陈琰
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 左旋多巴对c17.2神经干细胞的毒性作用及培高利特的保护作用被引量：2
- 2007年
- 目的探讨左旋多巴对c17.2神经干细胞的毒性作用和培高利特的保护作用。方法c17.2神经干细胞加左旋多巴和培高利特培养不同时间,观察各组细胞的存活率、凋亡率和p53、Bax、Bcl-2、核因子(NF)-κBp65、细胞色素C、半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)和caspase-3活性片段的表达。结果左旋多巴可使c17.2神经干细胞活性降低,与剂量相关(均P<0.05),Brdu标记显示200μmol/L左旋多巴可使细胞增殖活力下降,与时间相关(P<0.05),作用12h、24h后的Annexin-V染色荧光显微镜和流式细胞仪可检测到凋亡细胞,Western Blot显示p53、Bax、细胞色素C、caspase-3和caspase-3活性片段表达量增加。培高利特能部分保护神经干细胞免受左旋多巴的影响(均P<0.05),并能部分抑制左旋多巴引起的细胞凋亡(均P<0.05)。结论大剂量左旋多巴对c17.2神经干细胞具有毒性作用,呈剂量和时间依赖性。左旋多巴通过抑制DNA合成影响细胞增殖,并通过活化p53、Bax、细胞色素C、caspases-3途径促进细胞凋亡,培高利特可部分拮抗左旋多巴的毒性作用。
- 刘卫国陈生弟汪锡金陈琰陆国强梁梁徐洁懿
- 关键词：左旋多巴培高利特C17.2神经干细胞细胞凋亡神经保护
- Neurturin基因转染c17·2神经干细胞移植保护帕金森病大鼠模型的实验研究被引量：11
- 2006年
- 目的探讨neurturin(NTN)基因转染c17·2神经干细胞脑内移植后对帕金森病大鼠模型的保护作用。方法构建高表达NTN蛋白的NTN-c17·2细胞克隆。实验分成NTN(12只)、空质粒(Mock,9只)和PBS组(9只),分别在各组大鼠的纹状体区移植入NTN-c17·2、Mock-c17·2和PBS,16d后再注入6-羟多巴胺(6-OHDA)。通过免疫组化、原位杂交、旋转行为和神经递质变化观察c17·2神经干细胞的分化,NTN基因的表达和NTN蛋白的保护作用。结果NTN-c17·2细胞移植后,细胞分化但仍持续分泌NTN蛋白。NTN蛋白可逆向运输到黑质,保护酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元免受6-OHDA的损害。动物模型旋转行为动态观测显示NTN的保护作用至少持续了4个月,NTN组要明显好于Mock和PBS组。移植后10个月,NTN和Mock组动物移植侧与健侧纹状体的神经递质如多巴胺浓度比值分别为95%(P<0·05)和93%(P<0·05),PBS组为75%。结论用带有NTN基因的神经干细胞移植治疗帕金森病,显示出良好的保护效果。
- 刘卫国陈生弟陆国强李彪王宝奇陈琰杜芸兰
- 关键词：干细胞移植神经组织蛋白质类帕金森病转染
- Nurr1基因的克隆及其在C17.2神经干细胞中的表达被引量：2
- 2003年
- 目的 :通过克隆Nurr1基因并在神经干细胞中表达 ,探讨其对多巴胺能神经元生长、发育的影响 ,为治疗神经系统变性疾病 ,特别是帕金森病提供基因工程细胞。 方法 :采用RT PCR (reversetranscription polymerasechainreaction)方法获取Nurr1cDNA ,并克隆至pcDNA3.1 hygro载体中 ,经酶切及测序鉴定正确 ;再将Nurr1基因经Lipofectamine2 0 0 0转染 ,在C17.2神经干细胞中稳定表达。结果 :经反转录多聚酶链反应 (RT PCR)及WesternBlot印迹分析、鉴定Nurr1基因mRNA及蛋白表达正确。 结论 :Nurr1基因成功导入神经干细胞并表达 ,为实施基因工程细胞移植治疗PD奠定了基础。
- 刘卫国陈生弟李彪陈琰孙秀陆国强
- 关键词：NURR1基因基因克隆C17.2神经干细胞基因表达帕金森病
- neurturin基因转染c17．2神经干细胞移植治疗帕金森病模型大鼠的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨neurturin（NTN）基因转染c17．2神经干细胞脑内移植后对帕金森病（PD）大鼠模型的治疗作用，并探讨神经干细胞介导的基因治疗方法的有效性。方法在构建成功高表达NTN蛋白NTN-c17．2细胞克隆的基础上，分别在6-羟多巴胺单侧模型大鼠的纹状体区移植入NTN-c17．2、Mock-c17．2和磷酸缓冲液（PBS），通过免疫组化、旋转行为变化和高效液相色谱监测观察c17．2神经干细胞的分化，NTN基因的表达和NTN蛋白的治疗作用。结果NTN-c17．2细胞移植后，标记抗原巢蛋白（nestin）逐渐消失，细胞分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞，但仍持续分泌NTN蛋白。动物模型旋转行为动态观测和高效液相色谱法（HPLC）检测都提示NTN-c17．2和Mock-c17．2好于PBS组，两组之间差异无统计学意义（P＞0．05），RT-PCR和免疫组织化学检测提示c17．2神经干细胞能产生多种神经营养因子，移植后部分细胞可分化成酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经细胞。结论用带有NTN基因的神经干细胞移植治疗PD，显示出一定的治疗效果，然而，这种治疗作用主要和神经干细胞分泌的多种神经营养因子和移植后的细胞分化有关，NTN蛋白可以增强这种作用。
- 刘卫国陈生弟陆国强李彪王宝奇陈琰杜芸兰
- 关键词：干细胞移植基因帕金森病神经生长因子类
- 左旋多巴对C17.2神经干细胞的毒性作用及司来吉兰的神经保护作用被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨左旋多巴对C17.2神经干细胞的毒性作用和司来吉兰对其的拮抗作用。 方法 采用MTT法检测不同剂量左旋多巴对C17.2神经干细胞的毒性作用 ,用Brdu标记检测左旋多巴对细胞增殖的影响 ,用透射电镜、Annexin V染色荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡 ,用WesternBlot检测Caspase3及其活性片段 ;相同条件下同时检测司来吉兰的保护作用。结果 MTT显示左旋多巴可使C17.2神经干细胞活性降低 ,与剂量相关 (P <0 .0 5 ) ,Brdu标记显示 2 0 0 μmol/L左旋多巴可使细胞增殖活力下降 ,与时间相关 (P <0 .0 5 ) ,作用 12及 2 4h后的透射电镜、Annexin V染色荧光显微镜和流式细胞仪可检测到凋亡细胞 ,WesternBlot显示Caspase 3表达量增加 ,并逐渐被切割成活性片段。司来吉兰能部分保护细胞免受左旋多巴的影响 (P <0 .0 5 ) ,并能部分抑制左旋多巴引起的细胞凋亡 (P <0 .0 5 )。 结论 大剂量左旋多巴对C17.2神经干细胞具有毒性作用 ,呈剂量和时间依赖性。毒性剂量的左旋多巴可通过抑制DNA合成影响细胞增殖 ,并通过活化Caspases 3促进细胞凋亡 ,司来吉兰可部分拮抗上述作用。
- 刘卫国陈生弟陈琰陆国强梁梁徐洁懿
- 关键词：左旋多巴C17.2神经干细胞神经毒性司来吉兰神经保护
- Neurturin基因转染C17.2神经干细胞移植保护帕金森病大鼠模型的实验研究
- 目的探讨Neurturin(NTN)基因转染C17.2神经干细胞脑内移植后对帕金森病(PD)大鼠模型的保护作用,观察神经干细胞介导的基因治疗的有效性。方法构建pcDNA3.1-hygro-NTN质粒,转染入C17.2神经...
- 陈生弟刘卫国陆国强李彪王宝奇陈琰杜芸兰
- 关键词：帕金森病大鼠NTNNEURTURIN基因转染
- 文献传递
