王鹏
- 作品数：173 被引量：458H指数：12
- 供职机构：云南省地方病防治所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- 鼠疫菌纤溶酶原激活因子Pla的提取与纯化方法
- 本发明涉及一种鼠疫菌纤溶酶原激活因子Pla的提取与纯化方法，该方法包括：将鼠疫菌体经溶菌酶处理，然后经超声破碎，再进行硫酸铵盐析，得到粗提Pla蛋白；粗提Pla蛋白采用羟基磷灰石层析柱进行层析纯化，其中在上样缓冲液中加入...
- 宋志忠杜春红石丽媛王鹏杨光璨钟佑宏董珊珊
- 云南鼠疫近史疫区弥渡县鼠疫噬菌体的分离及其流行病学意义被引量：2
- 2021年
- 目的调查云南鼠疫近史疫区弥渡县鼠疫宿主动物中是否携带鼠疫噬菌体,并探讨其流行病学意义。方法选取弥渡县曾流行过鼠疫的6个乡镇进行鼠类标本(盲肠)的采集,以鼠疫疫苗株EV 76为饲养菌,采用双层平板法分离鼠疫噬菌体,分离结果利用SPSS 20.0进行描述流行病学分析,同时挑取部分噬菌体进行电镜扫描。结果(1)共获得287份标本(其中中华姬鼠123只,黄胸鼠104只,其余鼠种60只),分离到21株鼠疫噬菌体,分离率为7.32%;(2)弥渡县的2个乡镇(寅街镇、苴力镇)分离到鼠疫噬菌体,另外4个乡镇(弥城镇、新街镇、红岩镇及弥祉乡)未分离到鼠疫噬菌体;(3)21株鼠疫噬菌体中,14株分离自中华姬鼠,4株分离自黄胸鼠,2株分离自齐氏姬鼠,1株分离自臭鼩鼱;(4)初次分离到鼠疫噬菌体时,其噬斑在双层平板上呈现出多态性,大噬斑(直径3~4 mm)、中等噬斑(直径1~2 mm)及小噬斑(直径<1 mm)均存在;(5)4株代表性噬菌体皆为肌尾病毒科噬菌体。结论云南鼠疫近史疫区弥渡县普遍存在鼠疫噬菌体,可推定该地鼠疫自然疫源性长期存在,且所分鼠疫噬菌体具有一定多态性,提示应从基因组学及生态学方面,对其在鼠疫及其噬菌体微生态中的作用进行研究。
- 赵丹妮吴鹤松苏超李伟王鹏钟佑宏宋志忠
- 关键词：鼠疫流行病学
- 炭疽芽孢杆菌噬菌体的研究进展被引量：2
- 2022年
- 随着抗生素对越来越多的细菌病原体失去效力,开发替代抗生素的抗菌剂已引起越来越多研究者的关注。炭疽芽孢杆菌被认为是生物战剂之一,在生物恐怖袭击中存在潜在的威胁,然而对于它的“天敌”——炭疽芽孢杆菌噬菌体的相关研究却很少,本文就炭疽的危害、炭疽噬菌体的国内外研究现状等方面进行简要综述,以期对炭疽芽孢杆菌噬菌体有一定了解。
- 李论王鹏李伟钟佑宏
- 关键词：炭疽
- 云南省大臭鼩鼠疫噬菌体的分离鉴定及其流行病学意义
- 2023年
- 目的了解云南省大臭鼩携带鼠疫噬菌体情况,探讨其流行病学意义。方法2015-2018年,在云南省家鼠鼠疫历史疫源地、新增疫源地(1982年后)和顽固疫源地的10个调查点进行鼠疫宿主动物调查。利用大臭鼩的肠道标本分离培养鼠疫噬菌体,采用双层平板法观察噬菌斑的生长情况,电镜下观察鼠疫噬菌体的形态结构,同时检测肠道标本鼠疫耶尔森菌特异标识基因F1抗原结构基因caf1。结果共捕获大臭鼩157只,分离出16株鼠疫噬菌体,总分离率为10.19%;历史疫源地(10.00%,1/10)与顽固疫源地(16.22%,12/74)、新增疫源地(4.11%,3/73)的鼠疫噬菌体分离率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.00,P=0.965;Fisher检验,P=1.000),而顽固疫源地与新增疫源地鼠疫噬菌体分离率比较差异有统计学意义(χ^(2)=5.88,P=0.015);不同性别、生长发育期和生境鼠疫噬菌体的分离率比较差异均无统计学意义(均P>0.05);分离噬菌体的噬菌斑形态表现多样;电镜下显示4株噬菌体均为肌尾病毒科噬菌体;所有标本F1抗原结构基因caf1检测均为阴性。结论大臭鼩在云南省家鼠鼠疫疫源地分布广泛,且该动物携带一定数量的鼠疫噬菌体。定期对大臭鼩及其携带噬菌体进行监测,对云南省鼠疫监测预警有一定的指导意义。
- 赵晓飞石丽媛邵宗体苏超董珊珊杨丰义王鹏钟佑宏
- 关键词：鼠疫噬菌体流行病学
- 云南省大理市家禽艾伯特埃希菌感染调查被引量：1
- 2020年
- 目的了解大理市农贸市场家禽中艾伯特埃希菌的带染情况,为该病在大理市的预防与风险评估提供科学依据。方法2018年采集大理市不同农贸市场现宰杀活鸡的肠及内容物,经EC肉汤20℃增菌培养18~24 h后,PCR对其eae基因进行检测,阳性增菌液接种麦康凯琼脂分离纯菌,挑取eae基因阳性的疑似艾伯特埃希菌菌落进行三重PCR(clpX、lysP和mdh),并采用多位点序列分型(MLST)方法进行鉴定。结果共采集185份鸡肠及其内容物样品,检出8株疑似艾伯特埃希菌,经生化鉴定、三重PCR(clpX、lysP和mdh)、MLST分析表明该8株菌均为艾伯特埃希菌。采集样品的艾伯特埃希菌检出率为4.3%(8/185),其中以散养家禽居多的大关邑菜市场的检出率12.0%(6/50)最高,其次为古城区菜市场检出率为3.3%(1/30)。结论大理市不同农贸市场家禽中艾伯特埃希菌存在不同程度的带染状况,存在引起流行和暴发的风险。
- 张海鹏张玲闫国栋王红钟佑宏王鹏李群
- 关键词：三重PCR多位点序列分型
- 一株金黄色葡萄球菌噬菌体的裂解谱特异性和分子分类研究被引量：7
- 2021年
- 【目的】从医院污水中分离金黄色葡萄球菌噬菌体,观察其形态,确证裂解谱特征并研究生物学和基因学特性,为噬菌体的临床应用奠定实验基础。【方法】将金黄色葡萄球菌ATCC25923作为宿主菌,采用双层琼脂平板法从医院污水中分离纯化噬菌体,电镜下观察形态并测定其最佳感染复数、一步生长曲线及裂解谱;全基因组测序并进行基因结构分析和功能注释。【结果】从4份医院污水中共分离到1株金黄色葡萄球菌噬菌体(命名为vB_SauH_SAP1),仅裂解10株临床分离的葡萄球菌属受试菌(共计37株),其余74株其他种属菌株不能被裂解;透射电镜观察具有正20面体头部和收缩性尾部,属于肌尾噬菌体;其最佳感染复数为0.1,潜伏期10 min,裂解期为20 min。vB_SauH_SAP1基因组全长143375 bp,G+C含量为30.2%,编码226个开放阅读框(ORF),未发现已知的毒力相关基因和抗生素抗性基因,基因组与Kayvirus属葡萄球菌噬菌体有较高的同源性。【结论】分离到1株新的Kayvirus属金黄色葡萄球菌噬菌体,根据生物学特性和基因组研究,具有一定的潜在应用价值。
- 张志宏杨娇张海鹏钟佑宏王鹏
- 关键词：金黄色葡萄球菌全基因组测序基因组研究
- 云南省大足鼠中鼠疫噬菌体的分离及其流行病学意义被引量：1
- 2021年
- 目的调查云南省鼠疫宿主动物大足鼠中携带鼠疫噬菌体的情况,并探讨其流行病学意义。方法2015-2017年,在云南10个县(市)进行捕鼠,对捕获的大足鼠取肠道标本置于改良PBS中进行增菌,上清用0.22μm除菌滤器过滤后以鼠疫疫苗株EV76为饲养菌,采用双层平板法分离肠道标本中的鼠疫噬菌体;对肠道标本增菌液进行鼠疫菌特异基因caf1检测;对分离结果进行流行病学分析。结果共采集2230份鼠类标本,其中大足鼠23份,从中分离到4株鼠疫噬菌体,总分离率17.39%;其中玉溪峨山县分离到3株鼠疫噬菌体,分离率为(17.64%,3/17),西双版纳州勐海县捕获的唯一1只大足鼠中分离到1株鼠疫噬菌体;所分鼠疫噬菌体进行电镜观察显示为肌尾科噬菌体;所有标本caf1基因检测均为阴性。结论云南省大足鼠中存在一定数量的鼠疫噬菌体分布且具有多态性,其对鼠疫的传播、鼠疫菌保存及微生态作用还不明确,值得对其生物学及基因组学做进一步研究。
- 张海鹏金晓高金莲杨丰义王鹏钟佑宏
- 关键词：大足鼠
- 云南省剑川县鼠疫疫源地分离菌株基因组多态性被引量：5
- 2020年
- 目的阐明云南剑川野鼠疫源地鼠疫菌种群的演化及其与云南省其他疫源地菌株之间的遗传进化关系。方法按不同时间、不同疫点、不同分离源,随机选取24株剑川分离鼠疫菌进行研究;采用差异区段(DFR)、规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPRs)及多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)进行基因组多态性分析;以DFR+CRISPRs聚类分析划分簇,再以MLVA26对簇进行聚类分析。结果24株剑川菌株中,20株菌聚为一个簇(剑川野鼠鼠疫簇);2017年疫情分离3株菌位于丽江野鼠鼠疫簇,与丽江菌株(2017LZ)存在2个位点的差异(N2577,M23);剩余1株为一个独立株;50年代菌株与其邻近的80年代菌株间位点差异未超过3。结论剑川原野鼠疫源地的发现时间可往前推至上世纪50年代,同时疫情还波及过家鼠和人群;剑川县境内存在2种类型的野鼠疫源地,其鼠疫防控具有复杂性,应继续加强鼠间鼠疫的动态监测。
- 石丽媛丁奕博张海鹏郭英段存娟谭红丽董珊珊钟佑宏王鹏
- 关键词：鼠疫
- 2011年-2013年北京市顺义区儿童呼吸道感染病毒谱分析被引量：5
- 2015年
- 目的分析北京市顺义区儿童呼吸道感染病毒谱。方法利用实时荧光PCR法和多重RT-PCR法,对2011年-2013年收集的161份患儿咽拭子标本进行9种常见呼吸道病毒的检测。结果在161份样本中,儿童呼吸道病毒阳性率为40.37%,其中呼吸道合胞病毒和鼻病毒阳性率最高(6.83%),其次为肠道病毒(4.35%)和副流感病毒(3.73%),多种病毒混合感染阳性率为11.18%;RSV和HRV在各年龄组均有检出,但在<1岁年龄组中检出阳性率最高;不同季节检出的优势呼吸道病毒也不同。结论呼吸道合胞病毒、鼻病毒、肠道病毒和副流感病毒是顺义区儿童呼吸道感染病例的主要病原体,且不同年龄组、不同季节的病毒谱不同。
- 荆红波朱红霞王鹏张爽张彦春李颖
- 关键词：呼吸道病毒儿童聚合酶链式反应
- 鼠疫耶尔森菌caf1M基因的克隆表达及其产物免疫学评价被引量：1
- 2010年
- 目的原核表达有免疫学活性的重组caf1M蛋白(rCaf1M),并以此建立检测鼠疫抗体的辅助诊断方法。方法将去掉信号肽编码序列的caf1M基因片段与载体pGEX4t-1通过NcoⅠ和XhoⅠ双酶切位点进行连接,构建重组质粒caf1M-pGEX4t-1;将caf1M-pGEX4t-1转化入E.coliBL21(DE3)中诱导表达;表达产物rCaf1M经亲和层析进行纯化;以纯化rCaf1M及天然F1抗原喷制鼠疫抗体双检测NC膜,并以浙江各6份F1抗体阳性及阴性人血清标本进行应用评价。结果含有重组质粒caf1M-pGEX4t-1的BL21,经诱导产生了分子量约为55×103的rCaf1M融合蛋白;rCaf1M融合蛋白与鼠疫菌免疫血清有较好反应;在浙江人血清标本的检测中,rCaf1M与F1抗体阳性者有明显反应,与F1抗体阴性者无反应。结论本研究制备的rCaf1M,与鼠疫菌免疫血清具有良好的免疫反应性,该rCaf1M可用于鼠疫辅助免疫学检测。
- 王鹏石国祥程苏云王海滨俞东征张建中
- 关键词：鼠疫克隆表达免疫学活性
