潘伟男 作品数:12 被引量:86 H指数:8 供职机构: 南华大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省教育厅优秀青年基金 湖南省高校科技创新团队支持计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
14-3-3蛋白的研究进展 被引量:12 2007年 14-3-3是一个在真核生物中广泛表达的酸性蛋白家族,主要以同源/异源二聚体形式存在,通过磷酸化丝/苏氨酸作用与靶蛋白或靶蛋白的2个结构域结合。7种不同亚型的高度保守的14-3-3蛋白与人类细胞中多种不同的信号通路有密切的关系。14-3-3通过调节靶蛋白间的相互作用在信号转导途径中发挥调控作用。 潘伟男 陈锋 封芬 陈临溪关键词:二聚体 蛋白磷酸化 蛋白质相互作用 信号转导 14-3-3参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径研究(英文) 被引量:8 2011年 本室以前已经报道了G蛋白偶联受体APJ的内源性配体多肽,apelin-13,通过激活ERK1/2促进大鼠血管平滑肌细胞增殖.本文研究14-3-3信号蛋白是否参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径,探讨apelin/APJ系统的细胞信号转导机制.组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs;Western blotting方法检测14-3-3、pRaf-1、Raf-1、pERK1/2、ERK1/2、cyclinD1、cyclinE的表达;MTT方法观察14-3-3抑制剂Difopein对VSMCs的增殖作用;免疫共沉淀方法检测14-3-3和Raf-1蛋白复合物的形成.Western blotting方法结果显示,apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)浓度依赖性刺激大鼠VSMCs 14-3-3表达、Raf-1和ERK1/2磷酸化,以2μmol/L最为明显;2μmol/L apelin-13时间依赖性刺激大鼠VSMCs 14-3-3表达、Raf-1和ERK1/2磷酸化,在4 h增加最为显著;14-3-3蛋白抑制剂Difopein明显抑制apelin-13诱导的Raf-1磷酸化、ERK1/2磷酸化、cyclinD1及cyclinE表达;免疫共沉淀方法发现apelin-13诱导14-3-3与Raf-1结合增加,而Difopein明显抑制两者结合;MTT法显示Difopein明显抑制apelin-13诱导的血管平滑肌细胞增殖.上述结果表明,Apelin-13通过14-3-3/Raf-1复合物-ERK1/2信号转导通路促进大鼠血管平滑肌细胞增殖. 潘伟男 李峰 毛小环 秦旭平 邓水秀 封芬 陈锋 李兰芳 廖端芳 陈临溪关键词:APELIN APJ RAF-1 ERK1/2参与自发性高血压大鼠离体血管环对apelin-13舒张反应性降低作用 被引量:15 2009年 研究自发性高血压大鼠(spontanously hypertensive rat,SHR)离体血管环对G蛋白偶联受体APJ的内源性配体apelin-13的血管收缩与舒张反应及其与一氧化氮(NO)和ERK1/2通路关系.采用离体血管环体外灌流方法用Power-Lab生物信息采集仪检测血管环的张力.实验分组如下:新福林(Phenylephrine,PE)组,乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)组,apelin-13组,apelin-13+PE组,apelin-13+Ach组,PD98059(ERK1/2抑制剂)+PE组,PD98059+Ach组,LNNA(L-nitro-arginine,硝基左旋精氨酸,一氧化氮合酶抑制剂)+PE组,LNNA+Ach组,apelin-13(预孵育)+PD98059+PE组,apelin-13(预孵育)+PD98059+Ach组,apelin-13(预孵育)+LNNA+PE组和apelin-13(预孵育)+LNNA+Ach组,以WKY大鼠血管环为对照组.培养大鼠血管平滑肌细胞,Western blot检测ERK1/2蛋白表达.结果显示:a.apelin-13对于有内皮的血管表现出浓度依赖性舒张作用,血管舒张百分比SHRWKY大鼠,apelin-13预孵育,能减少SHR和WKY大鼠血管对新福林的缩血管反应性,增加对乙酰胆碱的舒张反应性;b.NOS抑制剂LNNA阻断NO形成后,血管环对apelin-13的舒张反应明显抑制,且SHR组较WKY组对apelin的舒张反应减少更明显,提示apelin-13的舒血管效应至少部分依赖NO通路,而SHR高血压大鼠NO通路障碍减弱了apelin对血管的舒张作用;c.ERK1/2抑制剂PD98059预孵育后血管环对apelin-13表现出浓度依赖性的收缩,与去除内皮后apelin-13的收缩血管效应趋势一致,血管收缩张力SHR>WKY大鼠,PD98059逆转了apelin-13引起的血管舒张效应;d.Apelin-13促大鼠VSMCsERK1/2磷酸化增加并呈剂量依赖性和时间依赖性,ERK1/2抑制剂PD98059可以减少apelin-13诱导ERK1/2的磷酸化.结果表明,自发性高血压大鼠离体血管环对apelin-13舒张反应性降低,NO通路和ERK1/2通路介导了apelin-13的舒张血管作用. 刘厂辉 李新 陈锋 潘伟男 封芬 秦旭平 李兰芳 苏桃 陈临溪关键词:APELIN-13 APJ 一氧化氮合酶 自发性高血压大鼠 蛋白质组学技术在心血管疾病中的应用 2007年 蛋白质组学是研究蛋白质组的一个新兴科学,主要采用双向凝胶电泳、质谱分析、蛋白质芯片和生物信息学等高通量、自动化技术研究组织或细胞全部蛋白质变化。蛋白质组学技术已广泛应用于心力衰竭、冠心病、高血压、心肌肥厚、心肌病和心肌缺血再灌注等心血管疾病的发病机制研究,发现了以蛋白质组变化为特征的新发病机理,为药物防治提供了新的思路和方法。 封芬 潘伟男 陈临溪关键词:蛋白质组 蛋白质组学 心血管疾病 APJ受体内源性配基apelin的组织分布及对血压的影响 被引量:22 2007年 目的观察APJ受体内源性配基apelin的心、脑、肾和血管等组织分布及对血压的影响,对apelin的心血管系统功能进行初步的探讨。方法用免疫组织化学方法检测apelin的组织分布。用PowerLab生物信号采集分析系统观察大鼠动脉血压、心率和动脉压力感受性反射敏感度的变化情况。结果apelin在心、脑、肾和血管等心血管系统有较广泛的分布;静脉注射apelin-13血压在2min内下降,并能维持5min,呈剂量依赖性,动脉压力感受性反射敏感度显著下降,但对心率无明显影响。结论apelin在心、脑、肾和血管等组织有分布,外源性apelin发挥降血压的作用。 李兰芳 封芬 潘伟男 陈锋 廖端芳 朱炳阳 陈临溪关键词:APELIN 孤儿G蛋白偶联受体 肾素-血管紧张素系统的新认识 被引量:15 2006年 潘伟男 封芬 陈锋 陈临溪关键词:肾素-血管紧张素系统 血管紧张素转化酶2 APELIN 血管紧张素1 内环境稳态 RAS Apelin-13促血管平滑肌细胞增殖作用研究 被引量:13 2007年 目的研究G蛋白偶联受体APJ的内源性配体Ape-lin-13对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)生长增殖影响及其与细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的关系,发现Apelin-APJ新功能。方法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,噻唑蓝比色法(MTT)观察VSMC增殖;流式细胞仪分析细胞周期;Western blot检测cyclinD1的表达。结果Apelin-13能促进血管平滑肌细胞增殖,降低G0/G1期细胞百分比,升高S+G2+M期细胞百分比,并可剂量依赖性刺激细胞cyclin D1的表达增加。结论Apelin-13能通过推动细胞周期由G0/G1期进入S期而促进血管平滑肌细胞增殖,其作用机制与促进cyclin D1表达增高有关。 李峰 李兰芳 秦旭平 潘伟男 封芬 陈锋 朱炳阳 廖端芳 陈临溪关键词:APELIN APJ 血管平滑肌细胞 细胞周期蛋白D1 Apelin促大鼠血管平滑肌细胞增殖的14-3-3—ERK1/2信号通路研究 目的:研究apelin-13通过PKC和14-3-3蛋白对大鼠VSMCs增殖和磷酸化ERK1/2的影响以及14-3-3与Raf-1之间的相互结合作用,探讨apelin-APJ系统的信号转导机制。
方法:组织贴块... 潘伟男关键词:血管平滑肌细胞 细胞增殖 信号转导机制 文献传递 Apelin-13促大鼠血管平滑肌细胞增殖的PKC-ERK1/2信号通路研究 被引量:11 2008年 目的研究G蛋白偶联受体APJ(血管紧张素受体样受体或称血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白,putativere-ceptor protein related to the angiotensin receptor AT1)的内源性配体apelin-13通过PKC-ERK1/2-Cyclins信号通路促进大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法培养SD大鼠胸主动脉VSMCs,Western blot检测p-ERK1/2、ERK1/2、细胞周期蛋白CyclinD1和CyclinE的表达,四噻唑蓝比色法观察PKC阻断剂GF109203X对apelin-13促大鼠VSMCs增殖的影响。结果Apelin-13剂量依赖性和时间依赖性地促进大鼠VSMCsp-ERK1/2表达增加,对ERK1/2表达没有明显影响,GF109203X可明显抑制apelin-13诱导的细胞增殖及p-ERK1/2、CyclinD1和CyclinE的表达。结论Apelin-13促进大鼠VSMCs增殖可能与ape-lin-APJ-PKC-ERK1/2-Cyclins信号通路有关。 潘伟男 封芬 陈锋 秦旭平 朱炳阳 李峰 李兰芳 陈临溪关键词:APELIN APJ 细胞周期蛋白 P-ERK1/2 大鼠心肌APJ受体及caveolin-1/ERK1/2表达的年龄变化研究 被引量:8 2008年 目的apelin是新发现的内源性肽,其受体是G蛋白偶联受体APJ,该实验比较不同年龄大鼠心肌APJ受体及信号分子caveolin-1/ERK1/2的表达差异。方法采用West-ern blot方法观察胎鼠、乳鼠、成年鼠、老龄鼠等不同年龄阶段心肌组织APJ受体、ERK1/2、pERK1/2、caveolin-1的表达及其增龄性变化。结果随年龄增长APJ受体、caveolin-1表达增加,ERK1/2及pERK1/2随年龄增长表达减少。结论APJ受体及其caveolin-1/ERK1/2途径可能与心脏的生长发育、衰老过程有关。 封芬 潘伟男 陈锋 秦旭平 张先慧 李芳 朱炳阳 陈临溪关键词:APELIN 心肌 CAVEOLIN