郭晓萍
- 作品数：23 被引量：1H指数：1
- 供职机构：浙江大学医学院附属儿童医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 上调OCT4基因表达对人骨髓间充质干细胞的iPSC相关转录因子表达的影响
- 2020年
- 目的:探讨OCT4基因过表达对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow derived mesenchymal stem cells,h BMMSC)i PSC相关转录因子(c MYC、KLF4、LIN28、NANOG、SOX2)表达的影响,为从骨髓造血微环境的角度探索血液系统疾病如白血病、再生障碍性贫血等的发生机制提供实验依据。方法:首先构建重组质粒pcDNA3.1-OCT4表达载体,通过脂质体转染的方式将上述表达质粒导入第3-4代hBMMSC,分别通过PCR及流式细胞术对OCT4 mRNA和OCT4蛋白的过表达进行验证,然后经G418抗性加压下有限稀释和连续亚克隆的方法筛选出稳定表达OCT4的细胞(hBMMSC-OCT4),分别通过RT-PCR和流式细胞术测定iPSC相关转录因子(cMYC、KLF4、LIN28、NANOG、SOX2)mRNA和蛋白的表达,观察OCT4过表达对iPSC相关转录因子表达的影响。结果:成功构建了携带OCT4的重组表达质粒pcDNA3.1-OCT4;通过有限稀释和连续亚克隆的方法筛选出稳定表达OCT4的细胞(hBMMSC-OCT4);流式细胞术检测结果显示,OCT4的平均表达阳性率从未转染时的(3.03±1.49)%增加至稳定表达时的(95.46±1.40)%;RT-PCR证实了OCT4基因的高表达;Real-time PCR结果显示,与未转染的对照组MSC相比,OCT4 mRNA的相对表达量从瞬时转染时的2.75倍增加至稳定转染时的6.23倍,OCT4蛋白的平均表达阳性率从瞬时转染时的(36.36±0.28)%(d 4)升高至稳定转染时的(96.25±1.38)%(d 96)。hBMMSC-OCT4细胞高水平表达干性转录因子(cMYC、KLF4、LIN28、NANOG、SOX2),其平均表达量分别从未转染时的(1.12±0.47)%、(0.84±0.30)%、(2.14±0.79)%、(0.63±0.37)%和(14.34±2.44)%增加至(80.65±4.75)%、(73.03±4.70)%、(68.08±3.05)%、(39.39±1.85)%和(91.45±4.56)%,与RT-PCR结果一致,且NANOG和SOX2的表达水平与OCT4的平均表达量呈正相关(OCT4 vs NANOG:r=0.7802,OCT4vs SOX2:r=0.4981;NANOG vs SOX2:r=0.7426)。结论:获得了稳定表达OCT4的细胞(hBMMSC-OCT4),过表达OCT4可上调hBMMSC干性转录因子(cMYC、KLF4、LIN28、NANOG、SOX2)�
- 郭晓萍汤永民
- 关键词：转录因子OCT4过表达骨髓间充质干细胞诱导多能干细胞
- 婴幼儿异基因造血干细胞移植后腹泻伴胰腺再生蛋白3α升高二例
- 2021年
- 目前世界范围内造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)的总例数已超过1100万,其中40%为异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)[1]。移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)是allo-HSCT后常见并发症,胃肠道是GVHD累及的靶器官之一,会导致肠道上皮细胞及肠道黏膜屏障受损,腹泻是其主要临床表现。
- 张超琅郭晓萍赵芬英徐晓军
- 关键词：异基因造血干细胞移植腹泻婴幼儿
- 抑制ABCC1/MRP1转运体下调IL-1β分泌的实验研究
- 2024年
- 目的:用体外巨噬细胞实验和全基因敲除小鼠,筛选IL-1β分泌相关的胞膜转运体。方法:分化THP-1细胞株得到人源性巨噬细胞,从人外周血获取巨噬细胞。获取同性别、同年龄的FVB野生型小鼠作为MRP1全基因敲除小鼠的对照,培养小鼠腹腔和骨髓巨噬细胞。使用ABCC1/MRP1、ABCG2/BCRP、ABCB1/P-gp、OATP1B1和MATE转运体抑制剂处理细胞,再使用脂多糖和腺苷三磷酸刺激细胞,采用ELISA、Western blot和细胞免疫荧光法检测IL-1β分泌水平。结果:人和小鼠巨噬细胞抑制剂实验表明,抑制ABCC1/MRP1转运体后,IL-1β分泌显著降低,而抑制其他4类转运体无效果。在动物实验中,MRP1全基因敲除小鼠的骨髓巨噬细胞分泌IL-1β的水平显著低于对照组。结论:ABCC1/MRP1转运体是一种新发现的IL-1β分泌途径,有望成为解决细胞因子释放综合征等临床问题的新靶标。
- 陈园园应培挺翁雯雯方美新李江骆泽斌贾明郭晓萍张玲燕徐晓军汤永民
- 关键词：MRP1巨噬细胞白介素-1Β
- 识别白血病干细胞新单抗3A4人源化基因改造及体内外靶向杀伤研究
- 目的：拟观察识别白血病干细胞新单抗3A4对人体正常组织芯片的反应性;并在此基础上,对该抗体进行人鼠嵌合型抗体的基因改造,并对大量表达及其生物学特性、体内外靶向杀伤治疗作用进行深入研究,为进一步开发该抗体提供重要的实验数据...
- 汤永民李思思廖婵沈笛颖沈红强郭晓萍王柱军
- 关键词：白血病
- 文献传递
- 识别CD9新单抗2F10的制备、生物学特性鉴定及其与B-ALL预后意义的研究
- 目的 最近研究表明,CD9分子是B系ALL-LSC相关膜标志,对其生物学特性及与临床预后意义的关系尚未完全阐明.本研究拟制备CD9新单克隆抗体(ZCH-2F10),探索该单抗的生物学特性以及在儿童B系ALL (B-ALL...
- 冯建华程玉萍汤永民徐晓军张晶樱李思思廖婵郭晓萍王柱军陈园园
- Klf4基因在人白血病细胞株细胞中的表达规律
- 目的白血病是人类常见的血液系统恶性肿瘤,其分化程度与预后密切相关,寻找白血病早期基因标志对白血病微小残留病(MRD)的监测、预后的判断以及靶向白血病干细胞(LSC)治疗均具有重要意义。最新研究表明,向小鼠或人类体细胞同时...
- 郭晓萍汤永民沈红强钱柏芹廖婵李思思张晶樱
- 文献传递
- KLF4——白血病细胞中潜在的抑癌基因
- 研究背景及目的 KLF4(又称为GKLF),是一个具有双重功能的锌指结构蛋白,既可以作为抑癌基因又可以是致癌基因,这取决于细胞的不同类型。有研究指出,在结肠癌、膀胱癌及胃癌中KLF4作为抑癌基因,而在乳腺癌及皮肤鳞状细胞...
- 郭晓萍汤永民杨世隆徐卫群宋华沈和萍张玲燕茅君卿潘斌华
- 文献传递
- 白血病骨髓来源的间充质干细胞培养、鉴定及生物学特性分析
- 目的探讨人白血病骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)的增殖能力及其"类胚胎干细胞"的生物学特性,为进一步将MSCs重编程产生诱导的多能性干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs)研究...
- 郭晓萍汤永民
- 文献传递
- 识别白血病干细胞的新单抗3A4的生物学特性研究
- 背景及目的白血病干细胞(Leukemia stem cells,LSCs)是存在于白血病患者体内的极少量细胞,在白血病发生和发展中发挥关键作用。研究发现,急性髓系白血病干细胞(AML-LSC)免疫表型为CD34CD38C...
- 李思思汤永民沈红强钱柏芹沈笛颖廖婵郭晓萍
- 文献传递
- ETS转录因子相关基因(ERG)在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及预后意义
- <正>背景及目的已发现ETS转录因子相关基因(ERG)的表达水平与成人T系急性淋巴细胞白血病(TALL)及细胞遗传学正常的急性髓系白血病的总体生存率有关。然而,尚无有关ERG与儿童ALL的研究数据。本研究旨在探讨ERG表...
- 赵海招贾明汤永民骆泽斌徐晓军李思思张晶樱郭晓萍
- 文献传递
