公共文化服务平台

共 6 条记录，以下是 1-6

全选清除导出

排序方式：

肺癌中结肠多发性腺瘤样息肉基因启动子1A序列甲基化模式的研究被引量：10: 2006年; 目的探寻结肠多发性腺瘤样息肉(APC)基因启动子1A序列中肺癌甲基化位点及其存在模式。方法用甲基化序列特异性引物,对阳性控制样品(CB+)、阴性控制样品(CB-)、13份正常肺组织及19份肺癌组织进行APC基因启动子1A序列甲基化特异性扩增(MSP),其扩增产物直接测序和进行克隆测序分析。结果在19份肺癌组织中,APC基因启动子1A序列的707、714、719和726位点发生高甲基化,甲基化率分别为95%(18/19)、74%(14/19)、74%(14/19)和74%(14/19),与正常肺组织比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。而679和687位点甲基化发生率均为11%(2/19),与正常肺组织甲基化发生率(0/13)接近(P>0.05)。结论在APC基因启动子1A序列中存在CPG胞嘧啶二核苷酸特定甲基化模式,其对肺癌早期诊断可能有重要意义。; 潘世扬张寄南魏源华姚孝明王贤黎青黄珮珺杨笛束永前童明庆; 关键词：甲基化肺肿瘤

芯片技术用于APC基因启动子甲基化定量检测被引量：3: 2006年; 目的研制抑癌基因APC启动子1A的甲基化定量检测芯片,对临床标本进行初步定量检测分析。方法采用脐带血DNA克隆体作为阴性、阳性质控品建立芯片,提取6例健康人的肺组织DNA、6例肺癌患者的肺组织和癌组织DNA,进行亚硫酸盐化学修饰,以甲基化特异性引物进行基因扩增,与探针杂交检测,并进行甲基化特异性序列分析。结果甲基化阳性、阴性质控品的芯片检测与测序结果吻合。687、707、714、719和726共5个位点的荧光强度标准曲线的R2为0．93-0．99。687、707、714、719和726共5个位点非甲基化的检测范围:(0±8．7)％、(0±17．6)％、(0±17)％、(0±13)％、(0±8)％;甲基化杂合型的检测范围:(50±3．6)％、(50±6．9)％、(50±3．5)％、(50±8．5)％、(50±7．3)％。标本的芯片检测与测序结果一致。结论本研究首次建立了以微阵列技术为基础的APC基因启动子甲基化定量检测芯片。; 王贤潘世扬陆祖宏程璐魏源华张丽霞陈丹张寄南; 关键词：APC基因甲基化芯片

APC基因甲基化定量检测芯片的建立: 目的建立抑癌基因APC(adenomatous polyposis coli,APC)启动子1A的甲基化定量芯片检测方法。方法选取一段420bp的APC基因启动子1A CpG密集序列作为靶序列,针对M0、M1、M2、M3...; 潘世扬王贤张丽霞陆祖宏程璐陈丹张寄南; 关键词：DNA甲基化芯片 APC基因; 文献传递

K-RAS基因突变的套式PCR检测及其在大肠癌中的应用被引量：2: 2006年; 目的探讨高敏感性K-RAS基因点突变检测方法在大肠癌临床的应用价值。方法用套式聚合酶链反应结合限制性片段多态性分析(PCR-RFLP)检测大肠癌组织及其癌旁组织K-RAS基因第12密码子点突变。结果癌组织K-RAS基因第12密码子点突变率为12%(4/34),表现为GGT→GAT和GGT→GTT,癌旁组织无K-RAS突变。伴有12密码子突变的大肠癌以隆起型为主,患者年龄较大,均属C和D期。结论大肠癌患者K-RAS基因突变与患者的年龄、肿瘤的大体形态和患者Dukes分期等临床病理参数有关。; 顾进潘世扬戎国栋黄珮珺魏源华王贤陈丹张丽霞胡宜蘅; 关键词：结肠肿瘤直肠肿瘤突变

APC基因甲基化定量检测芯片的建立被引量：1: 2008年; 目的建立抑癌基因APC(adenomatous polyposis coli,APC)启动子1A的甲基化定量芯片检测方法。方法选取一段420bp的APC基因启动子1A CpG密集序列作为靶序列,针对M0、M1、M2、M3、M45个CpG靶位点,设计一套检测甲基化与非甲基化的探针。采用脐带血DNA克隆体作为阴性、阳性质控品。结果甲基化阳性、阴性质控的芯片结果与测序吻合。每组探针中荧光强度由强至弱依次为,阳性质控(甲基化):探针1>2、3>4;阴性质控(非甲基化):探针3>4、1>2。5个位点的5条荧光强度标准曲线,R2范围是0.93～0.99。M0、M1、M2、M3、M45个位点甲基化杂合型的检测范围分别为50.0%±3.6%、50.0%±6.9%、50.0%±3.5%、50.0%±8.5%、50.0%±7.3%。结论建立了APC基因启动子5个CpG位点的甲基化定量检测芯片。; 潘世扬王贤张丽霞陆祖宏程璐陈丹张寄南; 关键词：DNA甲基化芯片

甲基化特异性基因扩增检测过程中的质量控制被引量：2: 2006年; 目的构建adenomatous polyposis coli(APC)基因启动子1A的甲基化阳性质粒标准品,对甲基化特异性基因扩增(meth-ylation specific PCR,MSP)的检测灵敏度进行质量控制。方法对脐血淋巴细胞DNA转甲基并化学修饰,制备甲基化阳性和阴性模板,MSP后获得目的片段,克隆到pMD18-T质粒载体,测序筛选阳性和阴性质粒标准品,紫外分光法对标准品定量,对10倍梯度稀释的质粒进行SYBR Green I荧光定量PCR来获得弱阳性质控品,对36份组织样本进行MSP检测。结果将MSP后电泳能显示的质粒(105拷贝/ml)作为弱阳性质控品。在加入弱阳性质控品后,2例阴性的样本最终定为阳性;11例未定结果的样本最终7例定为阳性,4例定为阴性。36例样本无质控品前的甲基化阳性率为25%,有质控品后的阳性率为50%,两次结果差异显著(P=0.001)。结论构建了携带甲基化阳性的APC基因启动子的质粒标准品并制备了低拷贝的弱阳性质控品,可以对MSP检测灵敏度进行质量控制,降低了检测的假阴性率。; 魏源华潘世扬王贤陈丹张丽霞黄珮珺童明庆张寄南; 关键词：甲基化特异性PCR APC基因

全选清除导出

共1页<1>

王贤