- 氟他胺尿道下裂模型小鼠的睾丸形态与功能变化
- 2012年
- 目的:采用雄激素受体拮抗剂氟他胺建立小鼠尿道下裂的动物模型,为进一步研究尿道下裂时小鼠睾丸组织形态及生精功能的变化提供理论及实验依据。方法:购7-8周龄BALB/c小鼠60只,体重20g,分成A、B、C、D 4组,每组10只。在母鼠孕第12-21天连续10d每天依次经皮下注射给予氟他胺0,30,60,90mg/kg。出生后5周观察有无尿道下裂与隐睾。测量肛门生殖器距离(AGD),并从每组取3只尿道下裂的雄性仔鼠解剖观察睾丸位置情况。并观察睾丸细胞形态变化及检测生精功能情况。结果:A-D组F1代小鼠尿道下裂发生率分别为0%,0%,30.77%,60.41%;隐睾发生率都为0%。睾丸组织细胞形态无明显变化,生精功能正常。结论:60mg/kg与90mg/kg的氟他胺能够诱导出F1代小鼠尿道下裂的动物模型,其睾丸细胞形态及生精功能变化不明显。
- 袁耀美张茨白晨周向军
- 关键词：尿道下裂氟他胺动物模型生精功能小鼠
- 经尿道1064nm超脉冲激光前列腺剜除术 治疗前列腺增生的近期疗效观察被引量：3
- 2021年
- 目的探讨1064 nm超脉冲激光经尿道前列腺剜除术治疗前列腺增生的安全性和临床疗效。方法2018年8月至2019年8月在我院泌尿外科住院的82例前列腺增生患者,前列腺体积(73±25)ml(41~159)ml,均行1064 nm超脉冲激光经尿道前列腺剜除术治疗。手术方法:在平精阜外左侧5点于外括约肌近侧处用镜鞘侧压裂开加镜鞘弧形逆推的方式找到前列腺外科包膜平面,用1064 nm超脉冲激光进行汽化切割和止血,采用整体剜除或者分叶剜除方法,将腺体标本推入膀胱腔,组织粉碎器粉碎腺体吸出体外。随访3个月。结果本组82例患者均顺利完成手术,剜除腺体时间(36±10)min(24~61 min),组织粉碎时间(11±6)min(5~51 min),切除腺体组织质量(60±21)g(31~124)g,手术时间(80±28)min(55~148 min),血红蛋白下降(17±8)g/L(3~34)g/L,无输血患者。术后留置导尿管时间(5.3±1.5)d。术后随访3个月,IPSS、QOL、Qmax、RUV均较术前明显改善(P<0.01)。拔出尿管后第1天7例患者出现暂时性尿失禁,经盆底肌锻炼1周后4例恢复控尿,2周后2例恢复,4周后全部恢复尿控,没有患者发生尿道狭窄及膀胱颈挛缩。结论1064 nm超脉冲激光具有良好的止血和组织汽化切割效果,经尿道前列腺剜除术能够有效地切除增生腺体,止血高效彻底,是一种安全有效的手术方式。
- 李浩勇李琦蒋焜宁金卓袁润李成龙周向军阮远饶婷余伟民程帆
- 关键词：前列腺增生ND:YAG激光经尿道前列腺剜除术
- 后腹腔镜下手术治疗巨大输尿管息肉一例报告被引量：1
- 2012年
- 2010年11月我院采用后腹腔镜手术治疗输尿管息肉患者1例，疗效满意，现报告如下。
- 周向军张茨钱辉军夏樾陕光
- 关键词：输尿管息肉手术治疗后腹腔镜疗效满意
- 茯苓酸对梗阻性肾积水间质纤维化的作用被引量：14
- 2014年
- 目的 探讨茯苓酸（PA）改善梗阻性肾积水后导致的肾间质纤维化的作用及其机制.方法 将28只C57雄性小鼠按照随机列表法分为4组：A组：假手术组;B组：模型组;C组：茯苓酸小剂量组;D组：茯苓酸大剂量组.建模及给药7d后,处死小鼠并取材,苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏病理损伤变化,天狼猩红染色检测间质胶原纤维的表达,免疫组织化学染色及实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测间质中胶原纤维蛋白-1（COI-1）、纤维粘连蛋白（FN）和平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,Western blot检测转化生长因子-β1（TGF-β1）,磷酸化Smad2/3（pSmad2/3）,基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达.结果 输尿管梗阻（UUO）小鼠给予茯苓酸治疗7d后,HE染色显示肾脏病理改变较对照组减轻.天狼猩红染色可见肾间质纤维化程度较对照组明显减轻,且大剂量组减轻更明显.免疫组织化学结果显示COI-1、FN、α-SMA在梗阻后表达明显升高,给予茯苓酸治疗可降低基质中COI-1、FN、α-SMA的表达.Real-time PCR结果显示,在模型组、小剂量茯苓酸组、大剂量茯苓酸组COI-1 mRNA水平相对表达量分别为4.20±1.42、2.30±0.76、1.70 ±0.70;FN在mRNA水平相对表达量分别为5.20 ±2.22、3.00±1.70、1.70±1.06;α-SMA在mRNA水平相对表达量分别4.60±1.23、2.30 ±0.98、1.40 ±0.70.给药组与模型组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot结果显示茯苓酸可下调TGF-β1、pSmad2/3、MMP-9的表达.结论茯苓酸可改善单侧肾积水导致的间质纤维化,可能是通过下调TGF-β1、pSmad2/3、MMP-9的表达来实现的.
- 王伟徐长庚周向军胡威周庞虎张杰
- 关键词：茯苓酸肾积水肾纤维化金属基质蛋白酶-9
- RNA结合蛋白FOX1对缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞氧化应激的影响
- 2022年
- 目的探究RNA结合蛋白FOX1(RBFOX1)在人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧(H/R)模型中对细胞氧化应激及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法构建HK-2细胞缺氧/复氧(缺氧16 h,复氧4 h)模型,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测RBFOX1的基因表达水平。将HK2细胞随机分为Control组、H/R组、H/R+NC组、H/R+RBFOX1组;Control组细胞正常培养,H/R+NC组和H/R+RBFOX1组分别转染对照质粒及RBFOX1过表达质粒后行缺氧/复氧处理。比色法检测各组细胞丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;流式细胞仪检测各组细胞中活性氧(ROS)的含量;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组RBFOX1、Nrf2、磷酸化Nrf2(p-Nrf2)及HO-1的蛋白表达水平。多组差异比较采用单因素方差分析,两两比较采用单样本t检验。结果RT-qPCR结果显示缺氧/复氧处理后的HK-2细胞RBFOX1基因的表达量低于Control组(0.357±0.022比1.000±0.000,t=28.979,P<0.01)。Western blot结果也显示H/R组的RBFOX1表达量低于Control组(0.515±0.038比0.734±0.023,t=4.955,P<0.01)。H/R+RBFOX1组RBFOX1(0.942±0.074比0.515±0.038、0.629±0.080,F=10.932,P<0.05)、HO-1(0.839±0.068比0.638±0.033、0.622±0.052,F=5.167,P<0.05)的蛋白表达水平及p-Nrf2/Nrf2比值(0.864±0.034比0.577±0.047、0.541±0.058,F=13.896,P<0.01)明显高于H/R组和H/R+NC组,与Control组差异无统计学意义(P>0.05)。ROS流式检测结果表明H/R+RBFOX1组的活性氧水平明显低于H/R组和H/R+NC组[(5.25±0.10)%比(8.98±0.12)%、(9.76±0.21)%,F=248.098,P<0.01];MDA酶标仪检测结果显示H/R+RBFOX1组的MDA含量明显低于H/R组和H/R+NC组(3.506±0.098比5.034±0.087、5.176±0.089,F=102.103,P<0.01);SOD酶标仪检测结果显示H/R+RBFOX1组内的SOD活性高于H/R组和H/R+NC组(0.415±0.011比0.215±0.003、0.250±0.030,F=32.681,P<0.01)。细胞凋亡流式检测结果表明H/R+RBFOX1组的细胞凋亡水平�
- 许磊程帆周向军林方优饶婷宁金卓余伟民
- 关键词：肾小管上皮细胞氧化应激
- 地塞米松对内毒素诱导的肾小管上皮-间质转化的抑制作用
- 2016年
- 目的:探讨地塞米松(dex)抑制内毒素诱导的大鼠正常肾小管上皮细胞(NRK-52E)上皮-间质转化的作用和机制。方法:按照不同的处理方式分为:对照组(Control),内毒素组(LPS 5mg/L),地塞米松小剂量组(LPS 5mg/L+dex 0.5mg/L),地塞米松中剂量组(LPS 5mg/L+dex 5mg/L)和地塞米松大剂量组(LPS 5mg/L+dex50mg/L)。处理24h后,取各组培养基200μl,1 500 g、15min离心后去沉淀,分析IL-1和TNF-α的分泌量。通过细胞免疫荧光检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维黏连蛋白(Fibronectin)。Western blotting检测核转录因子(NF-κB-p65),磷酸化Smad3(p-Smad3),核因子转录抑制蛋白α(IκB-α)的表达。结果:ELISA结果显示,内毒素组IL-1,TNF-α分泌较对照组明显增多,加入地塞米松后分泌逐渐减少,大剂量效果尤为显著。细胞免疫荧光结果显示,内毒素组较对照组E-cadherin的表达减少,α-SMA和Fibronectin表达增多,加入地塞米松后能够阻止这种改变,并呈剂量依赖。Western blotting结果显示地塞米松能上调IκB-α表达,并减少NF-κB-p65,p-Smad3的表达。结论:地塞米松可能通过NF-κB/Smad信号通路抑制内毒素诱导的肾小管上皮-间质转化。
- 吴品张礼军周向军王伟秦聪张杰
- 关键词：地塞米松内毒素上皮-间质转化NF-ΚB
- 微小RNA-325对肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤后凋亡的影响
- 2021年
- 目的探讨微小RNA-325(miRNA-325)在肾小管上皮细胞缺氧复氧(H/R)损伤模型中的作用及其机制。方法选取人肾小管上皮细胞HK-2,建立适当的肾小管上皮细胞H/R模型(缺氧24 h复氧2 h)。将HK-2细胞分为对照组、H/R组、H/R+抑制剂(inhibitor)组和H/R+抑制剂阴性对照(inNC),转染miRNA-325 inhibitor和inNC后进行缺氧复氧处理,然后进行后续实验。用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。利用蛋白质印迹法(Western blot)检测HK2细胞在H/R后活化半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)等的表达水平。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测HK2细胞中miRNA-325、Caspase-3和XIAP mRNA表达水平。使用双荧光素酶报告基因实验检测miRNA-325与XIAP 3’端非编码区(3’UTR)之间的关系。组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果H/R组细胞凋亡率高于对照组[(12.11±1.65)%比(3.88±0.24)%,t=8.311,P<0.05];H/R+Inhibitor组细胞凋亡率低于H/R组[(7.60±3.07)%比(12.11±1.65)%,t=4.557,P<0.05]。Western blot结果显示,实验组Cleaved Caspase-3[(0.50±0.02)、(0.63±0.01)、(0.61±0.02)比(0.41±0.01),F=212.095,P<0.05]和bax[(0.53±0.02)、(0.63±0.01)、(0.64±0.04)比(0.41±0.02),F=105.138,P<0.05]蛋白表达量显著高于对照组,bcl-2[(0.57±0.02)、(0.52±0.02)、(0.49±0.01)比(0.62±0.02),F=89.498,P<0.05]和XIAP[(0.29±0.01)、(0.24±0.03)、(0.24±0.01)比(0.33±0.03),F=27.575,P<0.05]表达量显著低于对照组;H/R+Inhibitor组Cleaved Caspase-3[(0.50±0.02)比(0.61±0.02),t=11.437,P<0.05]和bax[(0.53±0.02)比(0.64±0.04),t=7.253,P<0.05]的表达低于H/R组,bcl-2[(0.57±0.02)比(0.49±0.01),t=9.471,P<0.05]和XIAP[(0.29±0.01)比(0.24±0.01),t=4.231,P<0.05]的表达量高于H/R组,差异均有统计学意义。qRT-PCR结果显示,实验组miRNA-325[(7.27±0.30)、(4.66±0.21)、(7.11±0.25)比(1.05±0.13),F=1453.045
- 张左赵胜周向军宁金卓余伟民程帆
- 关键词：微小RNA凋亡缺氧复氧
- 外泌体在草酸钙晶体所致肾间质纤维化中的作用
- 2021年
- 目的探讨外泌体在草酸钙晶体所致肾损伤及肾间质纤维化中的作用。方法C57小鼠30只(6~8周龄,体重24~26 g),其中24只野生型(WT)小鼠,6只纯合子Rab27a-/-(KO)小鼠。WT小鼠随机分为空白对照(NC)组、造模1周组、造模2周组、造模4周组(WT造模组),Rab27a-/-小鼠为KO造模组,每组6只,1.25%乙二醇灌胃,分别持续给药0、1、2、4及4周,构建肾结石小鼠动物模型。苏木精-伊红(HE)染色评估肾小管损伤,Von-kossa染色评估结石晶体形成,Masson染色评估肾间质胶原纤维沉积,免疫组织化学染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(Fibronectin)及外泌体标志物白细胞分化抗原63(CD63)表达,两组间比较采用t检验。结果HE染色显示,在野生型小鼠中,造模1周、造模2周及造模4周肾小管损伤逐渐加重(0.57±0.18比1.30±0.19,t=6.248,P<0.05;1.30±0.19比2.30±0.28,t=6.642,P<0.05),Von-kossa染色显示,肾脏晶体形成逐渐增加(1.42±0.61比5.24±0.55,t=10.410,P<0.05;5.24±0.55比10.01±0.94,t=9.946,P<0.05),差异均有统计学意义。免疫组织化学染色显示,造模1周、造模2周及造模4周CD63阳性表达面积逐渐增加(1.33±0.34比4.92±0.71,t=10.250,P<0.05;4.92±0.71比8.55±1.04,t=6.448,P<0.05)差异有统计学意义。WT造模组Masson染色胶原纤维沉积面积高于NC组(8.57±0.84比0.60±0.34,t=19.660,P<0.05),α-SMA阳性表达面积高于NC组(11.30±1.04比1.63±0.55,t=18.430,P<0.05),Fibronectin阳性表达面积高于NC组(12.85±0.68比2.78±0.55,t=25.810,P<0.05),差异均有统计学意义。WT造模组Masson染色胶原纤维沉积面积高于KO造模组(8.57±0.84比5.53±0.74,t=6.082,P<0.05),α-SMA阳性表达面积高于KO造模组(11.30±1.04比6.63±0.91,t=7.553,P<0.05),Fibronectin阳性表达面积高于KO造模组(12.85±0.68比8.80±0.93,t=7.875,P<0.05),差异均有统计学意义。结论肾结石形成过程中,肾小管损伤加重,外泌体分泌增加。同时,抑制外泌体分泌能减轻草酸钙晶体诱导
- 夏煜琦周向军饶婷程帆余伟民阮远袁润宁金卓赵胜林方优吴承
- 关键词：肾结石外泌体草酸钙晶体肾间质纤维化
- 胰岛素样因子3在氟他胺诱导的小鼠隐睾模型中的表达和意义被引量：2
- 2013年
- 目的：通过氟他胺诱导小鼠隐睾动物模型的建立，探讨其睾丸组织的胰岛素样因子3（INSL-3）mRNA表达的变化。方法：妊娠BALB／c小鼠随机分成A、B、C、D、E5组，每组9只（雄鼠3只，雌鼠6只），合笼交配；分别在雌鼠孕第12—21天持续10d给予氟他胺灌胃，剂量依次为0、150、300、500、700mg／kg；分别在出生后第4周和第8周时运用荧光定量PCR技术检测子代小鼠睾丸组织中INSL-3mRNA的表达情况。结果：A组小鼠无隐睾，B、C组有单侧隐睾，发生率分别10．0％和25．0％；D、E组有双侧隐睾的发生，发生率分别为21．1％和40．0％。随着给药剂量的增大，INSL-3mRNA的表达逐渐降低；与对照组相比，B、C组表达强度无明显变化（P〉0．05）；D、E组表达强度明显低于A组（P〈0．05）。结论：剂量为150与300mg,／kg的氟他胺能诱导单侧隐睾模型，剂量为500与700mg／kg的氟他胺能诱导双侧隐睾模型；并且隐睾小鼠睾丸的INSL-3表达随氟他胺浓度升高水平明显下降，可能是隐睾发生的机制之一。
- 袁耀美张茨白晨郑明周向军
- 关键词：氟他胺隐睾症胰岛素样因子3小鼠
- p53在顺铂治疗乳腺癌引起急性肾损伤小鼠中的作用被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨p53/微小RNA(miRNA,miR)-205/第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)信号通路在顺铂诱导急性肾损伤小鼠中的作用,减轻顺铂在三阴性乳腺癌中发挥抗肿瘤活性时产生的不良反应。方法:30 mg/kg顺铂腹腔注射小鼠(购自江苏卡文斯实验动物中心)建立急性肾损伤模型。将18只雄性C57小鼠随机分为顺铂组、顺铂+p53抑制剂组、对照组。检测每组小鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;苏木精-伊红(HE)染色评估肾小管损伤;半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3荧光染色检测肾小管上皮细胞凋亡;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-205表达;蛋白质印迹法(Western blot)分析肾组织p53和PTEN表达。使用SPSS 17.0统计软件分析,采用 t检验和单因素方差分析。 结果:Western blot分析结果显示顺铂组p53和PTEN相对表达量较对照组显著升高(0.16±0.03比0.70±0.04、0.43±0.05比0.91±0.07),差异有统计学意义( t=10.792、5.625, P<0.05)。RT-PCR显示顺铂组miR-205表达量较对照组显著降低(0.96±0.02比0.41±0.03),差异有统计学意义( t=14.763, P<0.05)。与对照组比较,顺铂组显著升高Cr[(26.83±2.30) μmol/L比(92.17±3.60) μmol/L, t=15.268, P<0.05]、BUN水平[(19.67±1.86) mmol/L比(52.83±3.52) mmol/L, t=8.344, P<0.05],加重肾小管损伤分数(0.50±0.22比2.66±0.21, t=7.051, P<0.05)及肾小管上皮细胞凋亡分数(0.83±0.31比5.66±0.49, t=8.303, P<0.05),以上差异均统计学意义。顺铂+p53抑制剂组较顺铂组Cr[(92.17±3.60) μmol/L比(69.00±3.06) μmol/L, t=4.894, P<0.05]及BUN水平显著降低[(52.83±3.52) mmol/L比(40.00±2.88) mmol/L, t=2.822, P<0.05],肾小管损伤分数(2.66±0.21比1.33±0.21, t=4.471, P<0.05)及肾小管上皮细胞凋亡分数减轻(5.66±0.49比2.50±0.22, t=5.836, P<0.05),同时miR-205升高(0.41±0.03比0.61±0.03, t=9.303, P<0.05)和PTEN表达水平降低(0.91±0.07比0.65±0.04, t=3.235, P<0.05),以上差异均有统计学�
- 冯娟周向军孙圣荣
- 关键词：急性肾损伤凋亡微小RNA顺铂
