顾韬
- 作品数：19 被引量：17H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术生物学更多>>
- 重组腺相关病毒介导人端粒酶逆转录酶基因转染对人髓核细胞功能的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:研究重组腺相关病毒介导人端粒酶逆转录酶基因(recombinant adenoassociated virus vector-me-diated human telomerase reverse transcriptase,rAAV-hTERT)转染对体外培养人髓核细胞功能的影响。方法:利用机械与酶消化的方法获得均一性的人椎间盘髓核细胞,将构建好的rAAV-hTERT转染P2代体外单层培养的髓核细胞。用重组腺相关病毒-增强型绿色荧光蛋白(recombinant adenoassociated virus vector-mediatedenhanced green fluorescent protein,rAAV-EGFP)作为标记基因观察细胞转染效率,按感染复数(multiplicity ofinfection,MOI)103、104、105病毒基因组拷贝数/细胞(vector genomes/cell,v.g/cell)设组,流式细胞仪检测,筛选病毒转染的最佳MOI;设立rAAV-hTERT转染组、AAV空病毒转染组及空白细胞对照组,用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reareaction,RT-PCR)及免疫印迹(Western-blot)方法检测rAAV-hTERT转染后hTERT基因在髓核细胞内的表达,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR)及酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent,ELISA)检测髓核细胞合成Ⅱ型胶原及蛋白多糖能力的变化。结果:rAAV-EGFP转染细胞后第7天时,MOI为105v.g/cell组转染效率可达73.9%,明显高于MOI 103、104v.g/cell组(P<0.05);rAAV-hTERT转染组在转染后的第7、60、90、120天均可检测到hTERT基因的表达,而其他两组则无表达;转染rAAV-hTERT后120d之前,rAAV-hTERT转染组分泌蛋白多糖及Ⅱ型胶原较其他两组均明显增高(P<0.05),而两对照组之间则始终无明显差异(P>0.05)。结论:rAAV-hTERT能成功转染人椎间盘髓核细胞并正确表达,rAAV-hTERT转染能有效延长髓核细胞分泌Ⅱ型胶原及蛋白多糖功能。
- 吴剑宏阮狄克王德利张超何勍王超锋张燕辛洪奎顾韬徐成刘玥
- 关键词：髓核细胞腺相关病毒
- 不同类型椎间盘退变动物模型的评价与比较被引量：6
- 2015年
- 椎间盘退变发生机制以及再生和修复一直是脊柱外科研究的热点和重点,而作为重要研究载体的椎间盘退变动物模型承担着从基础理论到临床实践,从临床问题再到实验论证的不可或缺的重要角色。经过近80年来的不断研究,椎间盘退变动物模型已有数十种构建方法,主要分为生物力学改变、生物结构破坏、自发退变和全身疾病4大类型[1],每个类型又包含几种类似的造模方法。这些造模方式在模型设计、可靠性、操作性、
- 顾韬张超何勍阮狄克
- 关键词：椎间盘退行性变
- 人端粒酶逆转录酶基因转染人髓核细胞的安全性研究
- 2012年
- 目的评价人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因转染对人椎间盘髓核细胞"安全性"的影响。方法将构建好的重组腺相关病毒人端粒酶逆转录酶基因(recombinant adeno-associated virus vec-tor-mediated hTERT gene,rAAV-hTERT)按感染复数(multiplicity of infection,MOI)105 v.g每细胞转染体外培养二代髓核细胞。设立rAAV-hTERT转染组,AAV空病毒转染组及未转染组;利用RT-PCR及Western-blot检测转染后hTERT基因的表达;对体外培养120 d的细胞进行染色体核型分析;将3组细胞(100μL,3×107/mL)分别注入裸鼠腋下检测其成瘤性,以人Hela细胞为阳性成瘤实验对照。结果成功检测出rAAV-hTERT转染髓核细胞后hTERT基因的表达;G-带核型分析未见染色体结构异常克隆;3组细胞均未观察到裸鼠体内肿瘤形成。结论 rAAV-hTERT能成功转染人椎间盘髓核细胞并正确表达,rAAV-hTERT转染髓核细胞在有限的体外培养过程中是安全的,可为进一步的在体研究提供安全性证据。
- 吴剑宏阮狄克王德利张超何勍王超锋张燕辛洪奎顾韬徐成刘玥
- 关键词：腺病毒科骨髓细胞基因疗法致癌性试验
- 犬椎间盘中期退变的实验研究
- 目的 将hBMP7通过腺相关病毒(rAAV2)转染修饰同种异体髓核细胞后,在犬椎间盘退变动物模型的基础上,在体观察并探讨其延缓椎间盘中期退变进程的能力.方法 12只1岁龄雌性杂种犬,采用16号骨髓穿刺针进行穿刺造模.取1...
- 顾韬何勍阮狄克
- 关键词：动物模型椎间盘退变髓核细胞2型重组腺相关病毒
- 腰椎间盘退变动物模型生物力学造模机
- 本发明公开腰椎间盘退变动物模型生物力学造模机，其结构包括固定架，具有上部身躯固定机构和下部身躯固定机构的动物捆绑固定装置，和控制上部身躯固定机构移动的移动控制装置。所述固定架包括顶部框架、底座及连接顶部框架和底座的一对立...
- 顾韬阮狄克贾治伟徐成李超
- 文献传递
- 生物力学因素对椎间盘退变的影响及机理被引量：9
- 2011年
- 椎间盘退变由多因素引起．现有的研究结果提示其与生物力学、创伤、职业、肥胖、遗传等有关，但确切的发生机制仍不明确。生物力学因素是目前被广大学者所认可的引起椎间盘退变的重要因素。流行病学调查显示，重体力劳动、提重物、长时间驾驶及肥胖等因素是与椎间盘退变相关的主要危险因素；从事机床、卡车司机及搬运重物的职业是腰痛及椎间盘突出的危险因素，且患椎间盘突出症的几率是一般成人的3倍刚。作者从基础及临床角度对生物力学因素在椎间盘退变中所起的作用作一综述。
- 顾韬阮狄克
- 关键词：生物力学因素椎间盘退变椎间盘突出症流行病学调查重体力劳动
- 骨水泥修复颈椎前路椎体螺钉钉道的生物力学研究
- 2015年
- 目的评价聚甲基丙烯酸甲酯（Polymethylmethacrylate,PMMA）修复颈椎前路椎体螺钉钉道的生物力学效果。方法防腐成人颈椎标本（C3~7）共30个,分3组：正常骨密度组（A组）、骨质疏松组（B组）,骨质疏松修复组（C组）,各组10个标本,测试疲劳前后的最大轴向拔出力。A、B对照组椎体二侧钉孔均放置4 mm的椎体螺钉,随机选择一侧行即时最大拔出力实验,另一侧在疲劳实验（2 Hz,20 000次）后行最大拔出力实验。C组（实验前需进行螺钉拔松实验）注入PMMA 0.6~1.0 m L,并拧入螺钉,随机选择一侧进行即时和疲劳后最大拔出力实验。结果 A、B、C组即时拔出力明显高于疲劳后拔出力,差异具有统计学意义（P〈0.05）,C组疲劳后与A组即时拔出力比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,但高于B组即时拔出力,差异具有统计学意义（P〈0.05）。即时拔出力C组〉A组〉B组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。疲劳后拔出力C组〉A组〉B组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。PMMA注射后未发现钉道渗漏。结论 PMMA钉道修复能够明显增强椎体螺钉的即时稳定性和抗疲劳能力,并且安全有效,适用于螺钉松动和拔出的修复固定。
- 陈利帮陈春顾韬
- 关键词：颈椎聚甲基丙烯酸类生物力学内固定器
- CT引导下髓核钳取技术制备犬椎间盘退变模型的实验研究
- 2012年
- 目的探索CT引导下使用活检枪髓核钳取技术构建犬椎间盘退变模型可行性,比较不同型号活检枪制备犬椎间盘退变模型效力。方法选取6只1岁龄雌性杂种犬。将犬腰1-2、腰3-4及腰5-6椎间盘纳入退变模型制备实验研究,并行随机分组。A组使用18号活检枪;B组使用20号活检枪;C组使用24号活检枪。行经皮椎间盘穿刺。术后4周及12周分别行核磁及数字平片检查,评估各组椎间盘高度变化及髓核含水量状态;术后12周处死动物,行组织学分析。结果每组取出髓核组织量A组(3.0±0.53)mg、B组(2.01±0.34)mg和C组(3.0±0.53)mg。平均操作时间为1.4 h;出血量为5～10 ml。术前椎间盘高度数测量做为基线,3组间高度比较无明显差别(P>0.05)。术后3组椎间盘高度均有不同程度降低,但组内差异及同一时间点组间差异无统计学意义(P>0.05)。3组中,MRI相对信号强度均出现下降,与术前对比无统计学差别(P>0.05)。术后第12周,A组MRI相对信号强度出现明显下降,与B组和C组相比下降程度具有统计学意义(P>0.05);与术前相比,术后第12周A组和B组降低程度均有统计学意义(P<0.05)。结论 CT引导下活检枪髓核钳取技术可用于犬椎间盘退变模型制备;20号活检枪制备的退变模型在12周观察期内显示出较为缓和、重复性高、可信性强的退变进程,适用于椎间盘退变生物治疗研究。
- 石志远顾韬张超王德利阮狄克
- 关键词：椎间盘退变动物模型
- 颈椎后纵韧带交感神经兴奋的功能学效应及在颈性眩晕发病中的作用探讨
- 目的 在前期颈椎后纵韧带上交感神经分布及解剖学研究的基础上,进一步探索其在受刺激后的功能学效应及其在颈性眩晕发病中的可能作用.方法 颈前路椎体次全切术良好暴露家兔颈椎后纵韧带,对其进行电刺激,超声多普勒血流计同时记录颈内...
- 顾韬王新伟阮狄克袁文
- 模拟人脊柱生物力学及运动学特点无创性构建犬椎间盘退变模型初步报告
- 目的 脊柱外科领域目前尚缺乏一个能较好反映人类椎间盘退变病因学及发病机理的理想动物模型,是一直限制其学科发展的重要障碍和瓶颈.现有动物模型各有优弊,但存在共同缺陷:一为有创造模,破坏了椎间盘及附属解剖学结构,和人类椎间盘...
- 顾韬阮狄克石志远王德利
- 关键词：椎间盘退变生物力学运动学
