周星
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 富血小板血浆诱导犬骨髓间充质干细胞的体外成骨被引量：1
- 2009年
- 背景:富血小板血浆中含有大量骨再生所需的生长因子,且各生长因子的比例是机体自身形成的,具有良好的协同作用。目的:探讨富血小板血浆体外诱导犬骨髓间充质干细胞成骨的效果。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-06/2008-02在中南大学湘雅医院中心实验室完成。材料:健康12月龄雄性比格犬,由中南大学湘雅医学院实验动物部提供。方法:收集第3代犬骨髓间充质干细胞,分为4组:对照组加入标准培养基;成骨诱导培养基组向培养板孔内加入含胎牛血清、地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C的高糖DMEM培养基;富血小板血浆组根据预实验结果,向培养板内加入含体积分数为6.25%富血小板血浆的低糖DMEM培养基;联合组向培养板内加入含地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C、体积分数为6.25%富血小板血浆的高糖DMEM培养基。主要观察指标:细胞内碱性磷酸酶活性,免疫细胞化学染色检测Ⅰ型胶原的表达,改进Von Kossa染色标记钙结节形成情况,RT-PCR检测诱导后骨钙素mRNA的表达。结果:各组碱性磷酸酶活性均随诱导时间的延长而逐渐增高,联合组升高幅度最为明显(P<0.05)。诱导7,14d后,成骨诱导培养基组、联合组Ⅰ型胶原均呈阳性表达,富血小板血浆组、对照组Ⅰ型胶原始终呈阴性表达。诱导14d后,成骨诱导培养基组、联合组可见卵圆形钙结节。诱导7,14d后,对照组与富血小板血浆组之间骨钙素mRNA表达水平无明显差异(P>0.05),此2组骨钙素mRNA表达水平均明显低于成骨诱导培养基组、联合组(P<0.05);成骨诱导培养基组骨钙素mRNA表达水平明显低于联合组(P<0.05)。结论:经成骨条件培养基诱导培养的骨髓基质干细胞,富血小板血浆能在体外显著诱导其成骨指标的表达。
- 尹科廖前德钟达卢吉平周星翁晓军严安
- 关键词：富血小板血浆骨髓基质干细胞体外诱导成骨
- 不同体积分数富血小板血浆对犬骨髓间充质干细胞增殖的影响被引量：3
- 2009年
- 背景:间充质干细胞的增殖和分化与富血小板血浆中的血小板浓度密切相关,浓集倍数过小可能达不到应有效应,太大则对骨再生产生抑制作用。目的:观察不同体积分数的富血小板血浆对犬骨髓间充质干细胞增殖的影响。设计:细胞学体外观察。材料:健康12月龄雄性比格犬,由中南大学湘雅医学院实验动物部提供。方法:取生长良好的第5代犬骨髓间充质干细胞,调整细胞浓度至3×108L-1,以200μL/孔接种于96孔板,常规培养24h后,弃原培养液及未贴附的细胞。取制备好的富血小板血浆凝胶,加入含青霉素、链霉素的无血清低糖DMEM培养基分别稀释成5%,6.25%,7.5%,8.75%,10%共5个体积分数,向上述96孔板中每孔加入200μL,放入培养箱内,并设立空白对照。主要观察指标:MTT法观察不同体积分数富血小板血浆对犬骨髓间充质干细胞增殖活性的影响。结果:与空白对照组比较,干预早期各体积分数的富血小板血浆组均可促进犬骨髓间充质干细胞增殖。随干预时间的延长,体积分数为8.75%,10%富血小板血浆组在第6天增殖速度开始呈缓慢上升,进入平台期;体积分数为5%,6.25%富血小板血浆组细胞数量呈快速增殖,尤以体积分数为6.25%富血小板血浆组为甚。结论:富血小板血浆可在干预早期显著促进犬骨髓间充质干细胞增殖,其增殖强度与富血小板血浆体积分数相关,低体积分数条件下普遍取得较佳的增殖效应。
- 钟达廖前德卢吉平尹科周星严安翁晓军
- 关键词：富血小板血浆骨髓间充质干细胞细胞增殖
- 犬骨髓间充质干细胞的培养及生物学特性被引量：3
- 2010年
- 目的研究探讨犬骨髓间充质干细胞的分离、培养方法以及生长增殖特性。方法无菌技术抽取比格犬骨髓,密度梯度离心法获取细胞。加入含胎牛血清体积分数为0.1的低糖DMEM培养基中进行原代培养;待细胞生长至80%～90%融合时,1︰3传代培养。倒置显微镜观察细胞形态。MTT法测定3、5和10代细胞生长曲线。流式细胞仪检测第5代细胞的表面抗原分子。结果原代培养24h后看见微少贴壁细胞,初起为小圆形,3d后可见梭形类成纤维细胞呈漩涡样生长。10代以后细胞逐渐有宽大梭形样变,增殖逐渐减缓,偶有细胞飘零。流式细胞仪检测传5代细胞有96%表达CD44,95%表达CD29,而只有5%表达CD34。生长曲线显示,传3、5代骨髓间充质干细胞均有较强的增殖能力,其中传3代细胞更为明显,而传10代细胞的增殖能力较前有所减弱。结论犬骨髓间充质干分离提取操作简便易行,且有较强的生长增殖能力,能够长期培养,符合组织工程种子细胞的基本条件。
- 廖前德严安钟达尹科周星翁晓军卢吉平
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养生物学特性
