王肇悦
- 作品数：39 被引量：166H指数：8
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金国家葡萄产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学化学工程更多>>
- 具有α-淀粉酶分泌活性以及低双乙酰产量的啤酒酵母工程菌的构建被引量：4
- 2008年
- 扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)因具有较强的α-淀粉酶以及葡聚糖酶活性,使其在以淀粉为唯一碳源的培养基上能够良好的生长。从其基因组中克隆了α-淀粉酶的编码区,构建了由酵母磷酸甘油酸激酶基因(PGK1)启动子、酿酒酵母α-因子信号序列以及扣囊复膜酵母α-淀粉酶基因编码序列组成的基因表达盒。将该表达盒插入到质粒pPLZ-2的ILV2基因序列内部,使其两翼具有ILV2基因的同源区。将该表达盒通过同源重组的方式整合到啤酒酵母工业菌株YSF-5的α-乙酰乳酸合成酶(AHAS)基因ILV2内部。在以淀粉为唯一碳源的培养基上进行转化子的筛选。通过多对引物PCR、α-淀粉酶活性以及AHAS活性分析对转化子进行鉴定,得到一株具有α-淀粉酶分泌表达活性、较低AHAS活性,并且发酵液中双乙酰产量也相对较低的啤酒酵母工程菌。该菌株在非选择压力条件下连续培养50代后仍然保持其遗传稳定性。还对pH、温度以及金属离子对该转化菌株的α-淀粉酶活性的影响进行了研究。由于所构建的菌株不含有非酵母来源的DNA,所以生物安全性相对较高,对酵母育种以及啤酒生产工业都具有较为重要的意义。
- 张峰王肇悦刘楠何秀萍张博润
- 关键词：Α-淀粉酶双乙酰
- 采用自克隆技术构建高SOD、低双乙酰的啤酒酵母工程菌被引量：1
- 2009年
- 用来源于啤酒酵母自身的超氧化物歧化酶基因SOD1、铜抗性基因CUP1、3-磷酸甘油酸激酶基因PGK1启动子和α-factor基因取代α-乙酰乳酸合成酶基因ILV2内部约1.1kb的片段,得到重组质粒pMC572,采用同源重组的方法将用内切酶酶切质粒pMC572得到的含有SOD1、CUP1、PGK1和α-factor以及ILV2两端序列的片段转化啤酒酵母工业菌株YSF31,并通过铜抗性、PCR和AHAS酶活测定筛选得到转化子。结果表明啤酒酵母工程菌胞内的SOD能够分泌到胞外,乙偶姻的含量也只有受体菌的50%,而其他发酵指标并没有发生变化。
- 母茜蔡勇王肇悦张博润任正隆
- 关键词：啤酒酵母超氧化物歧化酶乙偶姻
- 低乙醇脱氢酶Ⅱ活性的抗老化啤酒酵母工程菌的构建被引量：2
- 2008年
- 采用自克隆技术,破坏啤酒酵母工业菌株YSF31的ADH2基因,在ADH2基因位点插入来源于YSF31的编码γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的GSH1基因和铜抗性筛选标记CUP1基因。通过铜抗性筛选转化子,经PCR和乙醇脱氢酶Ⅱ(ADHⅡ)活性测定验证,获得了1株啤酒酵母工程菌。10°P麦芽汁发酵实验显示,自克隆菌株的乙醇脱氢酶Ⅱ活性是受体菌的65%,谷胱甘肽含量比受体菌YSF31的高34%。其他发酵指标并没有发生明显改变。由于DNA操作过程中没有外源基因介入,因此啤酒酵母工程菌为生物安全的自克隆菌株,具有重要的应用价值。
- 蔡勇母茜王肇悦张博润晏本菊
- 关键词：谷胱甘肽
- 纯生啤酒泡沫稳定性的影响因素及改善策略被引量：8
- 2006年
- 简要介绍了纯生啤酒泡沫稳定性的主要影响因素———泡沫阳性蛋白和酵母蛋白酶A对啤酒泡沫的影响及影响机理,并简要介绍了改善纯生啤酒泡沫的主要策略。
- 王肇悦何秀萍刘楠张博润
- 关键词：纯生啤酒蛋白酶A基因敲除
- 生物合成γ-氨基丁酸酿酒酵母谷氨酸脱羧酶基因的克隆与表达被引量：6
- 2015年
- 为了提高酵母菌的γ-氨基丁酸产量,本研究以十六烷基三甲基溴化铵法(hexadecyl trimethy ammonium bromide,CTAB)提取的酿酒酵母28基因组DNA为模板,扩增得到序列长度为1 758 bp的GAD1基因,经比对与S.cerevisiae S288c的一致性达到98.58%,并设计引物扩增包括GAD1基因上游启动子及调控序列,下游终止子在内的全长基因序列,长度为3 490 bp。将全长基因序列克隆至高拷贝质粒p UG6,构建重组质粒p28。以菌株28作为出发菌株进行转化,经G418抗性筛选得到转化子,进一步经过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)实验验证,质粒提取及酶切验证,确证得到重组子DL28。经重组质粒p28的特性研究得知,重组质粒p28具有良好的遗传稳定性,无抗性传代培养10次重组质粒不丢失。转化后进行酶活力测定,重组子DL28的谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)酶活力比菌株28提高73.8%。通过以上实验结果得出结论,GAD基因高表达菌株DL28具有更高的G418抗性和GAD酶活性。
- 乌云达来张博润郭雪娜王肇悦
- 关键词：酿酒酵母菌Γ-氨基丁酸谷氨酸脱羧酶克隆
- 乳酸酵母菌的研究现状及其在饲料添加剂中的功能被引量：9
- 2009年
- 随着科学技术的不断进步与生活质量的逐渐提高,消费者对于动物源性食品的质量、安全性及环保性的要求越来越高。采用饲料添加剂的目的不仅仅是为提高动物源性食品的产量,更主要的是降低动物源性食品携带人类病原菌的风险以及减少有毒物质的释放,如毒性胺、甲烷等。文中论述了国内外有关乳酸酵母菌(一种新型微生物饲料添加剂)的研究现状,及其在微生物饲料添加剂中的功能和应用前景。
- 崔黎郭雪娜王肇悦何秀萍张博润
- 关键词：微生物饲料添加剂乳酸酵母菌
- 酵母菌合成2-苯乙醇的研究进展被引量：23
- 2016年
- 2-苯乙醇是一种具有令人愉悦的玫瑰风味的芳香醇,在食品、化妆品和药品等领域具有广泛的应用。本文对酵母菌合成2-苯乙醇的代谢途径及其调控过程、以及提高2-苯乙醇产量的国内外研究进展进行了综述,并对通过微生物转化法合成2-苯乙醇目前存在的不足及进一步研究方向进行了讨论。
- 陈先锐王肇悦何秀萍
- 关键词：酵母2-苯乙醇代谢途径基因
- 葡萄酒中酿酒酵母产生的重要香气化合物及其代谢调控被引量：25
- 2012年
- 在葡萄酒的发酵过程中,酿酒酵母(Saccharomy cescerevisiae)可以代谢产生多种香气活性化合物来影响葡萄酒的风味,其中醇类、酯类和挥发性硫化物是较为重要的3类。本文在分别介绍3类化合物对葡萄酒风味影响的基础上,综述它们在葡萄酒酿制过程中的合成代谢及其基因调控,指出这些理论研究在优良酵母菌株的筛选和基因工程菌株改造方面所具有的指导意义。
- 郝瑞颖王肇悦张博润刘延琳
- 关键词：酿酒酵母葡萄酒风味代谢途径基因调控
- 一种产2-苯乙醇的酿酒酵母工程菌及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种产2-苯乙醇的酿酒酵母工程菌及其制备方法与应用。本发明公开了一种制备产2-苯乙醇的酿酒酵母工程菌的方法，包括向受体酿酒酵母中导入GATA转录因子Gln3p的编码基因，得到产2-苯乙醇的酿酒酵母工程菌。本发...
- 陈先锐王肇悦白雪晶郭雪娜何秀萍张博润
- 文献传递
- 自克隆技术在工业啤酒酵母改良中的研究概况被引量：3
- 2006年
- 自克隆技术由于具有生物安全的优点,已成为对工业微生物、尤其是食品微生物进行遗传修饰的首选技术,简要介绍了自克隆技术在工业啤酒酵母菌种改良中的研究概况。
- 王肇悦张峰何秀萍张博润
- 关键词：啤酒酵母菌种改良
