谷少华
- 作品数：28 被引量：103H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 棉铃虫膨胀线粒体基因组的鉴定与分析
- 2019年
- 以已公布的棉铃虫线粒体DNA序列对来自4头棉铃虫雄蛹的DNA的三代测序数据进行筛选,获得了11条与线粒体DNA有同源性的三代read序列,并根据其中的read 66003鉴定出了一种膨胀的线粒体基因组。该线粒体基因组大小为27 113 bp,其保守区域包含13个蛋白编码基因、2个rRNA基因、22个tRNA基因以及1个AT富集区,与已公布的棉铃虫线粒体基因组的结构相似。膨胀区域位于cox1基因编码区内部,大小为11 467 bp,经预测含有一个完整的真核基因(依赖ATP的RNA解旋酶)以及多种转座元件的片段,但与线粒体DNA无同源性,也无I类或Ⅱ类内含子存在的证据。对田间和室内棉铃虫DNA样品的PCR扩增未能检测到膨胀线粒体基因组的存在。以上结果表明膨胀片段可能是细胞核DNA序列通过偶然的水平转移事件而整合到线粒体基因组中的,且该种膨胀方式的发生概率极低。本文报道的膨胀线粒体基因组为日后动物线粒体基因组学的研究提示了一种独特的变异方式。
- 张屾谷少华李显春
- 关键词：棉铃虫线粒体基因组RNA解旋酶转座子
- 棉铃虫剂量补偿相关基因Hamsl1的鉴定与功能分析被引量：1
- 2019年
- 【目的】棉铃虫Helicoverpa armigera的剂量补偿(dosage compensation,DC)分子机制尚不清楚。本研究旨在通过克隆棉铃虫雄性特异性致死(male-specific lethal,msl)基因Hamsl 1,利用RNA干扰技术明确其是否参与调控棉铃虫剂量补偿。【方法】利用RT-PCR同源克隆棉铃虫Hamsl 1基因全长cDNA;利用qPCR技术研究Hamsl 1基因在棉铃虫不同发育时期的表达谱;通过显微注射Hamsl 1 siRNA到棉铃虫3龄幼虫中对Hamsl 1基因进行RNA干扰后,利用qPCR技术检测15个Z染色体基因的表达情况,分析Hamsl 1是否调控Z染色体基因剂量。【结果】成功克隆了棉铃虫Hamsl 1基因的cDNA序列,鉴定出Hamsl 1基因mRNA存在2种剪接体,分别命名为Hamsl1a(GenBank登录号:MK564008)和Hamsl1b(GenBank登录号:MK564009)。功能域分析发现HaMSL1含有典型的PEHE和coiled-coil功能域,具有MSL1蛋白的特征。qPCR分析表明,Hamsl 1基因位于棉铃虫Z染色体上;棉铃虫Hamsl1a与Hamsl1b基因表达均具有发育时期特异性,在成虫期表达量最高,且雌雄化蛹后基因表达量差异显著,具有性别特异性。通过同源比对和qPCR分析,在DNA水平鉴定了15个Z染色体候选基因。显微注射Hamsl 1 siRNA于3龄幼虫体内72 h,干扰效率为36.01%~64.27%,并未发生雄性致死现象;与对照组相比,Hamsl 1 RNAi处理组中棉铃虫15个Z染色体基因在雄性个体中整体呈现表达量上调趋势,而在雌性个体中平均表达水平差异不显著。【结论】本研究初步探明Hamsl 1基因位于棉铃虫Z染色体上,且该基因可能通过抑制雄性棉铃虫Z染色体基因表达,调控棉铃虫Z染色体剂量补偿。本研究为深入研究棉铃虫剂量补偿分子机制和绿色防控棉铃虫提供了理论基础。
- 张亚坤邓中原谷少华李显春
- 关键词：棉铃虫性染色体RNAI
- 桃蚜气味结合蛋白及其应用
- 本申请涉及桃蚜气味结合蛋白及其应用。所述氨基酸序列选自如SEQ ID No.2、SEQ ID No.4和SEQ ID No.6所示的氨基酸序列中的至少一种。
- 谷少华王倩李显春
- 文献传递
- 苜蓿盲蝽气味分子结合蛋白AlinOBP2结合特性初步分析被引量：1
- 2011年
- 昆虫具有灵敏的嗅觉系统,能够特异性地识别性信息素和寄主挥发物来进行寻找配偶、定位寄主植物和产卵位点.气味分子结合蛋白在昆虫嗅觉识别过程中发挥关键作用.本研究表达和纯化了一个新的苜蓿盲蝽气味分子结合蛋白AlinOBP2,采用qRT-PCR方法解析了AlinOBP2基因的表达谱,结果表明AlinOBP2绝大部分在触角中表达,且在雌雄触角中的表达量相当,在头部也有少量的表达.以N-phenyl-1-naphthylamine(1-NPN)为荧光探针,采用荧光竞争结合实验研究了5种性信息素类似物和13种棉花挥发物与AlinOBP2蛋白的结合能力.结果显示,5种性信息素类似物均不能和AlinOBP2有效结合,暗示AlinOBP2在苜蓿盲蝽寻找配偶过程中不发挥作用.在13种棉花挥发物中,庚酸乙酯和AlinOBP2的结合能力最强,结合常数为9.22μmol/L.二甲基萘、3-己酮、乙酸叶醇酯、乙酸壬酯、香芹醇5种化合物和AlinOBP2结合能力一般,结合常数分别为15.49,17.31,21.53,18.86和13.47μmol/L.据此推测,AlinOBP2可能为普通气味结合蛋白,能够选择性地结合某些棉花挥发物并参与苜蓿盲蝽识别普通气味过程.
- 谷少华王桂荣张永军吴孔明郭予元
- 关键词：苜蓿盲蝽
- 苜蓿盲蝽气味结合蛋白AlinOBP5结合特性分析
- 嗅觉对于昆虫的生存、繁殖等起着重要的作用.气味结合蛋白在昆虫嗅觉系统中发挥重要的作用.本研究克隆、表达并纯化了一个新的苜蓿盲蝽气味结合蛋白AlinOBP5,序列分析显示其包括121个氨基酸残基,属于中链OBP.利用1-N...
- 王松莹谷少华张永军吴孔明郭予元
- 关键词：气味结合蛋白苜蓿盲蝽
- 绿盲蝽酯酶基因AlucEST1的克隆及表达谱分析被引量：1
- 2012年
- 昆虫体内的气味降解酶(odorant degrading enzymes,ODEs)能够降解气味分子,使嗅觉受体免受持续的刺激。酯酶作为气味降解酶类的一种,在昆虫嗅觉行为过程中发挥重要作用。本研究利用RACE技术克隆了一个新的绿盲蝽Apolygus lucorum酯酶基因AlucEST1(GenBank登录号:JQ715614)。序列分析结果表明,该基因全长1810bp,开放阅读框为1713bp,编码571个氨基酸。N-末端疏水区包含由起始位置开始的一段17个氨基酸的信号肽。通过半定量RT-PCR和Real-timeqPCR技术解析该酯酶基因在不同组织的表达谱。结果发现,该酯酶基因在绿盲蝽的触角、头、胸、腹、足、翅等部位中均有表达。其中,AlucEST1在胸、腹部中表达量最高,在触角中也大量表达。据此推测该基因在气味分子的降解中起重要作用,同时也参与绿盲蝽体内的多种代谢调控。
- 沈忱谷少华武红珍韩榕张永军郭予元
- 关键词：绿盲蝽酯酶基因克隆表达谱
- 苜蓿盲蝽化学感受蛋白Alin-CSP6的气味结合特性被引量：4
- 2011年
- 【目的】利用昆虫的嗅觉识别机制,以化学感受蛋白作为潜在的靶标,干扰昆虫的寄主定位及交配等行为,用于害虫综合治理。【方法】克隆并纯化了1个新的苜蓿盲蝽化学感受蛋白Alin-CSP6,进行了113种气味化合物对Alin-CSP6的荧光竞争性结合试验,将荧光竞争结合试验筛选出强结合力的气味标样采用"Y"型嗅觉仪验证行为反应,并采用同源建模的方法构建Alin-CSP6的3D结构。【结果】Alin-CSP6具有较广谱的结合力,能够与醇、醛、酮、酯、萜、芳香族等多种化合物结合并表现较强的结合能力。其中,β-香茅醇(β-citronellol)、反式-2-己烯醛(trans-2-hexene aldehyde)、6-甲基-5-庚烯-2-酮(6-methyl-5-heptene-2-ketone)、2-十一烷酮(2-undecanone)、乙酰丙酸丁酯(butyl levulinate)、月桂烯(myrcene)、左旋-β-蒎烯((1s)-(-)-β-pinene)、壬烷(nonane)、3,4-二甲基苯甲醛(3,4-dimethyl benzaldehyde)、乙醚(ethyl ether)、罗勒烯(ocimene)、苯乙酮(acetophenone)、苯甲醛(benzaldehyde)与Alin-CSP6有很强的结合力。"Y"型管试验结果发现,反式-2-己烯醛和苯乙酮对苜蓿盲蝽成虫表现出极显著的引诱作用,而6-甲基-5-庚烯-2-酮、左旋-β-蒎烯和4-乙基苯甲醛(4-ethylbenzaldehyde)则对苜蓿盲蝽成虫具有极显著的拒避效果。Alin-CSP6的3D结构显示该蛋白主要由6个α螺旋构成,分别是13-18(α1)、20-32(α2)、39-52(α3)、59-76(α4)、78-88(α5)和94-102(α6)。Cys29-Cys36和Cys55-Cys58两个二硫键起着稳定蛋白结构的作用。推测Alin-CSP6的Ile74和Phe81基团能够参与结合油酸酰胺或其类似物。【结论】Alin-CSP6具有较广泛的气味结合谱,在苜蓿盲蝽嗅觉过程中具有重要作用。
- 马双王松莹谷少华郝再彬张永军郭予元
- 关键词：苜蓿盲蝽
- 一种来源于苜蓿盲蝽的OBPs蛋白及其编码基因
- 本发明公开了一种来源于苜蓿盲蝽的气味结合蛋白及其编码基因，其是利用SMART技术构建触角cDNA文库和生物信息学方法从苜蓿盲蝽触角中有效分离鉴定出来的。鉴于气味结合蛋白在昆虫嗅觉识别中的重要作用，本发明所涉及的这些基因可...
- 谷少华张永军张雪莹吴孔明郭予元
- 文献传递
- 绿盲蝽气味结合蛋白基因初步鉴定
- 昆虫感受性信息素和寄主挥发物主要靠灵敏的嗅觉系统,存在于昆虫触角感器淋巴液中的气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)和嗅觉神经元树突上的嗅觉受体(olfactory receptors...
- 纪萍刘靖涛谷少华张永军郭予元
- 关键词：绿盲蝽结合蛋白基因
- 一种从昆虫触角中分离鉴定OBPs基因的方法
- 本发明公开了一种利用SMART技术构建触角cDNA文库和生物信息学方法从苜蓿盲蝽触角中有效分离鉴定气味结合蛋白(Odorant binding proteins，OBPs)基因的方法，利用此方法筛选出了14条苜蓿盲蝽气味...
- 谷少华张永军张雪莹吴孔明郭予元
- 文献传递
