海玲刘兰霞朱敦皖冷希岗
- 关键词：多壁碳纳米管化学修饰细胞毒性
- 应用纳米与分子探针技术对IgG抗原水平的检测
- 本实验主要应用纳米技术并结合分子探针技术对低浓度的抗原水平进行检测.通过标记单抗的磁性微球捕获、富集待测抗原,修饰多抗与亲和素的纳米金并结合分子信标探针则起到信号扩增的作用.通过二硫键(-S-S-)分子信标探针茎部3&#...
- 周波王海燕楼莎刘珍宝朱敦皖冷希岗
- 关键词：分子探针技术分子信标
- 双顺反子表达人组织因子途径抑制因子和绿色荧光蛋白重组病毒的构建及其在内皮祖细胞中表达被引量：1
- 2010年
- 目的 构建双顺反子表达人组织因子途径抑制因子（TFPI）与绿色荧光蛋白（GFP）的逆转录病毒表达载体pMSCV-TFPI-IRES-GFP,并观察其在大鼠内皮祖细胞（EPCs）中的表达,为进一步研究TEPI在预防血管再狭窄中的作用奠定基础.方法 将人全长TFPI cDNA亚克隆到逆转录病毒载体pMSCV-IRES-GFP中,获得定向插入重组子pMSCV-TFPI-IRES-GFP,采用酶切图谱分析和测序进行鉴定.用磷酸钙法经293T细胞包装,收集病毒上清,感染EPCs.用荧光显微镜和流式细胞术观察感染后细胞内GFP表达情况.RT-PCR检测EPCs中TFPI mRNA的表达水平,ELISA法检测EPCs细胞培养上清中TFPI蛋白的含量.结果 经限制性内切酶酶切图谱分析证实重组病毒中含有人TFPI的cDNA片段,基因测序结果与Genebank中TFPI cDNA序列相符.荧光显微镜观察及流式细胞仪检测显示,90%以上的感染细胞中存在GFP表达;RT-PCR分析显示,重组病毒感染细胞中TFPI mRNA水平明显增高;ELISA法检测发现,感染重组病毒的EPCs培养上清中有TFPI蛋白表达.结论 本研究成功构建重组pMSCV-TFPI-IRES-GFP真核表达载体,其在EPCs中能够同时表达TFPI和GFP,为TFPI基因结合血管内皮祖细胞进行血管再狭窄防治研究的进一步深入开展奠定了良好实验基础.
- 王海燕宋丽萍朱敦皖周波刘珍宝楼莎冷希岗
- 关键词：内皮祖细胞逆转录病毒载体组织因子途径抑制因子
- 应用纳米与分子探针技术对IgG抗原水平的检测
- 2009年
- 人们研究并逐步认识了纳米金与DNA等相互作用的特性和条件,并对以纳米金为基础发展起来的生物条码技术进行了更加深入的研究与应用。基于纳米金的生物条码及其相关技术研究与应用日益广泛,并不断有创新,本研究应用纳米技术并结合分子探针技术对低浓度的抗原水平进行检测。该生物条码技术常被用于检测某些蛋白、核酸、细胞或细胞因子的水平,并由此形成了不同于PCR、ELISA但仍具有高灵敏度特性的检测方法。通过磁性微球标记单抗以捕获、富集待测抗原,修饰多抗与亲和素的纳米金并结合分子信标探针起到信号扩增的作用。通过二硫键(—S—S—)分子信标探针茎部3’端的碱基T连接一生物素分子。待测抗原可将磁球与纳米金系统进行连接,然后应用二硫苏糖醇(DTT)将连接于纳米金上的MB切割下来,并与其环部完全互补配对的靶序列杂交后测定荧光强度。荧光强度与待测抗原水平(含量)相关。
- 周波王海燕楼莎刘珍宝朱敦皖冷希岗
- 关键词：分子探针磁性微球分子信标生物素
