龚艳杰
- 作品数：35 被引量：100H指数：6
- 供职机构：郑州大学第五附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 输血相关急性肺损伤对SD大鼠巨噬细胞活化和共刺激分子CD40表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的观察输血相关急性肺损伤（transfusion—related acute lung injury，TRALI）SD大鼠肺泡巨噬细胞活化及共刺激分子CD40表达，探讨其在TRALI发病机制中的作用。方法SD大鼠60只，随机（随机数字法）分为正常对照组、脂多糖对照组、TRALI组和阳性对照组各15只。正常对照组采用假手术处理；脂多糖对照组大鼠经腹腔注射脂多糖（2ms／kg，≤1min完毕），2h后静脉输注生理盐水（约1mL／只）；TRALI组腹腔注射脂多糖（2mg／kg）2h后静脉输注血浆（约1mL／只）；阳性对照组静脉输注脂多糖（5ms／kg）诱导急性肺损伤。光镜观察肺组织病理变化；应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定活化巨噬细胞（activatedmacrophage，AMφ）中TLR4表达；电泳迁移率变动分析（EMSA）检测AMφ核提取物中NF—KB的活性；Northernblot检测CIM0mRNA表达，流式细胞术检测CD40蛋白表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF一α、MIP-2及IL-1β的含量。结果TRALI组和阳性对照组大鼠肺泡隔断裂、肺间质充血及肺泡腔中性粒细胞浸润；活化AM表面TLR4的表达升高、NF．KB活性增强、共刺激分子CD40mRNA和蛋白显著表达，与正常对照组和脂多糖对照组比较差异具有统计学意义（均P〈0．01）。TRALI组BALF中TNF-α、MIP-2、IL-1β的表达水平均显著高于正常对照组和脂多糖对照组（P均〈0．05）。结论AMφ能上调其表面共刺激分子的表达，促进炎细胞因子的释放，增强获得性免疫反应介导的急性肺损伤，提示AM活化可能在TRALI的发生过程中发挥一定作用。
- 魏明涂玲刘佳梁颖红龚艳杰张宜花杨璐
- 关键词：急性肺损伤巨噬细胞TOLL样受体-4
- 乳腺癌CD4^+ CD25^(high) Foxp^(3+)调节性T细胞数量和分布及Foxp3mRNA表达与肿瘤分期的相关性研究被引量：5
- 2012年
- 目的研究乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3mRNA的表达变化与国际抗癌联盟(UICC)乳腺癌的TNM分期的关系。方法用四色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析40名健康对照者及40例乳腺癌患者(临床TNM分期T1期9例、T2期10例、T3期12例、T4期9例)外周血、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量及分布情况。实时荧光定量PCR技术检测TregFoxp3mRNA表达水平。结果乳腺癌患者外周血CD4+CD25high Foxp3+Treg占CD4T细胞的百分比为(8.91±3.06)%,高于正常健康对照组(5.84±2.63)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者TIL、癌旁淋巴结中Treg占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(P均<0.01)。乳腺癌组织TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度(MFI)显著高于外周血(P<0.05)。T1、T2、T3、T4期乳腺癌患者Treg比例分别为(5.81±1.89)%、(6.52±2.15)%、(9.65±3.14)%、(11.86±2.43)%。乳腺癌患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.01)。相关分析显示,Treg数量与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.7 576,P<0.01);Foxp3基因mRNA表达水平与乳腺癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.6 129,P<0.05)。结论乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关。乳腺癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3mRNA的表达强度均有所不同,提示这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25high Foxp3+Treg将来可作为乳腺癌患者病情进展的重要判断指标之一。
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：肿瘤分期特异性转录因子
- 臭氧暴露对哮喘大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞数量和Foxp3mRNA表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的 探讨低浓度臭氧暴露对支气哮喘大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞数量及转录因子Foxp3mRNA表达的影响.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、臭氧暴露组、哮喘组和臭氧暴露哮喘组,每组15只.哮喘组采用卵清白蛋白（OVA）致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组雾化生理盐水,臭氧暴露组予吸入低浓度臭氧,臭氧暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度臭氧吸入.流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4＋T细胞的比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血和肺组织γ-干扰素（γ-INF）以及白细胞介素-4（IL-4）含量;聚合酶链反应（PCR）检测肺组织Foxp3mRNA表达水平.结果 哮喘组大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4T细胞的比例为6.12％±1.03％,臭氧暴露组为5.87％±1.26％,均低于正常对照组（9.85％±1.34％）;臭氧暴露哮喘组CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4T细胞的比例为（3.31％±0.85％）,低于正常对照组和哮喘组,差异均有统计学意义（P＜0.01）.哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[血浆：（21.83±5.12） ng/L,肺组织：（0.89±0.13） ng/L]高于正常对照组[血浆：（10.58±2.73） ng/L）,肺组织：（0.32±0.11） ng/L],差异有统计学意义（P＜0.01）;臭氧暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[血浆：（35.47±7.24） ng/L,肺组织：（1.58±0.43） ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义（P＜0.01）.哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[血浆：（61.78±23.45） ng/L,肺组织：（0.69±0.21） ng/L]低于正常对照组[血浆：（158.89±60.23） ng/L,肺组织：（1.86±0.29） ng/L],差异有统计学意义（P＜0.01）,臭氧暴露哮喘组γ-INF含量[血浆：（10.28±2.63） ng/L,肺组织：（0.46±0.12） ng/L低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义（P＜0.01）.臭氧暴露哮喘组和哮喘组Foxp3mRNA表达低于
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：臭氧哮喘T淋巴细胞转录因子
- 磷酸化c-Jun氨基末端激酶信号通路在强噪声诱导豚鼠前庭毛细胞凋亡中的作用
- 2012年
- 目的探讨强噪声对豚鼠前庭毛细胞死亡的机制及磷酸化c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通道在强噪声诱导前庭毛细胞凋亡中的作用，进一步揭示噪声性耳聋的发病机制，为临床治疗提供理论基础。方法将实验组豚鼠暴露在4kHz窄带噪声120dB SPL噪声环境中4h，噪声刺激停止后1、5、15d组及对照组（每组各8只）在处死前测ABR。取每组4只豚鼠前庭毛细胞作石蜡切片。另外4只豚鼠提取前庭毛细胞总蛋白，采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术（TUNEL）检测前庭毛细胞的凋亡，免疫组织化学法及Western blotting法检测JNK信号途径蛋白质P-JNK、P-c-Jun的表达。结果噪声暴露组前庭毛细胞存在TUNEL阳性细胞，以1d组最多，逐渐减少，15d组最少，对照组未见阳性细胞。免疫组织化学结果显示，噪声暴露组P-JNK、P-c-Jun有免疫反应阳性，定位于细胞核，对照组未见阳性细胞。Western blotting检测JNK信号途径蛋白质P-JNK、P-c-Jun水平在强噪声刺激后，1d迅速增高并快速活化，5d达高峰，随后逐渐下降，但在15d仍然维持较高水平。结论强噪声可以通过诱导细胞凋亡造成前庭毛细胞损伤，同时P-JNK标志着JNK信号途径的激活，提示JNK信号通路可能是介导强噪声诱导豚鼠前庭毛细胞凋亡信号通道之一，在前庭毛细胞损伤中发挥重要作用。
- 魏明王伟涛张涛涂玲梁颖红刘佳张俊华龚艳杰
- 关键词：噪声脱噬作用毛细胞信号转导
- 髓系细胞触发受体-1在输血相关性急性肺损伤大鼠肺组织的表达被引量：3
- 2015年
- 目的观察髓系细胞触发受体（TREM-1）在输血相关性急性肺损伤（TRALI）SpragueDawley（SD）大鼠肺组织中的表达及其在TRALI发病机理中的作用。方法sD大鼠55只，随机分为TRALI组（n=25）、正常对照组（n=10）和阳性对照组（n=20）。TRALI组腹腔注射脂多糖（LPS）2mg／kg2h后静脉输注人血浆（1ml／只）；正常对照组腹腔注射生理盐水2mg／kg，移除1mJ大鼠血液后及时输注等体积生理盐水；阳性对照组静脉输注LPS5mg／kg诱导急性肺损伤。3组分别于造模后6h留取外周血及肺组织，采用荧光实时定量反转录多聚酶链反应法（RT-PCR）检测大鼠外周血及肺组织TREM-1mRNA；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠外周血及肺组织TREM-1和肿瘤坏死因子（TNF）-α浓度；HE染色进行大鼠肺组织Smith病理损伤评分。Spearman相关性分析TRALI组TREM-1mRNA、TNF-α和Smith病理损伤评分3者之间的相关性。结果TRALI组和阳性对照组大鼠肺组织TREM-1mRNA的表达（4．96±0．08、6．35±0．09）高于正常对照组（1．01±0．00）（均P〈0．05），血TREM-1mRNA的表达（9．85±3．23、12．33±3．56）也高于正常对照组（2．15±0．35）（均P〈0．05）。TRALI组大鼠肺组织和血TREM-1浓度[（695．25±116．87）、（703．80±100．67）ng／L]高于正常对照组[（234．51±44．38）、（240．22±46．63）ng／L]（均P〈0．05），但与阳性对照组差异无统计学意义（均P〉0．05）。TRALI组大鼠肺组织和血TNF-α浓度[（288．26±35．53）、（276．26±39．53）ng／L]显著高于正常对照组[（216．34±33．45）、（220．60±38．30）ng／L]（均P〈0．05），但与阳性对照组差异无统计学意义（均P〉0．05）。TRALI组Smith病理损伤评分（7．46±0．95）显著高于正常对照组（0．32±0．28）（P〈0．05），与阳性对照组（8．65±0．72）差异无统计学意义（P〉0．05）。TRALI组大鼠肺组织Smith
- 涂玲梁颖红魏明刘佳龚艳杰张宜花
- 关键词：急性肺损伤髓系细胞触发受体-1肿瘤坏死因子Α病理评分
- 创伤后多器官功能障碍综合征患者外周血髓源抑制细胞细胞的表达
- 2015年
- 目的探讨创伤后多器官功能障碍综合征(MODS)患者外周血髓源抑制细胞(MDSCs)的表达在诊断MODS疾病严重程度和预后判断中的临床意义。方法分别采集66例MODS患者、78例非MODS患者和37例健康志愿者外周血,以CD14-CD11b+CD33+作为MDSCs的标志,采用流式细胞术检测MDSCs细胞的表达;以MODS评分评估疾病严重程度;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并分析患者MDSCs的表达与疾病严重程度评分和IL-10和TNF-α水平的相关性。结果 MODS患者外周血CD14-CD11b+CD33+细胞表达为(11.84±2.18)%明显高于非MODS组的(6.52±0.37)%和健康对照组的(1.18±0.22)%(P<0.05);MODS患者死亡组(15.66±1.68)%较存活组(9.48±1.56)%明显升高(P<0.05)。MODS患者血清IL-10、TNF-α水平较非MODS组和健康对照组明显增高(P<0.05)。MODS患者中死亡组血清IL-10、TNF-α水平较存活组明显升高(P<0.05);相关分析显示,MODS患者外周血CD14-CD11b+CD33+细胞表达率与TNF-α水平和MODS评分成正相关(r分别为0.342 6、0.387 9,P<0.05)。结论外周血MDSCs水平变化可能与疾病的严重程度和预后相关。
- 刘佳魏明涂玲梁颖红龚艳杰张宜花
- 关键词：创伤后多器官功能障碍综合征全身炎症反应综合征
- 成人急性髓系白血病患者CD68、C反应蛋白、血小板计数与疗效的相关性研究
- 2023年
- 目的探讨成人急性髓系白血病(AML)患者CD68、C反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)与疗效的相关性。方法根据疗效是否为完全缓解(CR)将96例AML患者分为CR组(n=53)和非CR组(n=43)。分析疗效的影响因素及CD68、CRP、PLT与疗效的相关性。结果CR组患者CD68和CRP均明显低于非CR组,PLT明显高于非CR组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素分析显示,CD68、CRP及PLT均是AML患者疗效的独立影响因素(P﹤0.05)。Kendall分析显示,AML患者疗效与CD68、CRP均呈负相关,与PLT呈正相关(P﹤0.01)。结论CD68、CRP及PLT均是AML患者接受治疗后疗效的独立影响因素,并且CD68、CRP与疗效呈负相关,PLT与疗效呈正相关,因此在AML患者的治疗过程中,动态监测相关影响因素的变化情况可以为临床医师诊断病情提供依据。
- 龚艳杰肖笛鸣杨璐张宜花刘佳
- 关键词：急性髓系白血病CD68C反应蛋白血小板计数疗效
- 微小核糖核酸-146a对寻常型银屑病患者CD4^＋T细胞调控作用研究被引量：3
- 2015年
- 目的研究微小核糖核酸-146a（miRNA-146a）对寻常型银屑病患者外周血CD4^＋T淋巴细胞的调控，并探讨miRNA-146a在寻常型银屑病发病中的作用。方法收集寻常型银屑病患者30例和正常对照20例。采用实时定量PCR检测外周血CD4^＋T淋巴细胞miRNA-146a表达水平；免疫磁珠法分选外周血CD4^＋T淋巴细胞，将分离的细胞分为对照组、miRNA-146a组和miRNA-146a抑制物组，进行细胞培养，流式细胞术检测Th1和Th2数量；蛋白免疫印迹法和实时定量PCR分别检测IFN-1受体α（IFN-γRα）、T细胞表达T盒（T—bet）、鸟嘌呤腺嘌呤胸腺嘧啶腺嘌呤序列结合蛋白-3（GATA-3）蛋白和mRNA的表达；酶联免疫吸附试验检测血浆和体外细胞培养上清液IFN-γ、白细胞介素（IL）-4表达水平。结果寻常型银屑病患者外周血CD4^＋T淋巴细胞miRNA-146a与血浆IFN-1表达较正常对照组升高[（2．43±0．94）vs（1．05±0．23），（27．69±7．64）ng／L vs（9．75±2．81）ng／L]，差异均有统计学意义（t值分别为6．651和4．237，P均〈0．01），且miRNA-146a的表达与血清IFN-γ呈正相关（r=0．837，P〈0．01）。体外CD4^＋T淋巴细胞培养结果显示，与对照组比较，miRNA-146a组Th1数量、T-bet蛋白和mRNA表达、培养液上清IFN-γ水平显著增加，IFN-γRα蛋白表达降低，差异均有统计学意义（P均〈0．01）；Th2数量、GATA-3蛋白、GATA-3和IFN-1Rd的mRNA表达及培养液上清IL4水平无明显改变（P均〉0．05）；miRNA-146a抑制物可有效地阻断miRNA-146a对Th1细胞的调控作用。结论miRNA-146a通过影响Th1细胞的分化和功能参与对寻常型银屑病患者外周血CD4^＋T淋巴细胞的调控，在寻常型银屑病发病过程中可能发挥着一定的作用。
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张宜花
- 关键词：寻常型银屑病微小核糖核酸
- MiRNA-203在寻常性银屑病皮损的表达及其对HaCaT细胞增殖的影响
- 2017年
- 目的 研究微小核糖核酸（miRNA）-203在寻常性银屑病患者皮损中的表达，并探讨对角质形成细胞株（HaCaT细胞）增殖的影响。方法 取2014—2016年23例寻常性银屑病患者的皮损组织和相邻非皮损组织。荧光定量PCR法检测组织中miRNA-203的表达水平，并以5′端、3′端地高辛标记的探针对皮肤组织切片中目的miRNA进行原位杂交，观察miRNA-203在皮肤组织中的定位情况。将miRNA-203模拟物（miRNA-203模拟物组）和miRNA-203模拟物阴性对照（阴性对照组）分别转染HaCaT细胞，正常细胞培养组作为空白对照组，采用噻唑蓝（MTT）法、流式细胞仪和Western印迹法分别对HaCaT细胞的增殖、细胞周期及相关周期蛋白（Cyclin D1、Cyclin B1）的变化进行检测。结果 miRNA-203特异性地表达在表皮的角质形成细胞中，除细胞核外，细胞质亦有表达，且寻常性银屑病患者皮损组织中miRNA-203表达水平（1.35 ± 0.28）显著高于非皮损组织（0.52 ± 0.09），差异有统计学意义（t = 6.76，P = 0.012）。转染miRNA-203模拟物能抑制HaCaT细胞增殖（F = 9.36，P = 0.007），且空白对照组、阴性对照组和miRNA-203模拟物组HaCaT细胞增殖率均随时间的延长逐渐增加（F = 18.68，P 〈 0.001）。与阴性对照组和空白对照组相比，miRNA-203模拟物组HaCaT细胞被阻滞在G2/M期（G2/M期细胞比例：31.33% ± 4.56%比17.02% ± 3.53%、16.67% ± 3.32%，均P 〈 0.05），HaCaT细胞周期蛋白周期蛋白D1表达水平较高（1.15 ± 0.13比0.52 ± 0.05、0.56 ± 0.07，均P 〈 0.05），而周期蛋白B1水平较低（0.43 ± 0.08比0.93 ± 0.16、0.91 ± 0.0.15，均P 〈 0.05）。结论 miRNA-203可能参与了寻常性银屑病的发生发展过程。
- 梁颖红魏明刘佳龚艳杰涂玲张宜花
- 关键词：银屑病寻常性微小核糖核酸角质形成细胞细胞增殖
- 卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠CD4＋IL-17＋T细胞与CD4＋Foxp3＋调节性T细胞的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 观察卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）、外周血和淋巴液中CD4＋IL-17＋T细胞（CD4＋IL-17＋T）与CD4＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋Foxp3＋ Treg）百分比及IL-10、IL-17水平的影响及其可能机制.方法 SD大鼠60只随机分为对照组（n=15）、哮喘组（n=15）、BCG-PSN干预对照组（n=15）和BCG-PSN干预哮喘组（n=15）.哮喘组和BCG-PSN干预哮喘组使用卵白蛋白建立大鼠哮喘模型,对照组和BCG-PSN干预对照组以等量生理盐水代替卵白蛋白,BCG-PSN干预哮喘组和BCG-PSN干预对照组均使用BCG-PSN进行干预.收集各组大鼠BALF、外周血和淋巴液,采用流式细胞术检测CD4＋IL-17＋T和CD4＋Foxp3＋ Treg百分比,酶联免疫吸附法（ELISA）检测IL-10和IL-17水平.结果 各组大鼠淋巴液中CD4＋Foxp3＋ Treg百分比、IL-10水平较BALF和外周血均明显升高（均P＜0.01）,CD4＋IL-17＋T百分比、IL-17水平较BALF和外周血均明显下降（均P＜0.01）.哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋Foxp3＋ Treg百分比、IL-10水平较其余3组均显著降低,而CD4＋IL-17＋T百分比、IL-17水平较其余3组均显著升高（均P＜0.01）.BCG-PSN干预哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋Foxp3＋ Treg百分比和IL-10水平较哮喘组显著升高（均P＜0.01）,与对照组和BCG-PSN干预对照组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）.BCG-PSN干预哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋IL-17＋T细胞百分比、IL-17水平较哮喘组均显著下降（均P＜0.01）,与对照组和BCG-PSN干预对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 BCG-PSN可能通过调节哮喘大鼠外周血和淋巴液中CD4＋Foxp3＋ Treg和CD4＋IL-17＋T的百分比及相关细胞因子水平,改善机体免疫功能,从而减轻哮喘的炎性反应.
- 涂玲梁颖红魏明刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：哮喘卡介苗多糖核酸辅助性T细胞白细胞介素10白细胞介素17
