牟旭鹏
- 作品数:22 被引量:32H指数:3
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划黑龙江省教育厅科学技术研究项目吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 甲型流感病毒M2e与人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达被引量:1
- 2010年
- 目的将甲型流感病毒M2蛋白胞外区(M2e)基因与人血清白蛋白(HSA)基因融合,以构建高效分泌表达的毕赤酵母菌株。方法通过RT-PCR扩增HSA基因,构建pPICZα-HSA质粒,将人工合成的M2e序列与pPICZα-HSA质粒分别经BstBI和KpnI酶切消化后连接,构建真核表达载体pPICZα-HSA/M2e,线性化后电转化毕赤酵母X-33。用PCR法筛选Zeocin抗性阳性的克隆,SDS-PAGE和Western印迹法筛选高表达HSA/M2e菌株。结果经RT-PCR法克隆的HSA基因序列与GenBank登录的cDNA序列一致,构建的pPICZα-HSA/M2e真核表达载体,经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆。SDS-PAGE和Western印迹分析证实了甲醇诱导的培养基上清中含有HSA/M2e,分子量约为68kD。结论成功构建了分泌表达重组HSA/M2e融合蛋白的毕赤酵母菌株,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。
- 牟旭鹏韦安慧申茉函孔宁颜炜群
- 关键词:甲型流感病毒血清白蛋白毕赤酵母
- 一种可降解PLK1和BRD4蛋白的化合物及其应用
- 本发明涉及药物化学领域,具体涉及一种可以靶向泛素化降解PLK1和BRD4蛋白的化合物,及其药学上可接受的盐和以该化合物为活性成分的药物组合物,以及在制备PLK1和BRD4蛋白抑制和降解剂,及其用于作为治疗剂特别是作为治疗...
- 路海滨牟旭鹏白丽婷高卓林王莹赵麟萱
- 文献传递
- 一种冷冻处理细胞及其制备方法和应用
- 本发明适用于生物医药技术领域,提供了一种冷冻处理细胞及其制备方法和应用。本发明采用冷冻处理的人脐带间充质干细胞(CK‑MSCs)作为米托蒽醌(MTX)的载体,实现了药物在肿瘤部位的精准递送和pH敏感的控制释放,显著提高了...
- 姜金兰王成燃荣鑫奥牟旭鹏张福强
- rhTRAIL对黑色素瘤A-375细胞凋亡的影响被引量:2
- 2008年
- 目的:研究重组人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(rhTRAIL)对黑色素瘤A-375细胞生长及诱导细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:将培养的黑色素瘤A-375细胞分为对照组和rhTRAIL低、中、高剂量组(0.25、0.50、1.00mg·L^(-1)),经不同剂量rhTRAIL作用后,观察细胞形态;MTT法检测细胞存活分数;TUNEL法检测细胞凋亡率;流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化。结果:对照组细胞呈梭形贴壁或半贴壁生长,rhTRAIL组一部分细胞变圆,贴壁不佳,细胞数低于对照组。与对照组比较,rhTRAIL明显抑制黑色素瘤A-375的生长,1.00mg·L^(-1)组的生长抑制率最高,0.50mg·L^(-1)组次之,0.25mg·L^(-1)组最低,3组间比较差异有显著性(P<0.05)。流式细胞检测结果显示,rhTRAIL蛋白可诱导A-375细胞凋亡,rhTRAIL低、中、高剂量组细胞凋亡率分别为6.68%、24.59%和28.91%,且凋亡率随剂量增大而升高,3组间比较差异有显著性(P<0.05)。rhTRAIL低、中、高剂量组细胞处于G1期的百分率(45.26%、60.67%和69.10%)明显高于对照组(37.41%)(P<0.05)。结论:rhTRAIL对A-375细胞生长有显著的抑制作用,呈剂量依赖性,其机制可能与细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡有关。
- 陈伟莉牟旭鹏班磊刘韦申茉函颜炜群
- 关键词:黑色素瘤TRAIL细胞凋亡细胞周期
- 重组人碱性成纤维细胞生长因子在大豆毛状根中的表达被引量:1
- 2007年
- 目的利用基因重组技术在大豆毛状根中表达hbFGF。方法将hbFGF基因克隆到pCambia1301载体,以大豆子叶节和下胚轴为外植体,通过发根农杆菌C58C1介导转入到大豆中。经潮霉素抗性筛选,PCR法检测hbFGF基因的整合。用Western blot印迹分析hbFGF的表达。结果阳性毛状根中整合并表达了hbFGF基因。结论克隆hbFGF基因并转染到大豆的毛状根中,在毛状根中表达。
- 陈伟莉范伟全张新民刘楠韦安慧孔宁牟旭鹏颜炜群
- 关键词:碱性成纤维细胞生长因子大豆发根农杆菌毛状根
- HER2/neu ECD毕赤酵母工程菌大规模发酵工艺研究被引量:1
- 2008年
- 采用补料分批培养方法,在80 L发酵罐中对HER2/neu ECD工程菌进行高密度发酵,发酵温度28℃,pH值为4.4,溶氧范围25%以上。在湿重值达到180 g/L时开始诱导,甲醇诱导体积分数为0.5%,发酵时间96 h。发酵液离心后,上清经阳离子交换层析,对其表达产物进行纯化。结果表明:在优化发酵条件下,发酵上清通过阳离子交换层析纯化,可获得纯度较高的重组HER2/neu ECD,产量为600 mg/L。
- 韩冬徐煌牟旭鹏孔宁颜炜群关铭
- 关键词:毕赤酵母发酵
- 一种克服阿霉素耐药的脂质体前药的制备和应用
- 本发明属于医药物技术领域,涉及一种克服阿霉素耐药的脂质体前药的制备和应用,本发明设计合成了一种二硫键连接布喹那(BQR)和阿霉素(DOX)的前药。在此基础上将前药用构建的靶向脂质体(DSPE‑PEG<Sub>2000</...
- 牟旭鹏路海滨
- 水曲柳皮总香豆素提取工艺研究被引量:3
- 2008年
- 目的筛选水曲柳总香豆素的最佳提取工艺。方法采用正交实验设计L9(34)考察浸渍时间,乙醇浓度,水浴温度,提取时间4个因素对提取工艺的影响。结果水曲柳中总香豆素含量的最佳工艺为水曲柳粗粉加25倍量95%乙醇,室温超声提取45 min。结论优选的超声提取条件工艺简单,成本低,节能省时,可增加水曲柳的利用率。
- 陈玉娟张宏桂孙严彤王会堂贺丽鹏牟旭鹏
- 关键词:水曲柳正交实验总香豆素
- 禽流感病毒感染K-562和HL-60肿瘤细胞系的实验研究被引量:1
- 2013年
- 目的选择代表不同骨髓细胞分化阶段的血液肿瘤细胞株K-562、HL-60作为研究对象,选取低致病性禽流感病毒H3N2/H4N6作为病原体,探讨禽流感病毒感染骨髓的机制。方法应用流式细胞术检测K562等细胞表面禽流感病毒受体;收集感染病毒的细胞培养上清,红细胞凝集实验检测染毒细胞释放的子代病毒;收集感染病毒的细胞免疫荧光检测病毒NP,判断病毒吸附、进入细胞并在细胞内增殖、复制情况。结果所检测细胞表面均有禽流感病毒SAα2,3-Gal和SAα2,6-Gal连接的唾液酸寡糖受体的表达。在H3N2感染的K-562细胞培养上清中检测到病毒HA,且随培养时间的延长,病毒的血凝滴度增大。在H4N6感染的K-562细胞的培养上清中病毒HA检测阳性,第三天,K-562细胞上清的病毒血凝滴度即达4,第四天达16;HL-60细胞,只在第三、四天达2;随后荧光显微镜下观察可见,染毒细胞培养0h时,胞膜、胞浆内即可见病毒分布,H4N6感染的细胞荧光强度大于H3N2感染的细胞;H3N2和H4N6感染的细胞中,K562细胞的荧光强度大于其他细胞。随着培养时间的延长,K562细胞表面的病毒增多,而HL-60细胞无明显变化。结论 K-562、HL-60细胞表面均表达禽流感病毒SA-α2,3Gal和SA-α2,6Gal连接的唾液酸寡糖受体。同一病毒H3N2或H4N6的吸附、繁殖和复制及释放情况存在较大差异。
- 张红梅赵丹吴玫牟旭鹏周伯平
- 关键词:禽流感病毒植物凝集素
- 流感病毒M2e蛋白的制备及其抗甲型流感病毒研究
- M2 (Matrix protein 2,M2)蛋白是流感病毒主要的膜蛋白之一。研究发现,针对M2蛋白的单克隆抗体在细胞培养中具有抑制流感病毒复制的功能。进一步证明,M2蛋白胞外功能区(Extracellular dom...
- 牟旭鹏
- 关键词:人血清白蛋白甲型流感病毒毕赤酵母
- 文献传递