王宏
- 作品数:6 被引量:13H指数:2
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- 结核杆菌抗原特异性激活和扩增γδT细胞
- 2007年
- 目的探讨用结核杆菌低分子多肽抗原激活和扩增γδT细胞的方法。方法分离获取健康人PBMC,用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb—Ag)或CD3mAb刺激PBMC,通过流式细胞仪检测总T细胞和佛细胞CD69分子的动态表达(6~72h)及细胞增殖培养10d后78T细胞的比例,用MTT试验检测细胞毒活性。结果对Mtb—Ag的刺激,总T细胞和柙细胞均在活化刺激24h时表达CD69分子达高峰,但总T细胞仅为16.0%,γδT细胞可达75.2%;新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为(5.37±0.64)%(n=5),在刺激培养10d后,CD3mAb组为(1.37±0.38)%(n=5),Mtb—Ag组为(69.67±1.46)%(n=5)。结论Mtb—Ag可特异性激活T细胞,用Mtb—Ag刺激T细胞活化增殖培养,可获得大量的T细胞。
- 侯彦强孙文化彭亮王宏王克强
- 关键词:ΓΔT细胞抗肿瘤抗感染
- 细胞外基质蛋白1基因及蛋白在乳腺癌组织中的表达及其意义
- 2010年
- 目的在基因和蛋白水平探讨细胞外基质蛋白1(ECM1)在乳腺癌中的表达及意义,并比较两种检测方法的应用价值。方法应用实时荧光定量PCR基因检测方法和免疫组织化学法分别检测乳腺组织(正常组织和癌组织)中ECM1基因(mRNA)和蛋白的表达,并比较正常乳腺组织和乳腺癌组织之间的ECM1表达差异。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析评估应用价值。结果乳腺癌组织中ECM1在基因和蛋白水平表达均明显高于正常组织(P<0.01),两者均有较好的诊断价值[实时荧光定量PCR基因检测曲线下面积(AUC)为0.834±0.038,免疫组织化学检测AUC为0.773±0.048]。结论 ECM1在乳腺癌组织中过表达,具有潜在的作为乳腺癌肿瘤标记物的应用价值。
- 侯彦强李梅彭亮曹辉王宏孙文化
- 关键词:乳腺肿瘤细胞外基质蛋白质类聚合酶链反应
- 2型糖尿病患者血脂、血液流变学水平变化分析被引量:6
- 2008年
- 目的探讨2型糖尿病患者血脂、血液流变学水平变化,分析两者之间的相关性。方法检测80例健康体检者和121例2型糖尿病患者血脂、血液流变学指标,进行比较分析。结果2型糖尿病患者血脂、血液流变学多数指标与健康者相比有显著异常改变,显著升高或降低(p<0.01)。结论2型糖尿病患者常伴随血脂、血液流变学的改变,表现为高脂血症和高黏血症,2型糖尿病患者应重视血脂、血液流变学的检测及高脂血症和高黏血症的纠正治疗。
- 孙文化侯彦强王宏孙春红姚建云
- 关键词:2型糖尿病血脂血液流变学
- T细胞的扩增及其信号转导分子ZAP-70的检测
- 2010年
- 目的检测γδT细胞信号转导分子ζ链相关蛋白-70(ζ-chainassociated protein70,ZAP.70)。方法分离获取健康人PBMC,用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb.Ag)刺激PBMC,通过流式细胞仪检测总T细胞和丫6T细胞CD69分子的动态表达;Mtb-Ag活化俩T细胞增殖培养,10d后收集细胞,用免疫磁珠阳性分选法分离获取高纯度的γδT细胞;westernblot方法检测γδT细胞内的ZAP.70分子。结果总T细胞和γδT细胞均在活化刺激24h时表达CD69分子达高峰,但总T细胞仅为16%,γδT细胞可达75.2%;新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为4.9%,Mtb-Ag刺激培养10d后升为69.2%,免疫磁珠阳性分选后达99-3%;检测到Y6T细胞内的ZAP-70分子。结论Mtb-Ag可特异性激活俩T细胞,用Mtb-Ag刺激γδT细胞活化增殖培养,可获得大量的γδT细胞;成功地检测到细胞内ZAP-70分子,这为Y6T细胞内其它分子的检测分析奠定方法学基础,也为进一步检测γδT细胞活化信号转导过程中ZAP-70分子的激活及作用奠定基础。
- 孙文化彭亮王宏侯彦强
- 关键词:ΓΔT细胞ZAP-70
- T细胞的扩增及其信号转导分子ZAP-70的检测
- 2010年
- 目的检测Y6T细胞信号转导分子ξ链相关蛋白-70(ξ-chain associated protein70,ZAP-70)。方法分离获取健康人PBMC,用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)刺激PBMC,通过流式细胞仪检测总T细胞和Y6T细胞CD69分子的动态表达;Mtb-Ag活化γδT细胞增殖培养,10d后收集细胞,用免疫磁珠阳性分选法分离获取高纯度的γδT细胞;western blot方法检测俩T细胞内的ZAP-70分子。结果总T细胞和γδT细胞均在活化刺激24h时表达CD69分子达高峰,但总T细胞仅为16%,γδT细胞可达75.2%;新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为4.9%,Mtb-Ag刺激培养10d后升为69.2%,免疫磁珠阳性分选后达99.3%;检测γδT细胞内的ZAP-70分子。结论Mtb—Ag可特异性激活γδT细胞,用Mtb-Ag刺激γδT细胞活化增殖培养,可获得大量的γδT细胞;成功地检测到细胞内ZAP-70分子,这为γδT细胞内其它分子的检测分析奠定方法学基础,也为进一步检测γδT细胞活化信号转导过程中ZAP-70分子的激活及作用奠定基础。
- 孙文化彭亮王宏侯彦强
- 关键词:ΓΔT细胞ZAP-70