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旋毛虫A200711蛋白的原核表达、纯化及其对H7402细胞增殖的影响被引量：3: 2012年; 目的原核表达旋毛虫抗肿瘤基因A200711,并纯化该蛋白,CCK-8检测其对H7402人肝癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR获得A200711基因片段,构建重组表达载体pET-28a(+)-A200711,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)。SDS-PAGE及Western blot检测IPTG诱导后重组菌,采用Ni-NTA亲合层析柱纯化并柱上复性目的蛋白。细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测A200711蛋白对H7402细胞的生长抑制作用。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-A200711,目的蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达;SDS-PAGE及Western blot分析显示,相对分子量约22KD处出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲合层析柱获得了高纯度可溶性的A200711蛋白;H7402细胞增殖抑制率与A200711蛋白浓度存在量效关系,同时随作用时间的延长增殖抑制率也明显增加。结论成功克隆、表达并纯化了旋毛虫A200711蛋白。A200711蛋白可抑制H7402细胞的增殖,且呈现时效和量效关系,本研究表明旋毛虫A200711蛋白作为潜在的抗肝癌生物制剂有进一步研究的价值。; 李慧萍刘学张馨月郭恒赵丽晶刘攀孙树民褚丽新刘娟刘明远王学林; 关键词：旋毛虫抗肿瘤原核表达

睡眠呼吸暂停低通气综合征与心律失常的临床分析: 目的:探讨不同程度的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea Syndrome,OSAHS)与心律失常的关系。方法:80例因睡眠时打鼾而就诊的患者经多导睡眠呼吸监测...; 刘攀; 关键词：睡眠呼吸暂停阻塞性心律失常多导睡眠仪 HOLTER; 文献传递

草甘膦对土壤微生态的影响及其抗性和降解真菌的研究: 目的:筛选出对除草剂草甘膦具有高效降解能力和极端抗性能力的真菌菌株,并对其最佳降解条件和相关抗性基因进行初步研究。同时探讨了不同浓度的草甘膦对土壤微生态的影响。方法:①分别测定施用一定浓度的草甘膦后土壤中的微生物数量及...; 刘攀; 关键词：真菌草甘膦土壤微生态 HPLC; 文献传递

旋毛虫T626-55基因减毒沙门氏菌疫苗的构建及其在小鼠体内表达被引量：1: 2011年; 采用PCR方法扩增旋毛虫强反应原性基因T626-55,与真核表达载体pcDNA3.1相连,构建携带编码旋毛虫T626-55基因真核表达质粒的沙门氏菌,将构建好的重组质粒T626-55-pcDNA3.1通过电穿孔转化入沙门菌中。小鼠口服免疫该重组沙门菌,5 d后通过反转录PCR(RT-PCR)和间接免疫荧光(IFA)检测目的基因在小鼠组织内的转录和表达情况。结果表明:成功构建含有目的基因真核表达质粒的沙门菌T626-55-pcD-NA3.1-PQ,通过口服免疫该菌,在小鼠脾脏及派伊尔氏结(PP)内检测到目的基因的转录,在脾脏内检测到目的基因表达。; 杜婧刘攀唐斌高鹤刘明远; 关键词：旋毛虫沙门氏菌反转录PCR 间接免疫荧光

非特异性效应细胞抗旋毛虫感染作用机制研究进展被引量：1: 2012年; 先天性免疫细胞由树突细胞、肥大细胞、巨噬细胞、嗜酸粒细胞和天然杀伤细胞组成。旋毛虫入侵机体后,这些先天性免疫细胞作为前沿免疫防御系统,首先快速发挥各自作用,并诱发更加有效的Th2型免疫应答,在保护机体免受重大损伤、抵制并排除旋毛虫方面起着必不可少的作用。论文详细综述了旋毛虫感染机体后,机体先天性免疫细胞的作用方式、作用机制以及相关免疫分子的研究进展。; 贺亚奇刘攀吴秀萍王学林刘明远; 关键词：旋毛虫

吉林省舒兰煤业五矿采空区地面塌陷危险性评价研究: 吉林省舒兰市是我国东北重要的煤炭生产基地之一,开采历史近百年。由于煤炭资源的不断开采,形成了大量的采空区,导致地面塌陷、地裂缝等严重的地质灾害问题,且由此引发的建筑物被破坏、耕地被破坏等问题亦相当严重。五矿位于舒兰市煤田...; 刘攀; 关键词：采空区地面塌陷粗糙集理论熵值法; 文献传递

小鼠巨噬细胞胞外陷阱的性质研究与旋毛虫活性脱氧核糖核酸酶的鉴定: 先天性免疫细胞胞外陷阱（ETs）是近年来新发现的一种先天性免疫防御机制。当嗜中性粒细胞受到外源微生物或某些化学物质刺激后，会向细胞外释放出主要由DNA和颗粒蛋白组成的纤维状结构，该结构能够捕获并杀灭多种细胞外微生物，在嗜...; 刘攀; 关键词：巨噬细胞旋毛虫脱氧核糖核酸酶酶谱; 文献传递

构建阻塞性睡眠呼吸暂停综合征动物模型的方法: 本发明公开了一种构建阻塞性睡眠呼吸暂停综合征动物模型的方法，将麻醉大鼠，通过插入岛叶皮层与微量注射装置直接相连的玻璃微电极，将药物向核团内注射到脑内岛叶皮层中。通过本发明的方法，刺激岛叶皮层可以产生类似于阻塞性睡眠呼吸暂...; 李明娴刘攀王敏王绍; 文献传递

不同播期下磷肥调控对春玉米生长和根际过程的影响: 东北早春低温是限制磷效率的关键性因素。研究已证实,低温下,磷肥调控可以改善根际过程,进而提高磷效率和玉米产量,但针对东北黑土区的相关研究却鲜有报道。本文通过开展田间试验,以春玉米为研究对象,探讨播期(早播和常规播期)及磷...; 刘攀; 关键词：春玉米播期; 文献传递

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刘攀