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阎岩

作品数:50 被引量:123H指数:5
供职机构:第四军医大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划军队“十五”青年基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 47篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 46篇医药卫生
  • 13篇生物学

主题

  • 31篇病毒
  • 27篇抗体
  • 17篇基因
  • 14篇综合征
  • 14篇出血热
  • 13篇单克隆
  • 13篇克隆
  • 13篇汉滩病毒
  • 12篇单克隆抗体
  • 11篇肾综合征
  • 11篇肾综合征出血...
  • 11篇综合征出血热
  • 9篇HFRS病毒
  • 8篇单链
  • 8篇单链抗体
  • 8篇蛋白
  • 8篇S基因
  • 8篇出血热病毒
  • 7篇真核
  • 7篇可变区

机构

  • 50篇第四军医大学
  • 2篇西安联合大学
  • 2篇第四军医大学...
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇解放军第30...

作者

  • 50篇阎岩
  • 43篇徐志凯
  • 39篇吴兴安
  • 32篇王海涛
  • 32篇白文涛
  • 31篇张芳琳
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  • 21篇刘勇
  • 12篇薛小平
  • 12篇尹文
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  • 3篇于澜
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传媒

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  • 8篇第四军医大学...
  • 5篇单克隆抗体通...
  • 2篇中国人兽共患...
  • 2篇免疫学杂志
  • 2篇西安联合大学...
  • 2篇中国病毒学
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇西北大学学报...
  • 1篇科学技术与工...
  • 1篇中华神经外科...
  • 1篇第6次全国微...
  • 1篇中国科协20...

年份

  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2006
  • 2篇2005
  • 2篇2004
  • 3篇2003
  • 7篇2002
  • 11篇2001
  • 2篇2000
  • 2篇1999
  • 2篇1998
  • 4篇1997
  • 6篇1996
  • 1篇1995
  • 2篇1993
  • 2篇1992
  • 1篇1991
50 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
HSV-1 gC糖蛋白真核表达载体的构建及表达被引量:1
2011年
目的:构建单纯疱疹病毒1型(HSV-1)囊膜糖蛋白C(gC)哺乳动物表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R,实现其在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中的稳定表达。方法:利用基因重组技术构建同时克隆有gC-1基因和中国仓鼠二氢叶酸还原(DHFR-L22R)基因的真核表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R,按LipofectamineTM2000说明书转染野生型CHO-K1细胞,在G418和氨甲喋呤(MTX)双筛选压力下筛选稳定表达细胞株,Slot blot方法测定重组蛋白的表达,并用His-Ni琼脂糖填料进行目的蛋白纯化,纯化后West-ern blot检测。结果:成功构建了真核表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R。经过两轮筛选获得稳定表达HSV-1型gC基因的细胞系,Western blot成功检测到目的蛋白。结论:HSV-1 gC在CHO-K1细胞中成功表达,并具有良好的特异性结合活性,为进一步的实验研究和临床应用提供了基础。
党引利阎岩张晓晓李璞媛于澜张蕾张芳琳徐志凯吴兴安
关键词:HSVGCDHFR真核表达CHO
杂交瘤细胞的半连续式培养法被引量:1
1997年
目的:研究杂交瘤细胞的体外高密度培养,大量制备高纯度单克隆抗体(McAb).方法:应用Celi-gen5L细胞培养罐,以半连续灌注方式在1%的低血清条件下培养分泌抗疱疹病毒(HSV)McAb的杂交瘤细胞1A12.结果:细胞密度最高达1.7×107/ml,鼠IgG最高为350μg/ml,连续培养23d,共获鼠IgG5.3g,平均滴度1∶64.结论:半连续式培养杂交瘤细胞,细胞密度和抗体产量均优于纯批式培养.
薛小平尹文王海涛徐志凯阎岩吴兴安
关键词:细胞培养杂交瘤细胞半连续式单克隆抗体
大肠杆菌中融合表达汉滩病毒S,M基因片段的研究被引量:1
2002年
为在大肠杆菌中融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与NP含主要抗原位点的片段 .将汉滩病毒 76 118株S基因编码区 5′端约 0 .7kb的片段与M基因编码G1的片段连接 ,克隆入 pGEX 4T2 ,构建嵌合基因原核表达载体 pGEX 4T2 S 0 .7G1,在大肠杆菌XL1 Blue中诱导GST S0 .7G1融合蛋白的表达 .表达产物用ELISA和Westernblot进行鉴定 .限制性内切酶酶切鉴定证明 ,成功构建了嵌合原核表达载体 pGEX 4T2 S0 .7G1.经IPTG诱导后 ,ELISA活性测定结果表明 ,该融合蛋白可与抗汉坦病毒NPmAb特异性结合 .Westernblot结果显示 ,诱导出相对分子质量 (Mr)大于 1× 10 5的S0 .7G1与GST的融合蛋白 ,并有一系列大小不等的可与抗汉坦病毒NPmAb特异性结合的蛋白带 .获得具有特异性结合活性的融合蛋白GST S0 .7G1。
罗雯徐志凯张芳琳阎岩吴兴安刘勇白文涛王海涛
关键词:大肠杆菌汉滩病毒基因片段
抗汉滩病毒核蛋白细胞内抗体的表达及鉴定
肾综合征出血热(HFRS)是在我国危害严重的急性传染病之一,目前尚无特异、有效的治疗方法。我室制备了多株具有高中和活性的抗汉坦病毒的鼠源性单克隆抗体(mAb),有些已经进入临床试验,但仍需解决鼠源性抗体应用于人体产生的副...
阎岩徐志凯胡刚白文涛罗雯吴兴安张芳琳刘勇王海涛
文献传递
汉滩病毒结构蛋白昆虫细胞融合表达产物的免疫原性评价被引量:4
2002年
目的 研究汉滩病毒 (HTNV)囊膜糖蛋白G1与核蛋白 (NP)部分片段在昆虫细胞中融合表达产物的免疫学特性 ,为HTNV基因工程疫苗的研制提供依据。方法 构建含有HTNVG1S0 .7嵌合基因的重组杆状病毒Bac G1S0 .7,用其感染的Sf9细胞免疫Balb c小鼠。用间接免疫荧光法、ELISA法、微量细胞培养中和试验及T淋巴细胞增殖试验对被免疫小鼠的体液免疫及细胞免疫应答效果进行检测。结果 Bac G1S0 .7感染的昆虫细胞免疫小鼠后 ,测得免疫鼠血清抗HTNV抗体滴度最高达 1∶3 2 0 0 ,含有特异性抗HTNVNP及抗HTNV糖蛋白G1的抗体 ,被免疫小鼠中有部分产生了较低滴度的中和抗体 ,免疫鼠脾细胞对HTNVNP或糖蛋白的增殖反应指数均高于阴性对照组。结论 G1S0 .7嵌合基因的昆虫细胞表达产物具有较好的免疫原性 。
罗雯徐志凯张芳琳阎岩吴兴安刘勇白文涛王海涛
关键词:汉滩病毒结构蛋白免疫原性肾综合征出血热
抗HSV-糖蛋白(gp30)单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列分析被引量:1
1996年
目的:获得鼠抗HSV-2型特异性糖蛋白(gp30)单抗重链可变区基因,为基因工程改建及表达奠定基础。方法:从分泌高中和活性的鼠抗HSV-2型特异性单抗杂交瘤细胞系中提取RNA,逆转录成cDNA,用PCR法扩增出抗体重链可变区基因,并克隆入质粒,随机挑选阳性克隆进行核酸序列分析.结果:基因全长357bp,编码119个氨基酸,含有维持抗体结构的半胱氨酸,序列内无终止码.结论:所克隆基因具备小鼠抗体重链可变区基因结构特征,与已确认的小鼠抗体VH基因有较高的同源性,隶属于Kabat分类体系中的小鼠抗体重链(A)亚组.
郑东阎岩姜绍谆马文煜徐志凯尹文喻启桂刘军连
关键词:单克隆抗体可变区基因糖蛋白
汉滩病毒核蛋白部分片段与囊膜糖蛋白G1在昆虫细胞中的融合表达被引量:1
2002年
目的 应用Bac -to -Bac杆状病毒表达系统融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白部分片段。方法 构建含有汉滩病毒G1S0 7嵌合基因的杆状病毒表达载体 pFBD -G1S0 7,转化DH10Bac致敏菌 ,利用其含有的细菌Tn7转座系统将嵌合基因重组至穿梭质粒Bacmid上 ,快速筛选出含有G1S0 7嵌合基因的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中表达该融合蛋白 ,利用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹对表达产物进行检测。结果 构建的含G1S0 7嵌合基因之重组杆状病毒可在昆虫细胞中表达出融合蛋白 ,该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1特异性单抗所识别 ,表达产物主要集中在细胞内。结论 在昆虫细胞中表达出具有生物学活性的G1S0 7融合蛋白 。
罗雯徐志凯阎岩吴兴安张芳琳刘勇白文涛王海涛
关键词:汉滩病毒杆状病毒昆虫细胞肾综合征出血热HFRS免疫学
抗汉滩病毒NP抗原mAb的ScFv-C_κ基因真核和原核表达载体的构建及鉴定被引量:3
2001年
目的构建抗汉滩病毒HTNVNP抗原mAb的ScFvCκ基因原核和真核表达载体。方法将鼠源性抗HTNVmAb1A8的ScFv基因和人Cκ基因连接,分别克隆入原核表达载体pComb3和真核表达载体pCIneo中,并用间接免疫荧光和Westernblot检测其原核表达产物的活性。结果成功地构建了重组1A8ScFvCκ基因并克隆入原核和真核表达载体。间接免疫荧光和Westernblot分析表明,该基因在E.coliTG1中的表达产物可与HTNVNP抗原特异性结合。结论抗NP抗原mAb的ScFvCκ原核和真核表达载体的构建,为进一步研究细胞内抗体的功能奠定了基础。
阎岩徐志凯胡刚白文涛罗雯吴兴安张芳琳刘勇王海涛
关键词:单链抗体汉滩病毒真核表达
抗HFRS病毒McAb 1A8可变区基因的克隆及序列分析
1997年
抗HFRS病毒McAb1A8可变区基因的克隆及序列分析阎岩徐志凯姜绍谆尹文吴兴安王海涛薛小平(第四军医大学微生物学教研室,西安710032)基因工程小分子抗体由于分子小,免疫原性弱,穿透力强,易于抵达抗原“峡谷”位点,因此对于研究病毒及肿瘤分子的结构...
阎岩徐志凯姜绍谆尹文吴兴安王海涛薛小平
关键词:单克隆抗体克隆
鼠源单抗3G1单链抗体基因的构建及序列分析
2003年
利用RT PCR方法 ,从分泌抗汉滩病毒mAb的杂交瘤细胞系 3G1中扩增出抗体VH 和VL基因 ,通过PCR方法获得linker VL 基因 ,进而利用加端PCR技术 ,在扩增出的单抗体VH 和linker VL基因两端加上限制性酶切位点 ,分别克隆入 pUC18中并测序 .3G1VH 基因长 36 0bp ,编码 12 0个氨基酸 ;VL 基因长 32 4bp ,编码 10 8个氨基酸 .在pUC18载体中将VH 和linker VL 基因连接成ScFv基因 .
罗雯阎岩徐志凯张芳琳吴兴安刘勇白文涛王海涛
关键词:肾综合征出血热基因构建基因工程
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