您的位置： 专家智库 > >

王帅

作品数：4 被引量：2H指数：1
供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 3篇偶联蛋白
  • 3篇解偶联
  • 3篇解偶联蛋白
  • 3篇解偶联蛋白-...
  • 2篇脂肪
  • 2篇脂肪肝
  • 2篇细胞
  • 2篇慢病毒
  • 2篇基因
  • 2篇肝细胞
  • 2篇肝细胞损伤
  • 1篇饮食诱导
  • 1篇原代肝细胞
  • 1篇再灌注
  • 1篇再灌注损伤
  • 1篇缺血
  • 1篇缺血再灌注
  • 1篇缺血再灌注损...
  • 1篇细胞死亡
  • 1篇基因表达

机构

  • 4篇华中科技大学

作者

  • 4篇万赤丹
  • 4篇王帅
  • 4篇王春友
  • 4篇程锐
  • 4篇刘涛
  • 3篇王宏博

传媒

  • 1篇中国康复
  • 1篇中华器官移植...
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇华中科技大学...

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2009
  • 2篇2008
共 4 条 记 录，以下是 1-4
全选 清除 导出
排序方式：
解耦联蛋白-2基因敲除减轻高脂饮食诱导小鼠脂肪肝缺血再灌注损伤
2010年
目的 观察解耦联蛋白-2（UCP-2）基因在脂肪肝缺血再灌注损伤中的作用,探讨以UCP-2为靶点的脂肪供肝预处理新途径.方法 实验动物分为3组：实验组（A组）：UCP-2基因敲除小鼠,给予高脂饮食（n=20）;空白对照组（B组）：野生型同系小鼠,给予正常饮食（n=20）;阴性对照组（C组）：野生型同系小鼠,给予高脂饮食（n=20）.喂养6个月,建屯小鼠脂肪肝模型.各组小鼠阻断门静脉缺血15 min,再灌注24 h后处死,检测肝组织中UCP-2基因表达及三磷酸腺苷（ATP）、活性氧族（ROS）、乳酸脱氢酶（LDH）水平;并行血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）检测及肝组织病理学检测.结果 高脂饮食喂养6个月后成功建立小鼠脂肪肝模型;Western blot证实A组小鼠UCP-2无表达,C组表达明显高于B组;A组ALT、AST、ATP、ROS、LDH的定量值为：（55.33±5.51）、（128.33±7.02）U/L、（28.00±2.00）nmol/L、（165.33±7.09）、（1176.00±22.27）U/pmt;B组上述指标为（25.00±4.58）、（85.33±4.51）U/L、（24.33±4.16）nmol/L、（147.33±7.51）、（707.33±31.64）U/prot;C组为（142.67±13.01）、（220.67±7.02）U/L、（8.67±1.53）nmol/L、（65.00±5.00）、（1748.33±42.52）U/prot,A组和C组差异有统计学意义（P〈0.05）;病理检测表明A组损伤轻于C组.结论 抑制解耦联蛋白-2基因表达能在减轻小鼠脂肪肝急性损伤.
程锐王帅刘涛王春友万赤丹
关键词：脂肪肝缺血再灌注损伤
过表达解偶联蛋白-2基因加重原代肝细胞急性损伤被引量：1
2009年
目的研究解偶联蛋白-2(uncoupling protein-2,UCP-2)基因在肝细胞急性损伤过程中的作用。方法构建小鼠UCP-2基因过表达慢病毒载体;二步胶原酶灌注法分离培养小鼠原代肝细胞;慢病毒感染肝细胞,使肝细胞中UCP-2基因表达上调;荧光显微镜镜检确定感染效率,Real ti me PCR检测UCP-2表达;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作用于病毒感染肝细胞24 h后,检测细胞上清液中谷丙转氨酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;碘化丙啶(PI)染色流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡因子Caspase 3的活化。结果Real ti me PCR检测证实目的细胞中UCP-2表达上调;TNF-α作用后病毒感染的实验组上清液中ALT和LDH水平、细胞凋亡率、凋亡因子Caspase 3活化程度均高于对照组(均P<0.05)。结论UCP-2基因过度表达可加重肝细胞急性损伤。
万赤丹程锐王春友王宏博王帅刘涛
关键词：解偶联蛋白-2慢病毒肝细胞损伤
抑制解偶联蛋白-2基因表达减轻急性脂肪肝细胞损伤
2008年
目的探讨下调解偶联蛋白2（UCP-2）基因的表达对脂肪肝细胞损伤的影响，为存在脂肪变性的供肝提供治疗靶点。方法采用二步胶原酶灌注法分离C57BL／6 J—ob／ob转基因肥胖小鼠的原代脂肪肝细胞，用靶向小鼠UCP-2基因的RNA干扰慢病毒载体感染所获得的脂肪肝细胞，实现对UCP2基因的特异性敲减（实验组），另以空载体感染的脂肪肝细胞为对照。荧光显微镜镜检确定感染效率，实时聚合酶链反应鉴定敲减效果。以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作用于感染后的肝细胞，24h后以碘化丙啶染色。流式细胞仪检测细胞凋亡情况；Western印迹法检测凋亡蛋白酶-3（Caspase-3）的活化。结果UCP2基因表达被有效抑制，UCP-2基因的敲减率约为75％。实验组的肝细胞凋亡率为（4．97±0．25）％，明显低于对照组的（21．13±1．28）%（P〈0．05），其Caspase-3的活化程度也低于对照组。结论抑制UCP-2基因表达能减轻脂肪肝细胞的损伤。
程锐王春友刘涛王宏博王帅万赤丹
关键词：解偶联蛋白-2基因表达脂肪肝细胞死亡
解偶联蛋白-2 RNA干扰慢病毒载体的构建被引量：1
2008年
目的:构建解偶联蛋白-2(UCP-2)基因的RNA干扰慢病毒载体。方法:根据RNA干扰序列设计原则,针对UCP-2mRNA(NM_011671)设计3个RNA干扰靶点序列,合成含干扰序列的DNA双链,酶切后连入慢病毒转移质粒pGCL-GFP中。连接产物转化感受态细胞,所获克隆行PCR鉴定和序列测定。构建成功的RNA干扰质粒与UCP-2表达质粒共转染293T细胞,荧光显微镜下观测转染效果,Western blot检测UCP-2蛋白表达,筛选出干扰效果最好RNA干扰质粒。将该质粒与两种辅助包装原件载体质粒pHelper1.0(gag/pol元件)载体,Helper2.0(VSVG元件)共转染293T细胞包装成慢病毒并检测滴度。结果:PCR和测序结果显示针对3个靶点的RNA干扰质粒均构建成功;通过Westernblot检测获得最优干扰靶点,并成功包装成滴度为5×108TU/ml的慢病毒。结论:成功构建可供感染的解偶联蛋白-2RNA干扰慢病毒载体,为后续靶向抑制该基因表达以提高脂肪肝移植成功率的研究奠定物质基础。
万赤丹程锐王春友王宏博王帅刘涛
关键词：解偶联蛋白-2RNA干扰慢病毒
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0