李姣
- 作品数：17 被引量：13H指数：2
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生建筑科学更多>>
- 信号肽对鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白重组分子在COS7细胞上分泌表达的影响被引量：4
- 2008年
- 分别将鸡Igλ轻链信号肽、小鼠纤溶酶原信号肽与pEGFP-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合,产生带有信号肽的中间载体pEGFP-SPc和pEGFP-SPm。对鸡Igλ轻链基因的定向克隆,构建了带有纯化标签的鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-SPc-λ和pEGFP-SPm-λ。转染COS7细胞后,荧光显微镜观察及Western blotting检测融合蛋白的分泌表达,结果显示,鸡Igλ轻链信号肽能引导鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白融合分子的分泌表达;而小鼠纤溶酶原信号肽不具备引导该重组蛋白分泌表达的功能。表明信号肽在蛋白分泌表达中的关键作用,重组蛋白的分泌表达要选择合适的信号肽。
- 张红王健李姣易明林韩鸿鹏张改平
- 关键词：绿色荧光蛋白分泌表达
- 鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白GFP融合分子在COS7细胞内的表达被引量：1
- 2008年
- 将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2蛋白基因插入增强型绿色荧光表达载体pEGFP-C1中,构建了真核表达载体pEGFP-VP2。PCR与酶切鉴定结果表明VP2基因成功插入到表达载体pEGFP-C1中。脂质体法转染COS7细胞后,荧光显微镜检测到了GFP-VP2融合蛋白的表达。用200μg/ml的G418成功筛选到了稳定表达GFP-VP2融合蛋白的细胞系,表达蛋白经镍亲和柱得到了纯化。
- 李姣张红张改平王爱萍易明林郅玉宝鲁琨张丽萍
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2蛋白真核表达GFP融合蛋白
- 一种猪-鼠B细胞杂交瘤的制备方法
- 2009年
- 目的:探索一种异源杂交瘤细胞株建立的方法.方法:以CSFV分点肌肉注射健康猪,成功诱导机体产生抗CS-FV的抗体.取免疫猪脾脏与鼠骨髓瘤细胞NS0融合,经筛选与克隆以获得猪源抗CSFV的mAb,并测定mAb的中和性及其效价.结果:成功筛选到15株抗CSFV的猪源mAb,中和实验结果表明9株mAb具有中和性,且同样识别重组的E2蛋白.结论:猪源mAb的成功制备为揭示CSFV在猪体内的免疫机制奠定了基础.
- 李姣郭建英王爱萍邓瑞广张淑杰游雷鸣
- 关键词：CSFVE2蛋白原核表达
- 鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白B细胞结合表位的研究
- 传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)是引起鸡传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)的致病病原体,主要侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏...
- 李姣
- 关键词：鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白
- 文献传递
- 重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定
- 2008年
- 目的:构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链,制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb)。方法:PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因,限制性酶切消化后,定向克隆于真核表达载体pcDNA3,构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ。重组载体转染COS7细胞后,SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达。用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合,分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆。结果:成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体,SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达。杂交瘤细胞经筛选与鉴定,获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株,Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性。结论:构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链。并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb。为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础。
- 张红张改平章金刚杨艳艳易明林李姣韩鸿鹏
- 关键词：COS7细胞单克隆抗体
- 鸡免疫球蛋白λ轻链绿色荧光蛋白重组分子在COS7细胞的分泌表达
- 本研究将鸡Igλ轻链信号肽与pEGFP·C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体pEGFP-C1-SP，通过对鸡Igλ轻链基因的定向克隆，构建了带有纯化标签的鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达载体。转染COS...
- 张红李姣王丽席俊
- 关键词：绿色荧光蛋白COS7细胞分泌表达
- 草果醇提物对糖尿病大鼠糖脂代谢及氧化应激影响的研究
- 目的：本研究拟通过高脂高糖饮食结合链脲佐菌素的方法构建2型糖尿病大鼠模型，使用草果醇提物灌胃干预6周，观察其对糖尿病大鼠各项指标的影响，探讨草果醇提物对2型糖尿病大鼠血糖、脂质代谢、氧化应激状态的影响及对胰腺组织损伤的保...
- 李姣
- 关键词：糖脂代谢氧化应激实验药理
- 文献传递
- 鸡免疫球蛋白λ轻链绿色荧光蛋白重组分子在COS7细胞的分泌表达
- 将鸡Igλ轻链信号肽与pEGFP-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体pEGFP-C1-SP,通过对鸡Igλ轻链基因的定向克隆,构建了带有纯化标签的鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达载体。转染COS7细胞...
- 张红李姣王丽席俊
- 关键词：绿色荧光蛋白COS7细胞分泌表达
- 文献传递
- 荧光标记的T7噬菌体在噬菌体展示技术中研究配体/受体相互作用的应用
- 本研究将法氏囊病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2展示到T7噬菌体表面，重组噬菌体用PEG沉淀法纯化后用FITC标记，并用此标记的噬菌体与病毒受体细胞法氏囊B细胞结合，荧光显微镜下观察。结果展示有IBDV VP2蛋白的噬菌体经...
- 李姣王爱萍张红张改平王选年鲁琨王秋霞冯丽丽
- 关键词：噬菌体展示传染性法氏囊病毒VP2蛋白
- 荧光标记的T7噬菌体在噬菌体展示技术中研究配体/受体相互作用的应用
- 将法氏囊病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2展示到T7噬菌体表面,重组噬菌体用PEG沉淀法纯化后用FITC标记,并用此标记的噬菌体与病毒受体细咆法氏囊B细胞结合,荧光显微镜下观察。结果展示有IBDV VP2蛋白的噬菌体经FIT...
- 李姣王爱萍张红张改平王选年鲁琨王秋霞冯丽丽
- 关键词：噬菌体展示VP2蛋白
- 文献传递
