张欣欣
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：大连大学附属中山医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰致FRAT1基因沉默结肠癌HT29细胞模型的建立被引量：1
- 2014年
- 目的利用shRNA表达载体建立FRAT1基因沉默结肠癌HT29细胞模型。方法将化学方法合成的特异性FRAT1基因siRNA,以人类结肠癌HT29细胞为实验对象,采用Lipofectamine将FRAT1基因的shRNA表达载体导入细胞后,用RT-PCR和Western blot检测目标基因FRAT1的表达水平。结果稳定转染FRAT1 shRNA表达载体(pSINsi-FRAT1)后,FRAT1基因在mRNA和蛋白质表达水平分别下降92.63%、55.72%(P<0.05)。结论成功地建立了FRAT1基因沉默HT29细胞模型,为研究FRAT1生物学功能打下坚实的实验基础。
- 于庆功谷伟王苏雅张欣欣杨子荣李文哲
- 关键词：结肠癌转染RNA干扰
- FRAT1基因真核表达质粒的构建与鉴定
- 2013年
- 目的构建FRAT1siRNA真核干涉表达载体pSINsi-FRAT1,并测序鉴定证实克隆正确。方法设计以FRAT1基因为靶标的RNAi序列和阴性对照片段序列,并克隆入载体pSINsi-hU6,用基因测序进行重组克隆验证。结果 PCR检测证实siRNA插入pSINsi-hU6质粒,测序分析证实插入序列正确。结论成功构建FRAT1基因的RNAi载体,为研究FRAT1基因对结肠癌细胞增殖凋亡侵袭的影响提供了稳定转染的RNA干扰质粒。
- 于庆功张欣欣谷伟王苏雅杨子荣
- 关键词：RNA干扰结肠癌
- 沉默FRAT1基因对结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及其机制研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨沉默FRAT1基因对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响及其可能分子机制。方法将成功转染FRAT1基因RNA干扰序列的人结肠癌HT-29细胞扩大培养,MTT比色法检测细胞增殖,双染流式细胞术检测细胞凋亡率,单染流式细胞术分析细胞周期,免疫荧光法激光共聚焦显微镜下观察β-catenin蛋白变化。结果转染组细胞较对照组细胞生长明显减缓(P<0.01),凋亡率明显增加(P<0.01),细胞周期出现G0/G1期阻滞,差异显著(P<0.01),胞质β-catenin蛋白表达明显下调。结论 FRAT1基因RNA干扰序列可以有效诱导结肠癌HT-29细胞凋亡和细胞周期阻滞,抑制细胞增殖,其机制可能通过下调β-catenin表达实现。
- 王苏雅于庆功谷伟张欣欣杨子荣李文哲
- 关键词：结肠癌Β-CATENIN增殖凋亡
