叶爱慧
- 作品数：14 被引量：56H指数：4
- 供职机构：湖南省怀化市第一人民医院更多>>
- 发文基金：湖南省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因DNA双链四色荧光单道测序的实验研究被引量：1
- 2000年
- 作者采用四色荧光单道法对ＰＣＲ产物双链直接测序,通过改进操作方法,获得成功。1 材料与方法1.1 材料手术留标本或纤维支气管镜钳取病变或可疑病变组织,用生理盐水于4℃保存,同时送病检对照。310型ＤＮＡ测序仪,2400型ＰＣＲ仪为美国ＰＥ公司产,微量高速离心机为北京六...
- 顾其华李玲芝况艳春李修荣叶爱慧舒畅曾滢
- 关键词：基因荧光标记毛细管电泳测序
- p53基因第7内含子序列的多态性位点分析被引量：12
- 2000年
- 目的 测定中国人 p5 3基因内含子 7序列的多态性位点。方法 收集 10 5名正常人外周血标本 ,用聚合酶链反应扩增 p5 3基因第 7内含子 ,用双链四色荧光标记测序方法进行序列分析。结果 在p5 3基因第 7内含子上 ,距外显子 7最后一个碱基 73bp处有 1个 C和 T多态位点、距 93bp处有 1个 T和 G多态位点 ,其中基因型呈 TG型的 2 2例 ,呈 CT型的 37例 ,CT/ TG杂合型的 46例 ,未发现基因型为TT和 CG单体型的个体。前一个多态位点有 1个 Apa 酶切位点的变化。基因频率为 :CT=0 .5 7,TG=0 .43。结论 p5 3基因内含子 7上有 2个多态性位点 ,且这两个多态性位点属于连锁不平衡 。
- 顾其华舒畅叶爱慧吕新生唐孝亮况艳春
- 关键词：P53基因内含子肿瘤
- 用普通琼脂糖代替低熔点胶回收DNA片段被引量：9
- 2000年
- 为了建立一种直接从普通琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简便实用的方法 ,采用聚合酶链式反应扩增人P53基因外显子7、8和其间的内含子7序列 ,用普通琼脂糖凝胶电泳,直接从凝胶中切下产物带 ,用加热熔化法回收DNA ;紫外比色法测定回收率 ;用测序法鉴定回收产物质量。并用QIAquickSpin纯化柱对照。结果表明 ,本法回收的产物质量明显优于用QIAquickSpin柱回收 ,本法回收的产物用于测序效果极佳 ,回收率达80% ,用QIAquickSpin柱回收率不到20% ,差异非常显著(P<0 01)。证明这种方法回收PCR产物质量可靠 ,能代替低熔点胶回收DNA 。
- 顾其华李玲芝舒畅杨志毅叶爱慧
- 关键词：琼脂糖凝胶电泳DNA测序回收
- P_(53)基因测序在恶性肿瘤诊断中的应用价值研究
- 2001年
- 1目的 研究 P5 3基因测序在临床肿瘤诊断中的应用价值。2方法 采用聚合酶链式反应—直接测序方法对肺癌、胃癌、大肠癌、肝癌、乳腺癌、鼻咽癌、甲状腺癌、宫颈癌及支气管和胃粘膜非典型增生的活检标本 ,急、慢性白血病的外周血标本 ,肺癌胸水、肝癌腹水标本等临床肿瘤样本进行 P5 3基因外显子 5、6、7、8序列分析。 3结果 正常对照组未发现突变 ,所测的几种常见肿瘤样本的活检标本的突变率一般为 3 0 %～ 5 0 % ,胸、腹水标本突变率与相应肿瘤的活检标本相近 ,突变大多位于外显子 7、8。存在突变的病例 2年病死率明显升高。 4结论 P5 3基因测序在常见恶性肿瘤诊断和判断预后等有一定的参考价值。
- 顾其华李玲芝舒畅杨志毅叶爱慧
- 关键词：P53基因基因突变基因测序恶性肿瘤
- 口腔鳞癌K-ras基因测序分析及p21^(ras)蛋白的表达被引量：1
- 2004年
- 目的:探讨K-ras基因在口腔鳞癌中的序列改变和p21ras蛋白的表达。方法:采用聚合酶链反应直接测序检测口腔鳞癌K-ras基因外显子1、2突变,免疫组织化学法检测口腔鳞癌组织、癌旁正常组织p21蛋白的表达。结果:30例口腔鳞癌中4例(13.3%)存在K-ras基因突变,突变方式为C→T转换,突变位点在第6位和第79位密码子,口腔鳞癌组织p21ras蛋白阳性率为73.3%(22/30),高于癌旁正常组织20%(6/30)。结论:口腔鳞癌中K-ras基因的突变谱较广,K-ras基因突变和p21蛋白表达与口腔鳞癌发生发展有关。
- 李叶青顾其华李运良王淑华贺小辉叶爱慧
- 关键词：口腔鳞癌K-RAS基因测序P21^RAS
- 大肠癌K-ras和p53基因序列分析被引量：4
- 2002年
- 目的 研究大肠癌变与 K- ras和 p5 3基因突变的关系。方法 采用 PCR- DNA双链四色荧光单道测序方法对 31例大肠癌组织、13例大肠息肉伴不典型增生、11例大肠癌术后并发的腹水标本进行 K-ras基因外显子 1、2和 p5 3基因外显子 5、6、7、8测序分析。结果 31例大肠癌组织中发现 K- ras基因突变7例 ,p5 3基因突变 11例 ,阳性率分别为 2 2 .5 8%和 35 .48% ;13例大肠息肉伴不典型增生组织中发现 p5 3基因突变 2例 ;11例术后腹水标本中发现 K- ras基因突变 1例和 p5 3基因突变 2例 ,且突变与患者原包埋组织结果一致。但未发现这两个基因同时突变的病例。结论 大肠组织癌变与这两个基因突变密切相关 ,K- ras和 p5 3基因突变可能为大肠癌变的早期事件 ;DNA测序方法是研究癌基因突变的最精确可靠的方法。
- 顾其华舒畅李永平吕新生叶爱慧李叶青
- 关键词：大肠癌RAS基因P53基因
- 肺鳞癌、肺腺癌Ki-ras和p53基因序列分析被引量：9
- 2003年
- 目的 :研究肺鳞癌、腺癌与Ki-ras基因外显子 1,2及p5 3基因外显子 7,8突变谱并观察肺鳞癌、腺癌预后同Ki-ras和 p5 3基因突变的关系。方法 :用PCR和测序方法分析 33例肺鳞癌和 2 7例肺腺癌Ki-ras基因外显子 1,2和 p5 3基因外显子 7,8错义突变。并追踪观察突变者和非突变者的二年存活率。结果 :肺鳞癌中发现 5例 (15 .16 % )Ki-ras基因突变和 12例 (36 .37% )p5 3基因突变 ;肺腺癌中发现 2例 (7.4 1% )Ki-ras基因突变和 7例 (2 5 .93% ) p5 3基因突变 ,两型肺癌间Ki-ras和p5 3基因突变阳性率差异均无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;肺鳞癌、腺癌中 p5 3基因突变总阳性率为 31.6 7% ,Ki-ras基因突变总阳性率仅 11.6 7% ,p5 3基因突变率高于Ki-ras基因突变率 (P <0 .0 5 )。p5 3基因突变谱与一般报道相似。Ki-ras基因突变情况与一般报道有所不同 ,未发现一般文献报道较多的第 12位等密码子突变 ,发现有第 6位密码子纯合性突变和第 31位和第 79位密码子杂合性突变。预后追踪显示 :无突变的病例 2年生存率为 4 0 % ,存在突变的病例 2年生存率仅 12 %。结论 :肺鳞癌、腺癌的Ki-ras和 p5 3基因突变谱较广 ,肺鳞癌和腺癌的预后均与这两个基因突变有关。
- 顾其华陈琼张贻秋李叶青叶爱慧
- 关键词：肺鳞癌肺腺癌基因序列分析RAS基因P53基因
- 甲状腺癌p53基因外显子5～8序列分析被引量：3
- 2000年
- 目的 :了解甲状腺癌与 p5 3基因突变的关系。方法 :用聚合酶链式反应 -双链DNA直接测序方法对甲状腺癌标本进行 p5 3基因外显子 5 ,6 ,7,8序列分析 ,共检测甲状腺癌活检组织标本 2 5例 ,石蜡包埋组织标本 16例 ,正常人外周血标本 31例。结果 :正常人外周血标本未发现 p5 3基因突变 ,43例甲状腺癌标本发现p5 3基因外显子 8点突变 11例 ,外显子 7点突变 2例 ,缺失 3个bp1例。总阳性率达 34 15 %。其中位于外显子 8上的第 2 73位密码子突变 7例 ,占突变的 5 0 % ,最多见。结论 :p5 3基因外显子 7和 8突变在甲状腺癌组织细胞中较常见 ,特异性好 ,提示p5 3基因外显子 7。
- 杨志毅顾其华李玲芝叶爱慧舒畅
- 关键词：P53基因直接测序甲状腺癌
- 硝酸甘油扩张浅静脉的临床应用研究被引量：14
- 1999年
- 为解决临床上因病人血管状态不佳导致的静脉穿刺困难，采用００１％的硝酸甘油扩张手背浅静脉。结果示：外涂药物２ｍｉｎ以内，受试者血管直径明显增宽（Ｐ＜００１），且效果较６５４２更佳，显效率达９３８％。对临床上４０例因血管条件不佳常规穿刺失败者，实施该方法后再行穿刺，一次成功的３５例，重复给药后成功的４例，总有效率达９７５％，应用中未发现不良反应。表明硝酸甘油外涂在解决临床静脉穿刺困难方面有较好的应用价值。
- 况艳春顾其华徐乃焕叶爱慧肖燕云
- 关键词：硝酸甘油浅静脉静脉穿刺
- 非小细胞肺癌与p53基因序列分析被引量：3
- 1999年
- 目的：研究非小细胞肺癌与ｐ５３基因突变的关系。方法：采用聚合酶链式反应和ＤＮＡ双链直接测序方法对３７例非小细胞肺癌组织标本进行Ｐ５３基因外显子５，６，７，８序列分析。结果：１５例突变，总突变率为４０．５４％。分别为２３７，２４３位密码子突变各１例，２８５位密码子突变２例，２７３位密码子突变的７例，另有４例标本同时存在第２５２和２５４位两个密码子突变为ＴＴＣ，这种突变方式尚未见报道。存在突变的１５例患者中１３例在一年内死亡，无突变２２例中只有１０例患者在一年内死亡，存在ｐ５３突变的肺癌近期死亡率明显升高（Ｐ＜０．０１）。结论：非小细胞肺癌与ｐ５３基因突变密切相关，突变的方式在不同人群中有所不同，ｐ５３基因测序在肺癌诊断和判断预后等方面有一定的参考价值。
- 李玲芝屈全福顾其华叶爱慧
- 关键词：非小细胞肺癌P53基因基因突变测序
