通过单因素试验和Box-Behnken实验设计考察在蛋白去除过程中b型流感嗜血杆菌荚膜多糖浓度、Tween 80及(NH_4)_2SO_4含量对多糖回收率及蛋白残留含量的影响,建立回归模型.预测荚膜多糖质量浓度8.54mg/mL、Tween 80质量分数12.9%、(NH_4)_2SO_4质量分数28.12%为该方法的最佳参数组合,并通过实验进行验证其符合度分别达到93.9%和90.3%,符合度较高.研究通过实验设计(design of experiments,DOE)试验建立并优化了Hib荚膜多糖中杂蛋白的新方法,能够应用于实际的生产工艺中.
目的 建立核磁共振波谱（nuclear magnetic resonance,NMR）法测定b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b,Hib）荚膜多糖中核糖含量的方法。方法 利用NMR技术中的氢核磁共振波谱（1H-NMR）的定量功能,对不同浓度的D-核糖进行定量分析,验证该方法的精密度及准确度,并与传统化学方法进行比较。结果NMR法定量结果相对标准偏差（RSD）均小于1.0%,相对误差除最低浓度20 mmol/L为7.4%外,其余浓度均在1%-3%之间,不同浓度的样品回收率在97.2%-107%之间;化学法定量结果RSD在0.6%-7.9%之间,相对误差在3%-6.5%之间,不同浓度样品回收率在93.5%-105.3%之间;两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别,均在《中国药典》三部（2010版）规定的320～410 mg/g之间。结论1H-NMR定量方法取样少,可直接定量,该方法精密度高、准确度高、重现性好,且不破坏多糖结构,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量。
