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郭忠建: 作品数：27 被引量：48H指数：4; 供职机构：江苏大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>

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家蚕核型多角体病毒泛素蛋白单克隆抗体的制备被引量：1: 2019年; 泛素(ubiquitin,UB)是一种小分子质量蛋白。从氨基酸序列上看,杆状病毒UB与真核生物UB的差异体现在2段序列上,即第15~31个和第53~57个氨基酸,其余的序列高度保守。这种高度保守性使得许多商业化的抗泛素抗体难以特异地将二者区分开来。将人工合成的家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)UB(v-UB)多肽17TEPAETVADLKQ28作为免疫原免疫BALB/c小鼠,成功制备了针对该多肽的特异性单克隆抗体,实现了对v-UB的特异性检测。利用该抗体,确定v-UB在细胞质中形成的斑点状结构为P62内涵体(inclusion body)。获得的单克隆抗体为今后v-UB的研究提供了实验基础。; 郭忠建于宪印董现云于萌涵; 关键词：泛素单克隆抗体

家蚕核型多角体病毒orf90基因在Bac-to-Bac家蚕杆状病毒系统中快速表达: 2008年; 【目的】利用BmNPV的Bac-to-Bac系统快速表达目的基因orf90,为深入研究该基因打下基础。【方法】将目的基因BmNPVorf90克隆到转移载体pFasBacHTb上,并将报告基因egfp插入到orf90的3'末端,形成重组转移载体pFasBacHTb-egfp-90。在将其转化到含穿梭载体bacmid的感受态细胞DH10Bac中,通过转座作用,经白斑筛选得到重组穿梭载体。纯化DNA,用脂质体介导转染家蚕BmN细胞,得到重组病毒bacmid-egfp-90。【结果】转染细胞72h后在荧光显微镜下可以观察到强烈的绿色荧光。重组病毒穿刺接种家蚕蛹,5d后观察到很强的荧光。结果表明构建的Bac-to-Bac系统能在家蚕细胞和蛹体中正确的快速表达外源基因。【结论】证明BmNPV的Bac-to-Bac是一个快速表达系统,适合在家蚕上广泛应用。; 王强陈克平郭忠建姚勤王海燕陈慧卿; 关键词：BMNPV EGFP基因

蛋白质核质转运的过程和应用被引量：1: 2021年; 真核生物区别于原核生物的特征之一是存在被核膜包被的细胞核。核膜是一种磷脂双分子膜,由内膜和外膜组成,对蛋白质转运具有高度的选择性。核膜上嵌有核孔复合体,其是完成细胞核内外蛋白质转运所必需的。除此之外,该过程还需转运受体蛋白、Ran系统以及货物蛋白自身的结构协同参与完成。该文着重就真核生物蛋白核质转运的机制及近年来转运受体蛋白在肿瘤治疗中的临床应用进行综述。; 但德苗郭忠建; 关键词：核孔复合体

家蚕生殖细胞相关基因nanos的克隆表达及在胚胎发育中的表达模式被引量：2: 2007年; 【目的】探讨nanos基因在家蚕Bombyxmori胚胎发育中的表达模式,为进一步研究该基因在家蚕胚胎发育中的功能奠定基础。【方法】根据本实验室提交到GenBank中家蚕nanos的cDNA序列(登录号EF647589)设计引物,扩增出了一条长684bp的编码片段,对该片段进行了克隆和表达,亲和纯化表达的蛋白并免疫新西兰大白兔制备抗体。Western blot检测家蚕早期胚胎nanos的表达情况,荧光定量PCR检测nanos在整个家蚕胚胎发育中的表达情况。【结果】克隆并表达了一条长684bp的编码片段,得到了分子量约33kD的融合蛋白。用制备的抗血清对家蚕早期胚胎蛋白的Western blot检测表明,nanos在此阶段基本是恒定表达。荧光定量PCR结果显示刚产的卵中nanos的表达量最大,第2天开始急剧下降,此后到第10天表达量几乎没有变化。【结论】本实验克隆的nanos是家蚕中的一个同源物,该基因在家蚕胚胎发育中的表达模式与蜜蜂等有很大的不同,反映了昆虫生殖细胞形成机制的多样性。; 赵国力陈克平姚勤郭忠建; 关键词：家蚕 NANOS 胚胎发育原始生殖细胞 BLOT

BmNPV多角体蛋白形成了聚集物(体): 病毒的感染伴随着病毒蛋白的大量表达,这些蛋白来不及形成正常的三维结构而倾向于形成聚集物(体).在24 h p.i.,家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)多角体...; 郭忠建陶柳性董现云于萌涵田婷; 关键词：多角体蛋白自噬体

家蚕核型多角体病毒orf25基因在病毒感染过程中编码一个30kDa的晚期蛋白(英文): 2008年; 首次对家蚕核型多角体orf25基因进行了描述。扩增Bm25基因,亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-2,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达含有GST标签的融合蛋白。IPTG诱导后高效表达GST-Bm25融合蛋白。纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。利用制备的抗GST-Bm25融合蛋白的多克隆抗体进行表达时相分析显示:24h p.i.检测到30 kDa的蛋白条带。RT-PCR方法,在18-72 h p.i检测到Bm25基因的转录本。结论:以上数据表明Bm25基因编码一晚期表达的30kDa蛋白。; 王海燕陈克平郭忠建姚勤; 关键词：BMNPV RT-PCR 多克隆抗体

高校辅导员的思想政治教育对大学生生涯规划的作用被引量：4: 2009年; 大学生生涯规划工作纳入高校思想政治教育工作体系已经迫在眉睫,高校辅导员在学生思想政治教育工作中充当了特殊角色,决定了在大学生生涯规划的辅导教育中辅导员的重要作用。本文论述了辅导员的思想政治教育在大学生生涯规划中如何发挥作用。; 邱丽华郭忠建; 关键词：高校辅导员思想政治教育大学生生涯规划

嗜虫书虱磷化氢敏感品系和抗性品系在不同磷化氢浓度下的种群灭绝时间研究被引量：8: 2003年; 研究嗜虫书虱磷化氢敏感品系QLe - 3和抗性品系GLZLe - 1在 2 5℃、75 %RH条件、不同磷化氢浓度下的种群灭绝时间 ,结果表明 :在 10 0mL/m3、2 0 0mL/m3、4 0 0mL/m3、70 0mL/m3的磷化氢浓度时 ,抗性品系的种群灭绝时间分别为 13天、10天、7天、6天 ;在5 0mL/m3、10 0mL/m3、2 0 0mL/m3、4 0 0mL/m3、70 0mL/m3的磷化氢浓度下 ,敏感品系的种群灭绝时间分别为 6天、4天、3天、2天、2天。嗜虫书虱的卵不论是抗性还是敏感品系 ,对PH3的耐药性都强于成虫和若虫 ;用磷化氢熏蒸时 ,嗜虫书虱的卵孵化推迟 3～ 6天 ,增加了防治难度 ;磷化氢浓度和种群灭绝时间之间的关系可用CnT =K式表示 ,敏感品系QLe - 3的关系式为C0 .4 4TPE =4 2 .0 5 (mg·h/L) ,抗性品系GLZLe - 1为C0 .4 1TPE =138.5 5 (mg·h/L)。; 曹阳郭忠建邱丽华; 关键词：嗜虫书虱磷化氢熏蒸敏感品系抗性品系储粮害虫

BmNPV多角体蛋白形成聚集物(体)并参与细胞自噬: 病毒的感染伴随着病毒蛋白的大量表达.这些蛋白来不及形成正常的三维结构而倾向于形成聚集物(体).在24 h p.i.,家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)多角体...; 郭忠建陶柳性董现云于萌涵田婷

普城沙雷氏菌RsmA蛋白过量表达菌株的构建被引量：4: 2010年; 曾俊刘晓光郭忠建贾金丽高克祥曹军; 关键词：WESTERN BLOT 蛋白酶几丁质酶