韦三华
- 作品数:69 被引量:185H指数:7
- 供职机构:第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 肾综合征出血热患者血清汉坦病毒基因的PCR-ELISA方法建立被引量:2
- 2002年
- 目的 建立检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清标本中HV基因的PCR ELISA方法。方法 设计并合成互补于HVS基因片段的标记引物 ,对 10 8例HFRS患者血清进行巢式RT PCR扩增 ,并用酶免方法分析扩增产物。结果 10 8例患者不同病日采集的血清标本的巢式RT PCR平均检出率仅为 6 2 0 % ,而PCR ELISA平均检出率为 81 5 %。结论 PCR
- 韦三华白雪帆潘蕾李光玉陈红梅
- 关键词:肾综合征出血热多聚酶链反应汉坦病毒PCR-ELISA免疫诊断
- 大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌产AmpC酶的检测方法比较被引量:1
- 2007年
- 目的:探讨适用于临床微生物常规检测产AmpC酶菌株的方法,为指导临床合理选用抗生素及监控产酶株的流行提供依据。方法:用Tris-EDTA纸片法和聚合酶连反应(PCR)2种试验检测AmpC酶并进行比较。结果:大肠埃希氏菌42株及肺炎克雷伯氏菌18株共60株中,Tris-EDTA纸片法检测出产AmpC酶30%(18株),PCR法为28%(17株)。Tris-EDTA纸片法与PCR法符合率(98.3%),敏感率为100%,特异性为97.8%。结论:Tris-EDTA纸片法简便实用。可作为产AmpC酶菌株的检测方法在基层临床微生物室应用。
- 汪定成刘原张青沈建军韦三华张惠中
- 关键词:大肠埃希氏菌肺炎克雷伯氏菌AMPC酶
- HCV多中和抗原表位嵌合病毒样颗粒免疫获得血清内中和抗体评价被引量:1
- 2017年
- 目的:纯化的HCV多中和抗原表位及HCV包膜蛋白E2嵌合的HBV S抗原病毒样颗粒免疫新西兰兔,测定免疫血清内的中和抗体。分析中和抗体对HCVpp感染Huh7.5的中和作用。方法:纯化的HCV多中和抗原表位及包膜蛋白E2嵌合的HBV S抗原病毒样颗粒(VLPs-MEp S、VLPs-E2S)10μg皮下接种新西兰兔,间隔2周共免疫3次,采集不同时间免疫兔血清,ELISA方法测定血清内的抗体,PBS组作为对照;制备1b型HCVpp,观察血清抗体对HCVpp感染Huh7.5的中和作用,对免疫血清保护性进行初步评价。结果:免疫后血清中产生一定水平的中和抗体,血清中和抗体测定VLPs-MEp S明显高于VLPs-E2S(P<0.05)。VLPs-MEp S与VLPs-E2S组均显著高于对照PBS组(P<0.01)。对HCVpp抑制作用,VLPs-MEp S高于VLPs-E2S组(P<0.05),最高中和率可达61.49%,二者均高于对照组(P<0.01)。结论:嵌合病毒样颗粒免疫新西兰兔后产生一定水平中和抗体,该中和抗体具有保护作用,为研发中和抗体表位疫苗奠定基础。
- 王晓岩张海雷迎峰林芳崔颖李斌张惠中韦三华
- 关键词:表位病毒样颗粒中和抗体免疫
- 嵌合HCV串联多表位的乙肝S基因真核载体构建及表达
- 2016年
- [目的]构建丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)串联多中和抗原表位与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)S抗原嵌合基因真核表达质粒,并在293T细胞中进行表达。[方法]将HCV基因中高度保守且具有广谱交叉中和活性的三个表位和一个HVR1模拟表位串连。串联表位嵌合于HBV S基因的氨基端胞外区,形成嵌合基因MEpS;将基因克隆至真核表达载体pCI-neo中,构建重组质粒pCI-MEpS。将质粒转染至293T细胞中,间接免疫荧光及Western Blot检测嵌合基因的表达情况。[结果]重组质粒经双酶切证实构建正确;pCI-MEpS转染的293T细胞胞浆内可见较强的绿色荧光,Western Blot显示pCI-MEpS在相对分子量约38 kDa处可见蛋白条带。[结论]构建了HBV S抗原嵌合HCV串联多中和抗原表位的重组质粒,成功在293T细胞中表达,为制备嵌合HCV串联多中和抗原表位的HBV S抗原VLPs,研究嵌合VLPs免疫动物后产生的中和抗体的保护作用奠定了实验基础。
- 王晓岩雷迎峰李翠林芳崔颖舒放张惠中韦三华
- 关键词:S抗原
- 中药夏枯草对人膀胱癌细胞FasL基因表达和侵袭能力的影响被引量:7
- 2010年
- 目的:研究中药夏枯草对人膀胱癌细胞系T24细胞FasLmRNA表达及对其侵袭能力的影响。方法:根据MTT法得到中药夏枯草对T24细胞的半数有效抑制浓度(IC50),确定药物作用浓度。T24细胞分别经中药夏枯草不同浓度(0.5IC50、IC50)作用后,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测中药夏枯草作用前后人膀胱癌细胞系T24细胞FasLmRNA的变化;应用Transwell细胞侵袭试验检测中药夏枯草对T24细胞侵袭能力的影响。结果:中药夏枯草处理后较处理前T24细胞FasLmRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05);而且FasLmRNA表达水平随中药夏枯草作用浓度增加显著上调,中药夏枯草不同浓度组比较均有显著性差异(P<0.05);随中药夏枯草作用浓度升高,T24细胞侵袭能力明显增强,不同浓度组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:中药夏枯草在一定时间内均可上调人膀胱癌细胞系T24细胞FasLmRNA的表达,而且这种上调作用在一定范围内呈剂量依赖性,可使膀胱癌细胞的侵袭能力增强。
- 张静黄晶张婧程芳史欢欢赵绒马巍高军张惠中韦三华
- 关键词:膀胱癌
- 五项肿瘤标志物肺癌患者中表达水平分析
- 目的.探讨五项肿瘤标志物在肺癌患者种的表达及应用意义.方法:采用化学发光酶联免疫法检测121例不同肺癌患者血清中五项临床上常用的肿瘤标志物(CEA、CA125、CA211、FRT和NSE)的水平.结果:在121肺癌患者中...
- 张婧韦三华高军
- 关键词:肺癌肿瘤标志物
- HFRS患者血清中汉坦病毒RNA的微孔板杂交检测
- 肾综合征出血热(HFRS)是由布尼亚病毒科汉坦病毒属
(Hantaviruses,HV)病毒引起的急性传染病。是以发热、出血、肾脏
损害为主要临床特征的自然疫源性疾病。该病的疫...
- 韦三华
- 文献传递
- 汉滩病毒核蛋白羧基端多肽真核表达载体的构建及其表达产物的鉴定
- 2002年
- 目的 探讨汉滩病毒 (HTNV)核蛋白羧基端多肽的抗原性 ,为建立分型检测方法奠定基础 .方法 设计并合成 S基因编码区及其 3 端 82 5 bp片段引物 ,用 PCR方法从PBV2 2 0 - S2 2原核质粒中扩增出目的片段 ,应用 TA克隆将其插入 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO载体中 ,并通过脂质体转染至 Vero细胞中进行瞬时表达 ,表达产物用间接免疫荧光法进行鉴定 .结果 成功构建了 pc DNA3.1- S及 pc DNA3.1- S- C真核表达载体 ,间接免疫荧光法可检测到真核表达质粒转染的 Vero细胞表达的核蛋白羧基端多肽 .结论 pc DNA3.1- S及 pc DNA3.1- S- C真核表达载体有较高的转染效率 ,能在宿主细胞中表达 。
- 李光玉白雪帆黄长形潘蕾赵玉玲陈红梅韦三华杨为松
- 关键词:汉滩病毒核衣壳蛋白多肽抗原真核表达
- 尿肾功早期损害检测指标在慢性肾病诊断、监测中的应用
- 目的:检测慢性肾病尿肾功早期损伤指标,探讨其在慢性肾病诊断及监测中的意义.方法:将155例经肾穿刺确诊的肾病患者根据病因分组,检测其尿中微量白蛋白(MA)、α1-微球蛋白(α1-M)、β2-微球蛋白(β2-M)、转铁蛋白...
- 高军张惠中张婧张静马巍程芳李倩赵绒黄晶韦三华
- 关键词:肾功能慢性肾病
- 乙肝病毒preS1基因与截短C基因真核表达载体构建及表达被引量:2
- 2005年
- 目的建立乙型肝炎病毒(HCV)preS1基因与截短C基因真核表达载体,并在CHO细胞中瞬时表达。方法PCR方法扩增HBV核心区羧基端部分缺失的基因片段和preS1全基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-)后测序鉴定,并通过脂质体瞬时转染CHO细胞。结果构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-Ct-preS1,成功转染CHO细胞,间接免疫荧光和RT-PCR证实pcDNA3.1(-)-Ct-preS1在CHO中表达截短的核心基因和preS1基因融合蛋白。结论成功构建preS1基因与截短C基因真核表达载体,可在CHO细胞中瞬时表达,为深入研究HBV基因免疫奠定了基础。
- 胡兴斌尹文韦三华雷迎峰吕欣杨敬孙梦宁徐志凯
- 关键词:基因免疫转染真核表达