马辉
- 作品数：25 被引量：71H指数：5
- 供职机构：郑州牧业工程高等专科学校更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金河南省科技攻关计划河南省政府决策研究招标课题更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学经济管理更多>>
- 多重实时定量PCR快速检测PRRSV、CSFV和PCV2混合感染方法的建立被引量：7
- 2013年
- 根据TaqMan复合荧光探针设计原则,应用Primer 5.0和Oligo 6.0软件设计检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的特异性引物和探针,优化反应条件,建立了检测PRRSV、CSFV和PCV2的单项和多重Real-time PCR方法。结果表明,建立的方法具有高度特异性,与其他病原检测无明显交叉反应;对阳性质粒和病毒的最低检测量分别为<101个拷贝和<1TCID50/反应,检测灵敏度比常规PCR检测高100倍。通过对20份临床样本进行检测,多重Real-time PCR检测结果和单项Real-time PCR检测结果一致。建立的多重Real-time PCR方法可用于同时快速检测PRRSV、CSF和PCV2的混合感染,具有灵敏、特异、重复性好并能对样品进行定量检测等优点。
- 赵绪永宁豫昌赵丽马辉
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒猪圆环病毒2型
- 益生菌和绞股蓝联合使用对肉仔鸡生产性能的影响被引量：7
- 2012年
- 为探讨益生菌与绞股蓝联合使用在肉仔鸡生产中的协同作用效果,将乳杆菌微胶囊、枯草芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌粉和中草药绞股蓝按一定比例混合复配成益生菌-绞股蓝复合微生态制剂;在1日龄AA肉仔鸡基础日粮中分别添加1 g/kg的益生菌制剂、5 g/kg的中草药绞股蓝粉剂和6 g/kg的益生菌-绞股蓝复合微生态制剂,对肉仔鸡生长性能、免疫器官指数、新城疫抗体效价和肠道菌群变化进行分析。结果表明:益生菌-绞股蓝复合微生态制剂组与益生菌组、绞股蓝组相比,可以显著提高肉仔鸡生产性能,在整个试验期增重分别提高了1.45%和6.73%;饲料增重比分别下降了5.45%和9.05%;显著促进机体免疫器官发育,在整个试验期法氏囊指数分别提高26.14%和32.19%;脾脏指数分别提高32.84%和45.6%;显著提高鸡新城疫抗体效价(P<0.05),明显改善肉仔鸡肠道菌群平衡(P<0.05)。说明益生菌和绞股蓝联合使用对于提高肉仔鸡生产性能、增强机体免疫力和改善肠道微生态平衡等方面均具有较好协同作用。
- 宁豫昌乔宏兴郑鸣马辉
- 关键词：益生菌绞股蓝复合微生态制剂肉仔鸡
- 犬细小病毒VP2主要抗原表位区的原核表达载体构建及诱导表达被引量：2
- 2012年
- 利用PCR扩增CPV-2bVP2蛋白的主要抗原表位区基因,并将该基因片段克隆到原核表达载体pGEX-6P-1上,通过诱导表达条件的摸索,实现了VP2蛋白主要抗原表位区在大肠杆菌中的高效表达,SDS-PAGE检测表达的融合蛋白主要以可溶形式存在,并利用亲和层析得到融合蛋白。
- 马辉赵绪永
- 关键词：犬细小病毒VP2原核表达
- 鸡β-防御素-3在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性测定被引量：7
- 2009年
- 采用RT-PCR方法从鸡外周血淋巴细胞中扩增鸡β-防御素-3成熟肽基因,将其克隆到酵母表达载体pPICZα-A的分泌信号肽基因下游。线性化后的重组质粒电击转化毕赤酵母宿主菌GS115,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定后,得到重组酵母菌。阳性转化菌经甲醇诱导后,SDS-PAGE和western blot鉴定结果表明,在毕赤酵母中得到分泌性表达产物,分子量约为8.9ku,活性检测表明其具有显著的抑菌活性。
- 赵绪永马辉赵丽朱礼倩李清州
- 关键词：毕赤酵母分泌表达
- 猪血纤维连接蛋白的提取及其免疫血清的制备
- 2009年
- 用猪血进行纤维连接蛋白(FN)等多种活性物质联合提取的工艺研究。1)采用分段盐析、亲和层析等方法从猪血中分离和纯化纤维连接蛋白;以标准品为对照,将提取的FN样品用诊断试剂盒、波长扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳、细胞生长性能等方法进行质量检测,结果表明提取的猪血纤维连接蛋白的含量、对细胞的贴壁率、增殖率都与标准品相接近,两者无显著差异(P>0.05);样品FN电泳图谱、波长扫描图谱与标准品相一致,说明提取工艺达到了生产猪血纤维连接蛋白的标准要求。2)以上述提取的猪血FN样品为抗原,制备兔抗猪FN的免疫血清,其效价最高达1∶128,说明提取的猪FN可以诱发机体产生特异性抗体。结论认为:本研究从猪血中联合提取FN的生产工艺方法可行,为FN的规模化生产和猪血的综合利用与开发提供参考。
- 王永芬吴学军李华玮马辉陆艳琦王德亮
- 关键词：免疫血清
- 浅谈高职校企合作存在的问题与对策被引量：3
- 2012年
- 以学生就业为导向,大力推行工学结合校企合作的培养模式,是近年来高职院校教学改革研究工作的重点和热点之一。但由于传统教育模式的潜在影响,使目前工学结合校企合作的新型培养模式在运行过程中仍存在结合不紧、流于形式等诸多问题。本文就存在的问题提出了以学生就业为导向,开展全方位、多层次的校企立体合作,建立和健全产学研一体化为特色的高职教育体系,提高学生的就业竞争力,为其将来就业提供保障。
- 李华玮宁豫昌马辉
- 关键词：高职校企合作学生就业
- 高职基因操作技术课程的改革与实践被引量：2
- 2010年
- 赵绪永马辉
- 关键词：技术课程应用型人才生物经济时代高职基因工程药物
- 猪细小病毒NS1抗原表位的真核表达及ELISA方法的建立被引量：2
- 2012年
- 以猪细小病毒NS1抗原表位的真核表达及ELISA建立为目的,以猪细小病毒基因组DNA为模板,扩增获得PPVNS1主要抗原表位基因,将其插入到真核表达载体pPICZα-A中,获得重组质粒pPICZα-A-NS1。电转化后将重组毕赤酵母菌株诱导表达,SDS-PAGE检测证实重组蛋白获得了高效表达,Western blot实验表明表达产物具有良好的反应原性。将纯化后的重组蛋白包被酶标板,经棋盘法优化,初步建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原最佳包被浓度为1.9μg/mL,血清最佳稀释度为1∶80,阳性判断标准定为OD待检血清>0.4且OD待检血清/OD标准阴性值>2.0。用该方法对猪血清样品进行检测,结果显示本方法与HI试验的符合率达91.2%,与国外同类试剂盒的符合率为92.1%,该间接ELISA方法特异性强、敏感性高,可用于猪细小病毒病感染抗体的检测。
- 马辉赵绪永边传周
- 关键词：猪细小病毒NS1基因真核表达间接ELISA
- 一种畜禽用转移因子常温保存液
- 本发明公开了一种畜禽用转移因子常温保存液，由以下重量份数的组分组成：甘油35～65份，甘氨酸10～15份，L-精氨酸5～10份，多聚蛋白胨20～30份，乙二胺四乙酸1～2份，聚乙烯吡咯烷酮30～50份，蔗糖40～60份，...
- 乔宏兴胡晓波马辉索江华
- 文献传递
- 鹅副黏病毒L基因片段的克隆及其主要抗原表位区的原核表达
- 2013年
- 利用PCR扩增鹅副黏病毒编码L蛋白的主要抗原表位区基因片段,并将该片段克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,通过诱导表达条件的摸索,实现了L蛋白主要抗原表位区在大肠杆菌中的高效中的表达,SDS-PAGE检测表达的融合蛋白主要以可溶形式存在,Western blot分析重组蛋白具有良好的抗原性,并利用亲和层析得到融合蛋白。
- 马辉边传周赵绪永郑宝亮郑鸣
- 关键词：鹅副黏病毒原核表达
