高云英 作品数:31 被引量:294 H指数:10 供职机构: 西北农林科技大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 陕西省科技攻关计划 成都军区“十一五”医学科研计划项目 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 化学工程 更多>>
陕西仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性测定 被引量:20 2005年 从陕西十县市24个大小猪场(户)腹泻仔猪病例采集186份病料中,分离并鉴定出68株致病性大肠杆菌,通过14种大肠杆菌O抗原单因子血清鉴定,证明有13种血清型(尚有1株未定型)存在,其中以O139,O101、O149,O141,O60为优势血清型,占定型菌株的71.6%。选用16种常用抗生素对32株地方代表菌株做耐药性试验:结果表明对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、新霉素高敏,林可霉素、头孢唑啉和麦地霉素等中敏,氧氟沙星、先锋霉素和链霉素等药物产生耐药;同时从高、中敏区向中敏区和低敏区过渡的趋势明显。这一结果为该省做到有效防治提供了依据。 高云英 李浩波 李琳 陈云杰 王增民 赵发苗 张景武关键词:仔猪大肠杆菌病 血清型 耐药性 致病性大肠杆菌 耐药性试验 仔猪 优势血清型 禽流感病毒抗原-抗体复合物的制备及其免疫原性 2009年 目的制备禽流感病毒抗原-抗体复合物,并检测其免疫原性。方法以H5亚型禽流感病毒的HA蛋白为抗原,其病毒的高免卵黄为抗体,将抗原与抗体按不同比例混合,制备禽流感病毒抗原抗体复合物。免疫1日龄SPF仔鸡,进行保护力试验;于免疫后不同时间检测血清HI抗体水平,并与H5亚型油乳剂灭活疫苗进行比较。结果抗原与抗体比例为1∶0.6的抗原-抗体复合物在免疫仔鸡15d后,其诱导的平均抗体水平达6.5log2,与H5亚型禽流感油乳剂灭活疫苗(6.2log2)相比,差异无统计学意义;在等量病毒攻击后,二者对仔鸡的保护率相同(93.3%)。结论制备的禽流感病毒抗原-抗体复合物具有良好的免疫原性,为研制禽流感新型复合物疫苗提供了依据。 孙瑞芹 高云英 王新卫 何宏轩关键词:禽流感病毒 H5亚型 抗原-抗体复合物 免疫原性 保护率 云南4株狂犬病毒N和G基因的克隆及测序 被引量:4 2008年 目的:认识云南狂犬病毒株N基因和G基因的结构特征及其与已知毒株的遗传相关性。方法:对2006-2007年云南曲靖(YNQJ07)、昭通(YNZT07)、楚雄(YNMD06)、保山(YNTC06)狂犬病毒株N基因和G基因进行RT-PCR扩增,克隆至pPICZαA载体进行测序,并与已知代表性毒株进行比对及系统发育分析。结果:云南狂犬病毒株均属于基因Ⅰ型毒株,YNQJ07、YNZT07、YNMD06以及近年部分广西、浙江、江苏、湖北、安徽、江西省毒株N基因和G基因核酸序列同源性分别介于97.0%-99.3%、97.4%-99.3%,与其它基因I型毒株同源性分别介于86.3%-90.2%、82.9%-93.0%。YNTC06与泰国和部分广西毒株同源性介于95.0%-95.8%,与其它基因Ⅰ型毒株同源性介于82.9%-92.9%。结论:YNQJ07、YNZT07、YNMD06属于亚组群Ⅱ毒株,YNTC06毒株属于亚组群Ⅲ毒株,云南狂犬病毒核蛋白和糖蛋白存在特异性氨基酸变异位点。 赵焕云 张文东 金卫华 杨斌 张富强 李朝仓 李刚山 宋建领 何晓辉 周建国 胡媛媛 王永贤 张应国 范泉水 李作生 高云英关键词:狂犬病毒 测序 猪繁殖与呼吸综合征的免疫学研究 被引量:21 2006年 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸症状的一种严重危害养猪业的重要疾病。其特异的免疫学特征给疫苗的设计与研制带来一定的困难,导致此病的流行和分布日益广泛,危害日益严重。近年来,国内外学者对该病原高度重视,并在其免疫学研究方面取得了重要进展,掌握了许多有价值的数据资料,特别对该病原的基本免疫学特征、体液免疫与细胞免疫特征、免疫抑制与免疫调节、参与该病免疫应答的细胞及细胞因子以及免疫病理学等方面作了深入而透彻的研究和分析。这些都为PRRS的疫苗研究和综合防制提供了新的思路。 谢印乾 王桂花 李浩波 沈志强 高云英关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 免疫 免疫病理学 紫花苜蓿耗水规律及其用水效率研究 被引量:20 2006年 归纳分析国内外不同地域、不同生产方式紫花苜蓿全生长季动态耗水试验研究结果,可以推断:需水量为450~1 100 mm,极端最高可达1 900 mm;耗水量为300~1 450 mm,极端最高可达2 245 mm;需水强度和耗水强度分别为3~7和2~7 mm/d,短期极端最高需水强度为14 mm/d;种植当年,生物产量和经济产量(含水量14%)的水分利用效率分别为8~12,9~14 kg/(mm·hm^2), 种植2 a及以上的分别为12~25和14~29 kg/(mm·hm^2). 李浩波 高云英 张景武 刘春和 余有成 惠临风关键词:紫花苜蓿 水分利用效率 猪肺炎支原体的分离及分子生物学鉴定 从山东某猪场送检的疑似猪支原体肺炎的病猪中用Friss培养基进行了猪肺炎支原体的分离,并对分离菌株进行了PCR鉴定和P46基因的克隆和序列分析,同时对培养物倍比稀释后进行了PCR扩增.结果成功分离到一株猪肺炎支原体,其P... 张锋钢 沈志强 高云英 王金良 谢印乾 管宇 刘吉山关键词:猪肺炎支原体 PCR鉴定 P46基因 分子生物学 文献传递 云南牟定狂犬病病毒株N基因和G基因序列分析 被引量:7 2008年 自英国引进3株荧光素标记的针对狂犬病毒核蛋白的单克隆抗体,建立狂犬病直接免疫荧光诊断技术。根据已知狂犬病毒核蛋白和糖蛋白基因序列,参照已发表文献,设计合成4对PCR引物和2对克隆引物,以弱毒疫苗毒株为阳性对照,建立狂犬病RT-PCR及套式PCR诊断技术。自牟定采集发病犬脑组织样品15份,免疫荧光及PCR诊断结果均为阳性。对病毒N基因和G基因全序列经RT-PCR扩增,克隆至pMD18-T载体进行测序(登录号分别为:EU095330、EU253477),并与已知代表毒株对应序列进行比对及系统发育分析,结果表明:云南牟定狂犬病毒属于基因1型和血清1型毒株,与近年从广西、浙江、江苏、湖北等省分离的毒株遗传关系密切,在系统发育树中形成同一小分支并均属于亚组群Ⅱ毒株。 赵焕云 金卫华 张文东 杨斌 李朝仓 宋建领 何晓辉 周建国 胡媛媛 王永贤 张应国 范泉水 李作生 高云英 张富强关键词:狂犬病病毒 核蛋白基因 糖蛋白基因 RT-PCR 云南牟定狂犬病诊断及病毒部分N基因测序 被引量:2 2007年 自英国引进3株荧光素标记的针对狂犬病毒核蛋白的单克隆抗体,建立狂犬病直接免疫荧光诊断技术。根据已知狂犬病毒核蛋白(N或NP)基因序列,设计合成4对引物,建立狂犬病RT-PCR及套式PCR诊断技术。自牟定采集发病犬脑组织样品15份,免疫荧光及PCR诊断结果均为阳性。对PCR产物进行纯化后,克隆至pMD18-T载体测序(基因库登录号:EU095330),并与已知代表毒株对应序列进行比对及系统发育分析,结果表明:云南牟定狂犬病毒属于基因1型和血清1型毒株,与2006年广西发病犬分离毒株遗传关系密切,病毒部分N基因核苷酸及推导的氨基酸序列同源性分别为97.4%和99.0%。 赵焕云 张文东 金卫华 杨斌 李朝仓 宋建领 何晓辉 周建国 胡媛媛 王永贤 张应国 范泉水 李作生 高云英 张富强关键词:狂犬病 核蛋白基因 测序 猪IFN-γ mRNA竞争性RT-PCR定量检测方法的建立 被引量:1 2006年 无菌分离的猪外周血单个核细胞(PBMC),经ConA体外刺激培养15 h后提取细胞总RNA。以此总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增到了435 bp的IFN-γ基因。把扩增到的IFN-γ基因与pMD18-T载体连接,构建了pMD-IFN435重组质粒。用另一对引物对重组质粒pMD-IFN435内部进行PCR扩增,得到了257 bp(含PstⅠ酶切位点)的基因片段,将此基因片段连接到pMD18-T载体上构建了pMD-IFN257重组质粒。将pMD-IFN257双酶切(PstⅠ+SalⅠ)后回收的目的片段与pMD-IFN435双酶切(PstⅠ+SalⅠ)后回收的目的片段连接,得到了含有367bp目的片段的重组质粒pMD-IFN367,即内标准DNA模板。以定量后的pMD-IFN367与2倍梯度稀释的pMD-IFN435进行竞争PCR扩增,建立了能够准确、方便定量检测猪IFN-γmRNA的标准竞争曲线的线性回归方程(y=0.414x-1.864)。 谢印乾 高云英 沈志强 朱和鸣 管宇 王茹 张锋钢关键词:IFN-Γ基因 RT-PCR 猪繁殖与呼吸综合症研究进展 被引量:34 2002年 综述了猪繁殖与呼吸综合症,包括病源PRRSV病毒(LV)及其基因特征、流行病学特点、发病机理。介绍了该病的临床诊断、病理学诊断及病毒分离技术和血清诊断方法,同时提出了该病的防治措施。 高云英 贺玉胜 刘秀琴 李浩波 黄建文 毛跟年 赵发苗关键词:猪繁殖 病毒 病源