相平
- 作品数:11 被引量:25H指数:3
- 供职机构:天津医科大学医学检验学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划科技型中小企业技术创新基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- EPO光激化学发光定量检测方法的建立被引量:1
- 2013年
- 目的:建立双抗体夹心模式光激化学发光免疫(LiCA)技术定量检测血清促红细胞生成素(EPO)的方法,并对方法进行方法学评估。方法:采用棋盘格滴定法,用针对EPO抗原的一个单克隆抗体及两个多克隆抗体,分别包被发光微粒,及进行生物素化,两两配对筛选出最佳双抗体组合,进而确定最佳反应浓度,建立光激化学发光检测EPO的方法,建立标准曲线,评价该方法。研究中采用SPSS19.0软件和ELISA Calc进行统计分析。结果:筛选到一组最适抗体,分别与发光微粒和生物素进行连接,成功建立了EPO定量检测的双抗体夹心模式LiCA方法。该法检测的敏感性为0.09 ng/ml,在0.09~30 ng/ml范围内线性良好。批内变异系数和批间变异系数分别为2.93%和3.86%,EPO浓度高达30 ng/ml时无Hook效应。51例EPO增高及51例健康体检者EPO的测定结果与放射免疫法检测EPO比较具有良好的相关性(r=0.957),建立的参考范围为0.76~6.80 ng/ml。结论:成功建立了双抗体夹心模式的光激化学发光定量检测EPO的方法。该检测方法均具有敏感性高、免洗板、线性范围宽、背景荧光低、快速简便等特点。在EPO检测中具有极好的应用前景,有助于EPO诊断试剂盒的研制。
- 陈凯吴丹聂庆东相平任杰李会强
- 关键词:促红细胞生成素
- 新型食物不耐受sIgG定量检测方法的构建被引量:3
- 2013年
- 目的 以检测鸡蛋特异性免疫球蛋白G(sIgG)为例,探讨新型食物不耐受的定量检测方法。方法 选择行食物过敏原sIgG检测的患者173例,另择健康体检者78例为阴性对照。制备生物素化牛血清白蛋白-链酶亲和素酶标反应板,同时加入生物素化鸡蛋抗原和待检血清,洗涤后再加入酶标记抗人IgG,建立一种抗原间接包被-液相反应模式的酶联免疫方法;优化生物素化过敏原和酶标记抗体的浓度,确定反应条件。应用此方法检测血清标本中的sIgG。结果 选用生物素化蛋清作为抗原,其最适稀释比例是1∶2 000,酶标抗体的最适稀释比例是1∶12 000。此方法批内及批间变异系数分别为4.83%~8.55%,4.88%~7.93%;与蟹、牛奶、羊奶等的交叉反应率均〈10%;与临床现用食物不耐受sIgG检测法有较好的相关性(Y=0.977X+8.45,r=0.961, P 〈 0.05)。结论 本检测方法可用于检测鸡蛋不耐受患者血清sIgG,操作简便,具有较高的准确性和特异度,重复性好,并显示较好灵活性潜能,为今后研制“个性化”随机组合食物品种的检测试剂盒奠定基础。
- 相平孙静周宇捷任杰刘堂喻哼李会强
- 关键词:食物不耐受特异性IGG酶联免疫吸附测定鸡蛋
- 抗-MCV检测在类风湿性关节炎早期诊断及治疗评价中的应用被引量:6
- 2013年
- 目的探讨抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(抗-MCV)检测在类风湿性关节炎(RA)早期诊断及治疗效果评价中的应用价值。方法 RA患者84例(RA组)、关节疼痛及自身免疫性疾病患者69例(疾病对照组)、健康体检者129例(正常组),检测各组血清抗-MCV、抗环瓜氨酸肽抗体(抗-CCP)、类风湿因子(RF),观察抗-MCV、抗-CCP、RF诊断RA的敏感性及特异性,另检测62例RA患者(RA组选取)就诊时及治疗后6、12、18、24个月抗-MCV抗体、抗-CCP抗体。结果与疾病对照组及正常组比较,RA组抗-MCV、抗-CCP、RF水平升高(P均<0.05);抗-MCV抗体、抗-CCP抗体、RF诊断RA的敏感性分别为86.9%(73/84)、73.8%(62/84)和91.7%(77/84),特异性分别为96.5%(191/198)、94.9%(188/198)、77.8%(154/198),敏感性高于抗-CCP抗体,特异性明显高于RF(P均<0.05);与就诊时比较,术后12、18、24个月抗-MCV水平及术后18、24个月抗-CCP水平降低(P均<0.05)。结论抗-MCV抗体检测对RA诊断具有较好的敏感性及特异性;此外,更早的降低可能使抗-MCV抗体较抗-CCP抗体对RA患者治疗效果进行评估更为有效。
- 陈凯吴丹相平周宇捷张学军
- 关键词:类风湿性关节炎抗环瓜氨酸肽抗体
- 引起牛奶不耐受的蛋白成分分析被引量:3
- 2012年
- 目的分析引起牛奶不耐受的蛋白成分。方法脱脂奶经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis, SDS-PAGE)分离蛋白,干法转至PVDF膜并作为分析对象,以牛奶不耐受患者血清特异性IgG(specific IgG,slgG)作为识别抗体,以酶标记兔抗人IgG作为标记抗体,经免疫印记技术分析与sIgG结合的蛋白成分。结果脱脂奶经SDS—PAGE分析,主要成分酪蛋白(casein,CN)、13乳球蛋白、仅乳白蛋白、牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)条带清晰。阳性血清的免疫印记图谱显示3条明显区带,对应的蛋白组分为:免疫球蛋白、BSA和CN。结论免疫球蛋白、BSA和CN是引起牛奶不耐受的主要成分,且个体之间未见明显差别。
- 常艳敏任杰李婵相平周宇捷Anna Xue李会强
- 关键词:牛奶食物不耐受特异性IGG免疫印记
- 血清糖链抗原-125均相化学发光免疫检测方法的初建被引量:1
- 2013年
- 目的建立血清糖链抗原-125(CA125)光激化学发光免疫分析的检测方法。方法用兔抗人CA125多克隆抗体包被受体微球,1株单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲和素包被的供体微球共同组成试剂检测人血清CA125,利用棋盘滴定法确定受体微球及生物素化抗体的最适浓度并进行方法学评价。结果本方法的批内及批间精密度为3.93%~4.40%和5.60%~8.39%;功能灵敏度为3.91 U/ml,分析灵敏度为3.49 U/ml;回收率为105.14%~108.74%;特异性分析中溶血、黄疸和类风湿疾病的干扰率均<10%;本文建立方法的CA125参考值上限为26.53 IU/ml;采用本方法检测50份临床标本结果与Roche Elecsys 2010电化学发光检测法的结果相关系数为0.974。结论本研究建立的方法能够用于定量检测血清CA125,且具有免洗涤、灵敏度强、准确性高、重复性好、便于操作等优点。
- 赵爽周宇捷相平李会强孙辉
- 关键词:糖链抗原125
- 血清总IgE鲁米诺氧通道免疫分析方法的建立被引量:4
- 2013年
- 过敏性疾病是指机体与某些抗原初次接触致敏后,当再次受到相同抗原的刺激引起生理功能紊乱及组织损伤.过敏性疾病是世界上普遍流行的一种非感染性疾病,由于其病因的复杂性及病程的反复性,给临床诊断及治疗带来了一定的困难.目前,临床上常将总IgE检测作为过敏反应的筛查实验;此外,通过测定特异性IgE与总IgE的比例,还能预测临床对患者进行特异性脱敏治疗的疗效[1].目前检测总IgE的方法主要有放射免疫分析试验、酶联免疫吸附试验及化学发光免疫分析试验等,此外IgE检测芯片也被应用于过敏性疾病的检测中[2].鲁米诺氧通道免疫分析技术(luminescent oxygen channeling immunoassay,LOCI)是一种基于单线态氧能量传递,并结合免疫分析的均相免疫测定方法.本研究采用LOCI技术,建立了一种定量测定血清总IgE的方法,并进行了方法学评价.
- 周宇捷相平孙颖任杰李婵李会强
- 关键词:血清总IGE单线态氧鲁米诺酶联免疫吸附试验特异性脱敏治疗化学发光免疫分析
- 对梭子蟹过敏患者血清特异性IgE抗体针对的过敏原的异质性分析被引量:1
- 2013年
- 目的分析梭子蟹过敏患者血清特异性IgE(sIgE)抗体所针对过敏原的异质性。方法提取梭子蟹蛋白质溶液,经酶免疫印迹技术,分析50例梭子蟹过敏患者血清sIgE与梭子蟹蛋白质发生特异性结合的不同区带,并分析个体间的差异。结果针对分子量(Mr)36 000蛋白质的sIgE在患者人群中出现的频率高达80%(40/50),针对Mr 48 000、43 000蛋白质的sIgE分别达62%(31/50)和50%(25/50)。反应条带为3条及3条以上的患者总数占92%(46/50),6条反应条带的患者达30%(15/50)。结论对梭子蟹过敏患者血清中sIgE所针对的过敏原组分存在明显异质性。
- 李韶深李婵朱愉任杰丁强周宇婕相平李会强
- 关键词:过敏梭子蟹SIGE免疫印迹
- 体检人群蛋清IgG抗体检测及不耐受组分分析被引量:5
- 2014年
- 目的分析体检人群蛋清IgG抗体水平,探讨蛋清不耐受与年龄、性别的关系,并进行不耐受组分分析。方法碳酸氢钠溶解法制备蛋清提取物,并用粗提蛋白包被微孔板,采用酶联免疫吸附法检测391例健康体检者蛋清IgG水平,分析蛋清不耐受与年龄、性别的关系;电泳分析其蛋白组分,并用酶免疫印迹方法分析提取液中与IgG特异性结合的主要蛋白组分。结果本地区体检人群蛋清不耐受抗体阳性率为58.82%,其中女性(65.50%)显著高于男性(48.54%),差异有统计学意义(P<0.05);在人群中不同年龄组的不耐受率不同,且差异有统计学意义(P<0.05);酶免疫印迹结果显示,蛋清中不耐受组分主要有4种,且个体间所针对的抗原无差异。结论体检人群中普遍存在蛋清IgG抗体,且鸡蛋不耐受可能与年龄和性别相关;不同个体间蛋清主要不耐受组分无差异。
- 相平王瑞周宇捷任杰刘堂喻哼李会强
- 关键词:食物不耐受蛋清特异性IGG体检人群
- 个性化食物sIgG试剂盒的研制及本地区5种食物不耐受组分分析
- 目的: 食物不耐受是一种复杂的变态反应性疾病,它的发生与许多慢性疾病密切相关。然而,临床现用食物不耐受特异性IgG检测试剂价格昂贵、方法不灵活,限制了食物不耐受检测项目的广泛开展和临床应用。本研究旨在研制一种个性化食物...
- 相平
- 关键词:食物不耐受变态反应性疾病脱敏治疗
- 文献传递
- 血清肌钙蛋白-I均相化学发光免疫检测方法的建立被引量:1
- 2014年
- 目的:采用光激化学发光免疫分析技术建立血清肌钙蛋白-I(cTnI)均相免疫检测方法。方法:使用兔抗人cTnI多克隆抗体包被受体微球,羊抗人cTnI单克隆抗体进行生物素化与链霉亲和素包被的供体微球共同构成检测试剂,优化反应条件并进行方法学评价。结果:本方法快速、敏感,检测时间为17.5 min;分析灵敏度为0.045 ng/mL,功能灵敏度为0.053 ng/mL;回收率为104.96%~108.21%;批内精密度为3.88%~5.53%,批间精密度为7.60%~8.75%;特异性分析中各种内源性物质的干扰率均〈10%;本方法测得的cTnI正常参考值上限为1.05 ng/mL。与直接化学发光检测法具有良好的相关性(r2=0.979)。结论:本研究建立的方法能够用于定量检测血清cTnI,该方法具有均相、免清洗分离等优点,为临床提供了一个便捷高敏的检测平台。
- 李玉芹牛文彦朱黎娜周宇捷相平侯丽英贾克刚李会强
- 关键词:肌钙蛋白-I