陈建平
- 作品数：163 被引量：339H指数：9
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金四川省学术和技术带头人培养资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程文化科学更多>>
- 引入CpG基序的嗜肺军团菌lvgA基因真核表达质粒的构建及其在NIH3T3细胞中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的构建了引入CpG基序的lvgA基因的真核表达质粒pclvgA/CpG,并在NIH3T3细胞中表达。方法采用PCR方法将特定CpG基序作为核酸佐剂构建于嗜肺军团菌lvgA基因侧翼,定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-his(+),构建重组质粒pclvgA/CpG,体外阳离子脂质体转染法转染NIH3T3细胞。结果通过测序证实真核表达质粒pclvgA/CpG中lvgA/CpG克隆片段长为657bp,推测lvgA基因编码蛋白大小约为27.7Ku,lvgA基因及两侧翼原设计CpG基序完整扩出,测序序列与设计序列完全符合。用免疫荧光检测重组质粒在NIH3T3细胞中瞬时表达。结论本实验成功构建了嗜肺军团菌pclvgA/CpG真核表达质粒,并在NIH3T3细胞检测到其瞬时表达信号。
- 景彩霞杨加周刘明杰徐佳楠关望许颖陈建平
- 关键词：嗜肺军团菌CPG基序NIH3T3细胞
- 霍乱肠毒素ctxA基因真核表达重组质粒的构建及表达
- 2006年
- 目的构建霍乱肠毒素A亚单位基因(ctxA)真核表达重组质粒,并在NIH3T3细胞中进行表达。方法用限制性核酸内切酶从重组质粒pET32a-ctxA上切下ctxA基因,导入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组子pcDNA3.1-ctxA经限制性酶切分析、PCR鉴定和序列测定正确后,用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-ctxA转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法和Western blot对pcDNA3.1-ctxA的瞬时表达产物和稳定表达产物进行鉴定。结果重组质粒pcD-NA3.1-ctxA成功转入NIH3T3细胞,利用免疫荧光技术在NIH3T3细胞膜和细胞浆中检测到了瞬时表达,用Westernblot检测到转染的阳性细胞克隆稳定表达出约29 ku的蛋白。结论成功构建霍乱肠毒素A亚单位基因真核表达重组质粒pcDNA3.1-ctxA,并在NIH3T3细胞中表达出29 ku的CTA蛋白。
- 张莉张雷陈建平王涛
- 关键词：霍乱肠毒素转染体外表达
- 利什曼原虫对其感染感染后的巨噬细胞凋亡通路的调控研究
- 利什曼原虫在巨噬细胞内生存和增殖有赖于其免疫逃避的机制.大量研究表明虫体对巨噬细胞自身的信号通路具有调控的作用,而这些通路的改变有利于细胞自身为虫体提供更好的寄生环境.因此,研究虫体感染后巨噬细胞信号通路的改变能很大程度...
- 陈琦伟曾瑾余泽英陈建平
- 日本血吸虫疫苗候选分子的研究进展被引量：12
- 2005年
- 张莉陈建平
- 关键词：日本血吸虫病虫卵肉芽肿疫水阻断传播重寄生
- 套式PCR扩增特定SSU rRNA基因片段检测四川疟原虫感染的研究被引量：4
- 2001年
- 目的用套式 PCR系统诊断、鉴别人体疟原虫感染。方法以疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸 (SSUr RNA)基因为靶基因 ,选用 1对疟原虫属特异性引物和 4对种特异性引物 ,建立套式 PCR扩增系统并用于四川省疟疾病人血样的检测。结果从间日疟原虫、恶性疟原虫和三日疟原虫感染血样中分别扩增出 1 0 4 bp、1 0 2 bp和 1 1 5bp预期大小的特定扩增带。61份血样检测结果与镜检的间日疟阳性符合率为 1 0 0 %。并查出镜检漏诊的 2例 P.v.和 P.m.的混合感染及 1例 P.v.、P.f.和 P.m.的混合感染病例。结论本系统特异、灵敏、稳定、简便 ,可在诊断疟疾的同时判定混合感染 ,故对疟疾的诊断、大规模流行病学研究及疫情监控有实际应用价值。
- 姜素华刘佩娜朱声华刘庆陈建平
- 关键词：间日疟原虫恶性疟原虫疟疾套式聚合酶链反应
- 杜氏利什曼原虫amastin-ctxB融合基因DNA疫苗的初步研究
- 陈建平李金富杨斌斌曹得萍徐佳楠
- 成都及周边地区5种动物隐孢子虫感染的调查被引量：16
- 2002年
- 目的调查成都及周边地区的猪、羊、鸡、兔等畜禽及猕猴隐孢子虫感染情况。方法用改良抗酸染色法检查。结果共采集 2 49份新鲜粪便标本 ,检查的每种动物中均发现有隐孢子虫感染 ,而且感染率较高 ,分别为89.7%、65 .3 %、41 .2 %、88.2 %及 5 5 .0 %。通过显微镜下观察初步发现不同粪源的隐孢子虫在形态学上的差异 ,可为进一步研究不同种株的差异 ,以及其系统发育关系打下基础。结论成都及周边地区
- 廖宛军陈建平陈盛文张雷刘明杰
- 关键词：动物隐孢子虫感染
- 我国不同群型霍乱弧菌毒力表达调控基因的分布研究
- 为了探索霍乱弧菌不同血清群型毒力表达调控基因toxR、toxS、toxT的分布及其霉力的关系.本研究采用PCR扩增、Southern印迹杂交及原位杂交技术,对56株霍乱弧菌进行检测.
- 陈建平田玉马莹
- 关键词：霍乱弧菌调控基因
- 文献传递
- 杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因重组质粒的免疫原性研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因重组质粒pcDNA3.1-amastin的免疫原性。方法将18只雌性BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组9只。两组分别肌肉注射重组质粒pcDNA3.1-amastin和空质粒pcDNA3.1(+)(50μg/只),2周后同法加强免疫1次。加强免疫后第7、14和21天每组各取小鼠3只,内眦采血,分离血清,间接ELISA法测定血清中抗原特异性抗体水平。随后脱颈处死小鼠,无菌取脾,分离脾细胞,用刀豆球蛋白A刺激培养,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测脾淋巴细胞增殖活性和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。双抗体夹心ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和IL-4的水平。结果加强免疫后第7、14和21天,实验组均检测到特异性IgG抗体,效价在1∶640以上,而对照组未检测到IgG抗体(P<0.01);实验组脾淋巴细胞增殖活性刺激指数分别为4.28±0.51、5.01±0.60和4.39±0.50,均高于对照组(P<0.01);实验组脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ含量分别为(42.06±4.26)、(66.02±6.02)和(58.29±3.75)pg/ml,IL-2含量分别为(38.21±5.11)、(64.79±8.67)和(52.69±7.15)pg/ml,均高于对照组(P<0.01),两组均未检测到IL-4;实验组脾淋巴细胞CTL杀伤活性分别为(42.20±5.96)%、(63.66±5.44)%和(52.24±4.56)%,均高于对照组(P<0.01)。结论杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因重组质粒pcDNA3.1-amastin免疫小鼠后可诱导其产生特异的体液免疫应答和Th1型细胞免疫应答。
- 李金福陈建平田玉杨志伟马莹胡孝素
- 关键词：杜氏利什曼原虫基因疫苗免疫原性
- 嗜肺军团菌pilE基因的克隆及其原核表达
- 2008年
- 目的克隆嗜肺军团菌Ⅳ型菌毛蛋白pilE基因,构建重组质粒pET-pilE,并在原核系统中表达。方法采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增军团菌Ⅳ型菌毛蛋白pilE基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达重组质粒pET-pilE,经限制性内切酶鉴定、PCR及测序分析后,转化宿主菌大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果扩增出了429bp完整的pilE基因,构建的原核表达重组质粒pET-pilE表达出35.7 kDa的融合蛋白质。结论成功构建了军团菌pilE基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中得到了高效表达,为以后深入研究奠定了基础。
- 杨志伟曹秀琴陈建平
- 关键词：军团菌克隆基因表达
