袁创
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:四川大学华西医院更多>>
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- 日本血吸虫tetraspanins胞外环2编码基因的克隆表达及其免疫原性的初步研究被引量:1
- 2008年
- 目的克隆和表达日本血吸虫(中国大陆株)tetraspanins胞外环2编码基因(Sj-tsp-2),初步研究其免疫原性。方法通过全基因合成方式获得目的基因片段,构建重组质粒pET32a-Sj-tsp-2,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,在非变性条件下纯化融合蛋白。结果通过核苷酸测序证实重组表达质粒构建成功。SDS-PAGE结果表明,融合蛋白和目的肽段与预计大小基本一致。Western Blotting和ELISA结果说明,该融合蛋白具有良好的免疫原性。免疫定位分析显示,Sj-TSP-2主要在日本血吸虫体被表达。结论本实验成功克隆和表达了日本血吸虫Sj-tsp-2基因,并纯化获得其融合蛋白,为进行动物保护性实验奠定了基础。
- 付译节杨莉刘康袁创陈县城魏于全
- 关键词:日本血吸虫TETRASPANINS克隆融合蛋白免疫原性
- 日本血吸虫tetraspanins胞外环2编码基因的克隆和表达
- 2008年
- 目的克隆和表达日本血吸虫(中国大陆株)tetraspanins胞外环2(EC-2)编码基因(Sj-tsp-2)。方法在日本血吸虫基因组中筛选获得与曼氏血吸虫tetraspanins基因胞外环2结构域序列同源的片段,经过一定修饰,采用全基因合成方式获得目的基因片段,构建重组质粒pET-32a-Sj-tsp-2,并转化至BL21(DE3)感受态细胞。经IPTG诱导表达,在非变性条件下亲和纯化融合蛋白。结果通过核苷酸测序证实重组表达质粒构建成功。SDS-PAGE结果表明,融合蛋白和目的肽段与预计大小基本一致。Western blotting结果说明,该融合蛋白具有良好的免疫原性。结论本实验成功表达了日本血吸虫Sj-tsp-2基因,并纯化获得其融合蛋白,为进行动物保护性实验奠定了基础。
- 付译节杨莉刘康袁创陈县城
- 关键词:日本血吸虫TETRASPANINS克隆融合蛋白